导读:本文包含了型旋转式生物反应器论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:髓核细胞,生物反应器,组织工程
型旋转式生物反应器论文文献综述
张文捷,张亮,赵春明,张威[1]（2013）在《旋转式生物反应器内构建组织工程椎间盘》一文中研究指出目的:探讨旋转式生物反应器(RCCS)对髓核细胞功能表达和组织工程髓核结构的影响。方法:将体外扩增培养的兔髓核细胞接种于聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架上。治疗组在RCCS内培养,对照组静态培养。培养4周后取出细胞与支架复合物,行大体标本观察、组织学和免疫组织化学染色观察。结果:RCCS下构建的组织工程髓核的厚度、大小及组织弹性好于对照组,Ⅱ型胶原免疫组化染色面积百分比明显高于对照组(15.0±4.6比6.5±2.2),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:旋转式生物反应器能促进髓核细胞增加Ⅱ型胶原的分泌,有利于在体外构建组织工程髓核。(本文来源于《吉林医学》期刊2013年14期）
晁洋,倪华,兰青艳,李娟,王卫华[2]（2011）在《使用旋转式生物反应器体外扩增人表皮细胞》一文中研究指出目的:使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统大规模扩增人表皮细胞(hECs)。方法:使用中性蛋白酶和胰蛋白酶-EDTA两步骤法从人皮肤中分离出人表皮细胞,使用DIL标记细胞后结合微载体后在旋转式生物反应器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的生长状态使用倒置显微镜,扫描电镜观测。并且分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。结果:在旋转式生物反应器的微重力培养体系中,人表皮细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。结论:使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人表皮细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2011年13期）
晁洋[3]（2011）在《旋转式生物反应器内微载体培养扩增皮肤相关细胞及微粒皮肤的初步制备》一文中研究指出随着细胞培养技术的发展,对皮肤相关细胞的培养,特别是人表皮细胞的培养有了很大的进展。在适宜的培养条件下,单个细胞在培养中不断增殖,逐渐融合成片状,形成了类似皮肤表皮层的上皮组织。这使得在较短的时间里,用大量表皮细胞培育成小片状的上皮组织成为可能。临床工作中,外科医生和细胞生物学家们也大量培养自体表皮细胞并用来修复皮肤缺损的病人。表皮细胞培养技术也从使用含血清培养液和细胞滋养层的培养方式,到不含血清、无滋养层的培养方式。培养方法的发展也促进了临床应用,从最初的细胞悬液移植到自体异体细胞膜片移植,以及表皮细胞生物材料复合物移植。培养和移植方法的发展使人们在治疗大面积皮肤缺损方面看到了希望。细胞培养技术对研究动物细胞的结构、功能和分化过程中的作用非常重要。因此,将微载体培养技术应用到贴壁依赖型细胞的大量培养,使上述研究进入到了一个新的层次。在微载体培养环境中,通过在培养液中轻柔的转动或者搅拌,细胞在微球表面呈现单层或者复层生长,在这种无复杂结构的悬浮培养体系中,可获得2x10~8个/毫升的细胞量。Cytodex微载体是GE Healthcare公司为大量培养各类动物细胞专门开发的微载体,其培养体系的容器可以从数毫升到数千升,非常适合大规模扩增细胞。这种微载体的表面对细胞生长过程中的贴附和伸展过程专门优化,它的直径和密度也非常适合悬浮状态大规模培养扩增各类细胞。构成微载体球体的基质材料生物稳定性很好,提供给细胞适宜的表面生长环境。透光的球体也很容易通过显微镜观察贴附之上的细胞。通过以往的广泛使用可以看出,cytodex十分适合作为微载体培养细胞。旋转式生物反应器是由一个水平轴旋转的培养容器和与其共轴的氧合器组成,当容器以水平轴开始旋转时,充满其中的培养液作为一个整体也发生旋转,这种方式使内容物受到极小的剪切力。培养体系中的细胞旋转时所受的离心力、重力和科氏力抵消,因此细胞能大体维持悬浮状态。培养体系中的细胞受到极小的机械力的同时获得大量的氧、营养物质的供应。细胞所需的气体通过硅橡胶膜微量而持续的交换,避免了旋转培养体系中出现大的气泡和涡流。在临床工作中,使用自体表皮,成纤维细胞快速有效的修复各类皮肤缺损对皮肤愈合有很大意义,而足够数量的种子细胞对构建组织工程皮肤非常重要。本研究尝试使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器作为培养系统,大规模扩增人真皮成纤维细胞和人表皮细胞,期待能为各类组织工程皮肤产品提供充足的种子细胞。第一部分实验成纤维细胞和表皮细胞的体外培养及鉴定1主要方法获取新生儿包皮切除术后组织,人表皮细胞使用中性蛋白酶和胰蛋白酶两步消化法获取;人真皮成纤维细胞使用胰酶消化组织块贴壁法获取。待原代培养成功后,常规传代。免疫组化方法进行抗波形丝蛋白、抗角蛋白染色,显微镜下观察。2主要结果倒置显微镜下观察细胞形态和生长情况。人表皮细胞呈圆形,细胞铺满培养瓶底,密度均匀。人真皮成纤维细胞呈长梭形,胞核饱满。免疫组化结果显示人真皮成纤维细胞抗波形丝蛋白染色阳性,人表皮细胞抗角蛋白染色为阳性。3主要结论通过鉴定,本实验所获取以及体外培养扩增的细胞分别为人真皮成纤维细胞和人表皮细胞。第二部分实验旋转式生物反应器培养扩增人真皮成纤维细胞1主要方法利用组织贴壁法从人皮肤中分离出人真皮成纤维细胞(hDFBs)进行体外培养,使用DIO标记细胞后结合微载体在旋转式生物反应器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的状况使用荧光显微镜,扫描电镜观测。并且检测细胞周期和分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。2主要结果在旋转式生物反应器的微重力培养体系中,人成纤维细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。3主要结论利用生物反应器和微载体悬浮培养人皮肤成纤维细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。第叁部分实验使用旋转式生物反应器体外扩增人表皮细胞1主要方法使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统大规模扩增人表皮细胞(hECs)。用中性蛋白酶和胰蛋白酶-EDTA两步骤法从人皮肤中分离出人表皮细胞,使用DIL标记细胞后结合微载体后在旋转式生物反应器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的生长状态使用倒置显微镜,扫描电镜观测。并且分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。2主要结果在旋转式生物反应器的微重力培养体系中,人表皮细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。3主要结论使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人表皮细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。第四部分实验使用旋转式生物反应器制备微粒皮肤1主要方法人表皮细胞的体外培养中,培养液中的血清成分有诱导分化作用,会使其过早的进入终末状态,增殖趋于停止,通常对表皮细胞的培养早期使用角质细胞无血清培养液(K-SFM )。而在人成纤维细胞在体外培养过程中,含血清的培养液对其增殖有利。考虑到两种细胞对培养液的不同要求,本实验分别尝试两种不同方法:培养液血清浓度梯度降低法和表皮培养液共培养法,使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统尝试制备微粒皮肤。并使用扫描电镜观察细胞的贴附生长状态。2主要结果表皮培养液共培养法中,微载体颗粒上有多角形的表皮细胞贴附,成纤维细胞贴附状态较差,部分从微载体上脱落。血清浓度梯度降低法中,微载体上有多角形的表皮细胞和梭形的成纤维细胞贴附,细胞贴附状态较好,但细胞密度较小。3主要结论使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养微粒皮肤,培养液的血清浓度对共培养的两种细胞影响较大,使用血清浓度梯度降低法的共培养体系效果较好。(本文来源于《第四军医大学》期刊2011-04-01）
刘超,白玲[4]（2010）在《旋转式厌氧膜生物反应器动力学模型研究》一文中研究指出本试验采用的新型浸没式双轴旋转厌氧膜生物反应器(Submerged Double-shaft RotaryAnaerobic Membrane Bioreactor,简称SDRAnMBR),能较好地解决浸没式厌氧MBR的膜污染控制问题。反映废水生物处理机理的数学模型是当今污水处理厂的设计和操作运行中不可缺少的重要内容,被广泛用于设计、控制、教学和研究等各个方面。本研究采用SDRAnMBR处理人工配制的模拟啤酒废水,对其在双轴旋转流特殊水动力学的环境下的有机物降解的动力学模型和微生物增长动力学模型进行了研究。通过试验和动力学推导得到SDRAnMBR相(本文来源于《华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会论文集》期刊2010-06-23）
倪明,谢慧琪,陈俊伟,杨志明,秦岭[5]（2009）在《利用旋转式生物反应器快速扩增骨髓间充质干细胞》一文中研究指出目的探讨旋转式生物反应器是否能促进骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)的快速扩增。方法将MSCs细胞放入盛有MyelocultTM培养液生物反应器中动态培养,并在MyelocultTM培养液中补充一些因子,如干细胞因子(SCF),白介素3和6(IL-3,IL-6)。检测和比较经反应器处理前后的MSCs的表型,增生和分化能力的变化。结果在生物反应器中培养8d,总细胞数、Stro-1+CD44+CD34-间充质干细胞和CD34+CD44+Stro-1-造血干细胞分别增加了9、29和8倍。实验研究结果显示,生物反应器扩增的间充质干细胞表达了原始间充质干细胞的标记物内皮因子(SH2)和波形蛋白,却没有发现与细胞系的分化有关的标记物,包括骨钙素(成骨指标),II型胶原(成软骨指标)和C/EBPα(成脂指标)。生物反应器组的细胞集落生成效率(成纤维细胞集落/天)是对照组(无生物反应器组)的1.44倍。经诱导后,生物反应器扩增的间充质干细胞可以分化成成骨细胞,软骨细胞和脂肪细胞,其分化能力与未经生物反应器处理的MSCs无区别。结论旋转式生物反应器结合改良的MyelocultTM培养液可用于快速扩增间充质干细胞。(本文来源于《医用生物力学》期刊2009年01期）
高峰[6]（2008）在《应用旋转式生物反应器体外构建组织工程软骨的实验研究》一文中研究指出目的:探讨应用HFB-40型旋转式生物反应器对构建组织工程软骨的影响。方法:无菌条件下解剖分离3-5天龄胎兔四肢关节软骨,将软骨片剪碎至约1mm~3大小,再用0.25%的胰蛋白酶和0.2%的Ⅱ型胶原酶依次消化后获取软骨细胞。体外扩增至第2代后,收集细胞并调整细胞浓度至4×10~7/ml,将所得软骨细胞接种于1mm×4mm×4mm大小长方体聚乳酸聚羟基乙酸聚合物(PLGA)支架上,培养一周后,随机分成A、B两组,每组10个支架。A组为实验组,培养于生物反应器内;B组为对照组,培养于普通培养瓶内。A组生物反应器转速维持在15-30转/分钟,保持软骨细胞—PLGA支架复合物在震荡环境下保持悬浮状态,每2-3天换液50%-60%;B组软骨细胞—PLGA支架复合物在静止的培养瓶培养。A、B两组连续培养4周。4周后采用HE染色法观察组织工程软骨细胞增殖及分布;甲苯胺蓝染色观察软骨细胞硫酸糖氨多糖(GAG)的分泌和分布;Ⅱ型胶原免疫组织化学染色观察软骨细胞Ⅱ型胶原分泌和分布,并用Image-proplus图象分析系统对Ⅱ型胶原免疫组织化学染色切片行Ⅱ型胶原半定量分析;并用1,9二甲基亚甲蓝法和小牛胸腺DNA法定量检测软骨细胞—PLGA支架复合物的GAG和DNA含量。结果:A组软骨细胞—PLGA支架复合物体积较大、较厚,表面光滑,弹性和光泽也明显优于B组,两组复合物HE染色组织学和甲苯胺蓝染色观察结果显示A组软骨细胞的生长情况明显优于B组;A、B两组Ⅱ型胶原染色面积百分比分别为(94.71±0.46)%和(63.87±1.39)%;GAG含量分别为459.167±4.682和335.282±5.110;DNA含量分别为14.25±0.147和10.84±0.112。两组之间Ⅱ型胶原染色面积百分比、GAG含量和DNA含量差异均十分明显,有统计学意义(p＜0.01)。结论:应用HFB-40型旋转式生物反应器,能够提供更加有利于软骨细胞在PLGA中生长的外部环境,促进软骨细胞增殖,并增加Ⅱ型胶原、GAG等细胞外基质的合成,更有利于组织工程软骨的形成。(本文来源于《南京医科大学》期刊2008-04-01）
高峰,范卫民,崔维顶,马益民,朱长仁[7]（2008）在《应用旋转式生物反应器体外构建组织工程软骨具优越性》一文中研究指出目的:应用HFB-40型旋转式生物反应器体外培养一定形状的人工软骨组织,为组织工程软骨应用于更广泛的领域打下基础。方法:将第3代兔软骨细胞接种于2mm×4mm×4mm的长方体聚乳酸聚羟基乙酸聚合物(PLGA)上,随机分为A、B两组。A组为实验组,培养于生物反应器内;B组为对照组,培养于普通培养瓶内。4周后定量检测支架中氨基糖胺聚糖(GAG)、DNA含量,分析Ⅱ型胶原免疫组织化学染色面积百分比差异。结果:实验组支架-细胞复合体体积较大,较厚,表面光滑,有弹性,有光泽,其GAG、DNA含量以及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色面积百分比明显高于对照组(P<0.01)。结论:生物反应器相对于普通的培养瓶,能够提供更加有利于软骨细胞在PLGA中生长的外部环境,更有利于组织工程软骨的形成。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2008年03期）
钟鹏,黄华,杨承凯,张廷芳[8]（2008）在《旋转式组织工程生物反应器检测控制及驱动系统》一文中研究指出目的生物反应器是组织工程的重要载体,旋转式生物反应器是目前研究的热点。本文探讨了可提供优良环境条件的可控生物反应器系统的设计与实践。方法系统采用PWM可调驱动直流电机等;同时可对温度等物理量进行检测,并反馈控制调节反应器;测控系统与PC连接,可实现远程视频监测控等,使整个组织生物反应器系统初步实现了分步式、自动化。结果经实验系统培养所得到的细胞相对于一般培养细胞其生物学特性有相当的改善。结论自动化旋转式生物反应器驱动控制的实践具有较大的应用推广价值。(本文来源于《航天医学与医学工程》期刊2008年01期）
李彬,张西正,吴金辉,郭勇[9]（2005）在《乳鼠成骨细胞与珊瑚-羟基磷灰石支架材料在旋转式生物反应器中培养的实验研究》一文中研究指出目的探讨联合运用成骨细胞、珊瑚-羟基磷灰石(CHA)支架材料和自行研制的旋转式生物反应器在体外构建组织工程化骨的可行性。方法运用骨片组织培养法,分离培养Wistar乳鼠的成骨细胞,传至第3代后,形成成骨细胞-CHA复合物,然后在自行研制的生物反应器中培养。通过茜素红(ARS)染色,MTT法及其他组织化学的方法来研究在生物反应器中培养14d时的成骨潜能。结果成骨细胞和CHA支架材料有良好的生物相容性。在生物反应器中,成骨细胞-CHA复合物培养至第14天时,CHA明显促进了细胞的增殖,ARS染色呈弱阳性反应,同时,碱性磷酸酶(ALP)的分泌减少。结论CHA材料和生物反应器可以为成骨细胞提供良好的生物学及力学环境,叁者联合运用有希望成为构建组织工程骨的理想方法。(本文来源于《生物医学工程与临床》期刊2005年03期）
型旋转式生物反应器论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统大规模扩增人表皮细胞(hECs)。方法:使用中性蛋白酶和胰蛋白酶-EDTA两步骤法从人皮肤中分离出人表皮细胞,使用DIL标记细胞后结合微载体后在旋转式生物反应器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的生长状态使用倒置显微镜,扫描电镜观测。并且分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。结果:在旋转式生物反应器的微重力培养体系中,人表皮细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。结论:使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人表皮细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
型旋转式生物反应器论文参考文献
[1].张文捷,张亮,赵春明,张威.旋转式生物反应器内构建组织工程椎间盘[J].吉林医学.2013
[2].晁洋,倪华,兰青艳,李娟,王卫华.使用旋转式生物反应器体外扩增人表皮细胞[J].现代生物医学进展.2011
[3].晁洋.旋转式生物反应器内微载体培养扩增皮肤相关细胞及微粒皮肤的初步制备[D].第四军医大学.2011
[4].刘超,白玲.旋转式厌氧膜生物反应器动力学模型研究[C].华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会论文集.2010
[5].倪明,谢慧琪,陈俊伟,杨志明,秦岭.利用旋转式生物反应器快速扩增骨髓间充质干细胞[J].医用生物力学.2009
[6].高峰.应用旋转式生物反应器体外构建组织工程软骨的实验研究[D].南京医科大学.2008
[7].高峰,范卫民,崔维顶,马益民,朱长仁.应用旋转式生物反应器体外构建组织工程软骨具优越性[J].南京医科大学学报(自然科学版).2008
[8].钟鹏,黄华,杨承凯,张廷芳.旋转式组织工程生物反应器检测控制及驱动系统[J].航天医学与医学工程.2008
[9].李彬,张西正,吴金辉,郭勇.乳鼠成骨细胞与珊瑚-羟基磷灰石支架材料在旋转式生物反应器中培养的实验研究[J].生物医学工程与临床.2005