年龄相关的基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）表达差异对小鼠急性心肌梗死后心脏破裂及早期左室重塑的影响

论文摘要

目的：心脏破裂是急性心肌梗死（AMI）最严重而并不少见的并发症，是心肌梗死主要死亡原因之一。临床研究表明老龄（年龄＞65岁）是心肌梗死后心脏破裂的独立危险因素，但目前机制尚不明确。最近研究表明小鼠AMI后会发生心脏破裂，是探讨AMI后心脏破裂机制的良好平台。本研究选择不同年龄小鼠建立左心室游离壁AMI模型，通过观察不同年龄小鼠心脏破裂的发生规律和心肌基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）的表达，探讨年龄因素对AMI后心脏破裂和早期左室重构的影响机制。方法：（1）分别选择12月龄（12-mo）及3（3-mo）月龄C57BL／6L小鼠各90只，随机分成：老龄心肌梗死（12-mo-MI）组70只、老龄假手术组（12-mo-SH）20只、低龄心肌梗死组（3-mo-MI）70只和低龄假手术组（3-mo-SH）20只。采用开胸结扎小鼠左冠状动脉的方法建立AMI模型；假手术组为同期开胸，于相同部位穿线但不结扎冠状动脉。观察术后心脏破裂发生率，同时应用经胸高频超声、有创血流动力学检查及病理组织学方法，评价不同年龄小鼠AMI后早期左室重构对心脏破裂的影响。（2）分别选择12月龄（12-mo）及3（3-mo）月龄C57BL小鼠各80只，随机分成：老龄MI组60只、老龄正常对照组20只、低龄MI60只和低龄正常对照组20只。采用开胸结扎小鼠左冠状动脉的方法建立AMI模型；并于术前、术后3d及术后7d处死小鼠收集心脏样本，应用酶谱法、病理胶原染色和免疫组化的方法，测定不同年龄小鼠术前、术后3d

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 年龄因素对小鼠心肌梗死后心脏破裂和早期左室重塑的影响
• 内容和方法
• 1.实验动物选择和分组
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验动物分组
• 2.小鼠左室前壁AMI模型的建立和心脏破裂的观察
• 2.1 术前麻醉
• 2.2 气管插管和机械通气
• 2.3 小鼠左室前壁AMI模型的建立
• 2.4 术后心脏破裂的观察
• 3.小鼠心脏超声的检查
• 4.小鼠心脏血流动力学的检查
• 5.大体病理检查和梗死面积测定
• 5.1 心脏破裂和心力衰竭的判定
• 5.2 器官重量的测定
• 5.3 梗死面积测定
• 6.组织病理学检查
• 6.1 心肌内出血和炎性细胞浸润评分
• 6.2 室壁厚度比和最大心内膜周长测定
• 7.统计学分析
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第二部分 年龄对小鼠急性心肌梗死后基质金属蛋白酶的表达、炎性反应的影响
• 内容和方法
• 1.实验动物选择和分组
• 1.1 实验动物选择
• 1.2 实验动物分组
• 2.小鼠左室前壁AMI模型的建立
• 2.1 术前麻醉
• 2.2 气管插管和机械通气
• 2.3 小鼠左心室前壁AMI模型的建立
• 3.术后标本采集方法
• 4.酶谱法测定MMP-2和MMP-9的表达
• 4.1 心肌组织液的抽提
• 4.2 蛋白裂解酶对MMPs的激活
• 4.3 酶谱法
• 5.细胞密度测定及心肌内出血和炎性细胞浸润评分
• 6.统计学分析
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第三部分 年龄对小鼠急性心肌梗死后心肌间质胶原重塑的影响
• 内容和方法
• 1.实验动物选择和分组
• 1.1 实验动物选择
• 1.2 实验动物分组
• 2.小鼠左室前壁AMI模型的建立
• 2.1 术前麻醉
• 2.2 气管插管和机械通气
• 2.3 小鼠左心室前壁AMI模型的建立
• 3.术后标本采集方法
• 4.天狼星红染色测定心肌间质胶原含量
• 4.1 试剂配制
• 4.2 染色方法
• 4.3 心肌间质胶原含量的测定
• 5.免疫组织化学测定Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量
• 5.1 载玻片的处理
• 5.2 常用酶消化
• 5.3 石蜡切片微波炉抗原修复操作方法
• 5.4 免疫组化染色
• 5.5 心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量的测定
• 6.统计学分析
• 结果
• 讨论
• 小结
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读博士学位期间发表的学术论文
• 个人简历