BCR-ABL-pIRES-GM-CSF融合基因疫苗在BALB/c小鼠中安全性的检测

论文摘要

目的检测慢性粒细胞白血病的BCR-ABL-pIRES-GM-CSF融合基因DNA疫苗的安全性。方法SPF级雄性BALB/c小鼠随机分成正常对照组、pIREs组、pIREs-GM-CSF组、BCR-ABL-pIRES组、BCR-ABL-pIRES-GM-CSF组。首先用RT-PCR检测肌肉注射部位DNA疫苗表达情况；其次用Western blotting和ELISA法检测小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ的表达；最后用光镜观察肝、脾、肾和注射部位肌肉的细胞形态学变化和电镜法观察肝和肾亚细胞的形态学变化。结果1、小鼠的一般情况观察,正常对照组和实验组间没有明显的差异,正常对照组和实验组间体重差异没有统计学意义（p>0.05）；2、RT-PCR检测发现：pIREs组,pIREs-GM-CSF组,BCR-ABL-pIRES组,BCR-ABL-pIRES-GM-CSF组从局部注射部位肌肉成功扩增出BCR/ABL基因片段,表明DNA疫苗在体内表达；3、Western blotting方法和ELISA方法显示：小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ的表达,正常对照组和实验组差异没有明显的统计学意义（p>0.05）；4、光学显微镜和电子显微镜观察：光镜下,正常对照组和实验组肝、肾、脾和注射部位肌肉细胞形态结构基本正常,没有出现明显的病理变化。电镜下,正常对照组和实验组肝细胞和肾细胞核膜清晰,线粒体结构完整,溶酶体和内质网等细胞器结构完整。结论BCR-ABL-pIRES-GM-CSF融合基因DNA疫苗免疫BALB/c小鼠是可耐受的,并具有良好的安全性。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 目录
• 1 前言
• 1.1 BCR/ABL融合基因
• 1.2 基因佐剂
• 1.3 DNA疫苗与白血病疫苗
• 1.4 DNA疫苗的免疫原性和安全性
• 1.5 IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ等细胞因子的生物学性状
• 1.6 本研究的目的、内容及意义
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 研究方法
• 2.3 主要仪器设备及耗材
• 3 结果
• 3.1 实验动物的一般情况观察
• 3.2 注射部位肌肉的免疫原性检测
• 3.3 小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ的表达
• 3.4 细胞和亚细胞形态学观察
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 英文缩略词
• 在学期间发表论文
• 致谢