miR-155在乳腺癌患者血清中的异常表达

论文摘要

背景：MircoRNAs（miRNAs）是一类短序列、非编码、具有调控功能的单链小分子RNA,长约22 nt,由一段单链RNA前体（pre-miRNA）经过Dicer酶加工后生成。miRNAs通过与其靶mRNA分子的3’端非编码区（3’-UTR）互补结合,在翻译水平上特异性抑制基因表达。miRNAs广泛参与了生物体多种生理过程,如个体发育,细胞增殖、凋亡和分化,代谢与应激反应的调节,甚至疾病发生,包括肿瘤形成。miRNA参与了癌细胞重要的生物程序的调控,间接地起着促癌基因和抑癌基因的功能,在肿瘤的发生和发展中起了至关重要的作用。这使得miRNA成为了肿瘤学研究的热点和难点。循环核酸（circulating nucleic acid, CNA）是指存在于血液（血清或血浆）等体液中的细胞外游离DNA和RNA,与生理和病理状态下的细胞代谢密切相关,外周血中检出特异性miRNAs并将其作为生物学标志,对肿瘤早期诊断具有重要意义。miRNAs在血浆和血清中非常稳定,不受RNA裂解酶（RNases）影响,在长期储存或反复冻融等情况下仍能保持稳定,表明可以开发血循环中肿瘤来源的miRNAs作为生物标志物。目的：1.分析miR-155在乳腺癌患者和健康对照人群血清中的表达差异情况。2.结合临床病理资料,分析miR-155与临床病理资料的相关性。3.结合生物信息学技术预测miR-155的靶基因,为理解miR-155在乳腺癌发生发展中的作用机制提供依据。4.通过本研究,希望为乳腺癌的治疗提供新的分子靶点,为乳腺癌相关的诊断、预后标志物研究提供新的内容。方法：1.利用实时荧光定量PCR技术,检测并比较miR-155在20例乳腺癌病人和10例健康对照人群血清中的表达差异。2.结合临床病理资料进行统计学分析。3.应用不同的生物信息学方法对miR-155的靶基因进行预测。结果：1.乳腺癌患者血清中miR-155的表达较健康对照人群明显上调,差异有统计学意义（p<0.05）。2.血清miR-155在乳腺癌患者的临床分期、分子分型、Ki-67、P53方面的差异有统计学意义（p<0.05）,相对表达量Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,三阴型>HER-2（+）型>1uminalB型>1uminalA型,Ki-67（+）>Ki-67（-）,P53（-）>P53（+）,而在年龄、组织学分级、Her-2方面的差异无统计学意义（p>0.05）。在Ki-67（+）组中,不同分子分型、淋巴结情况的血清miR-155差异有统计学意义（p<0.05）,相对表达量HER-2>luminalB>luminalA.3.应用miRBase靶基因软件检索miR-155序列,应用Pictar.Targetscan和miRanda等Micro-RNA靶点预测软件对miR-155进行靶基因预测,在至少两个以上软件预测出的靶基因有92个。其中多个基因涉及细胞周期、信号转导、细胞增殖、分化和细胞凋亡等众多生物学过程,说明miR-155在乳腺癌发生发展中有着重要的生物学功能。结论：1.乳腺癌患者血清中miR-155的表达较健康对照人群明显上调,有望作为乳腺癌早期诊断的肿瘤分子标志物。2.乳腺癌血清中miR155与临床分期、分子分型、Ki-67、P53具有相关性,临床分期晚、激素受体阴性、Ki-67（+）、p53（-）miR-155表达量较高；反之较低。3.生物信息学预测miR-155可能通过调控下游靶基因的转录和翻译引起乳腺癌细胞生物学特性的改变。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语/符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、Micro-RNA在乳腺癌血清中的异常表达
• 1.1 对象和方法
• 1.1.1 标本来源
• 1.1.2 主要仪器与试剂
• 1.1.3 引物合成
• 1.1.4 实验方法
• 1.1.5 统计学分析
• 1.2 结果
• 1.2.1 实时定量PCR CT值提报告
• 1.2.2 扩增曲线及溶解曲线
• 1.2.3 miR-155在乳腺癌和对照组血清中的表达情况
• 1.2.4 乳腺癌患者miR-155与临床病理资料分析
• 1.3 讨论
• 1.3.1 Micro-RNA的生成及功能
• 1.3.2 Micro-RNA作为肿瘤标志物的前景
• 1.3.3 本研究的不足与展望
• 1.4 小结
• 二、miR-155靶基因的预测及生物信息学分析
• 2.1 对象和方法
• 2.1.1 程序和数据库
• 2.1.2 搜索方法
• 2.2 结果
• 2.2.1 miR-155的基本信息
• 2.2.2 miR-155的靶基因预测
• 2.2.3 miR-155靶基因发挥的主要生物学功能
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附录
• 综述
• 综述参考文献
• 致谢