骨髓基质干细胞移植途径对脑缺血治疗的影响

论文摘要

目的:缺血性脑血管病是一种严重危害人体健康和生活质量的疾病,其发病率、致残率和致死率均很高。随着社会人口老龄化,脑血管病的发病率不断升高。脑血管病已经成为人类死亡的三大主要原因之一,对缺血性脑损伤的治疗方法和治疗药物的研究是当前神经科学领域的研究热点之一。本研究采用骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,MSCs）不同途径移植来对大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型进行干预,探讨骨髓基质干细胞在急性局灶性脑缺血疾病治疗中的作用及其机制。方法:利用线拴法制作SD大鼠大脑中动脉缺血模型（MCAO） （ n = 80） ,随机均分为,缺血自然恢复组（A组）,缺血+磷酸盐缓冲液（ PBS）对照组（B组）,缺血+颈内动脉MSCs组（C组）和缺血+尾静脉MSCs组（D组）。缺血2h后再灌注,D组将2×106个MSCs通过尾静脉移植入脑缺血大鼠体内,C组将2×106个MSCs通过颈内动脉移植入脑缺血大鼠体内,B组经颈内动脉注入等体积的PBS液,不做任何处理。A组麻醉后,做好缺血模型后不作任何治疗性处理缝合皮肤。再灌注24小时后,分别观察神经行为学评分,脑梗死体积,尼氏小体平均灰度,凋亡相关基因Bcl-2,Bax及血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor, VEGF）的表达。结果:神经行为学评分:A组为（3.7±0.5）分,B组为（3.6±0.6）明显高于C组（2.0±0.6）和D组（3.0±0.4）,具有明显统计学差异（P<0.01）。而C组（2.0±0.6）与D组（3.0±0.4）相比,有统计学差异（P<0.01）。而B组与A组之间的差异无统计学意义。1、脑梗死体积:A组梗死体积为（208±26）mm3、B组为（210±18）mm3,C组为（130±17）mm3,D组为（174±20）mm3。C、D组梗死体积明显小于A、B组,有统计学差异（P<0.05）,而C组梗死面积又小于D组,有统计学意义（P<0.05）。A组和B组间无统计学上差异。2、病理形态学:1)尼氏小体:尼氏体的平均灰度值与细胞内尼氏体含量呈反比:平均灰度值越低,其细胞内尼氏体含量越高。A组为（178.18±21.66）,B组为（163.64±20.29）,C组为（124.36±14.85）,D组为（149.73±10.96）。C组尼氏体的平均灰度值最低,尼氏体含量最高。A组尼氏体的平均灰度值最高,尼氏体含量最低。C组和D组的平均灰度值与A组、B组相比明显下降,说明其细胞内尼氏体含量有明显提高,在统计学上有差异（P<0.01）。而C组的平均灰度值与D组相比明显下降,在统计学上有差异（P<0.01）,A组与B组相比无统计学意义。2) Bcl-2免疫组化染色:Bcl-2的过度表达具有神经元保护作用。Bcl-2的表达A组为（0.39±0.04）,B组为（0.41±0.03）,C组为（0.68±0.11）,D组为（0.55±0.02）。以C组为最高,与其他各组相比均具有统计学差异（P<0.05）,但A、B两组间无统计学意义。3) Bax免疫组化染色:细胞受损时Bax表达增强。Bax表达A组为（0.54±0.05）,B组为（0.45±0.03）,C组为（0.27±0.03）,D组为（0.34±0.04）。以A组表达最强,B组次之,C组最低,C组与A、B,D组相比具有统计学差异（P<0.05）,但A、B两组间无统计学意义。4) VEGF的表达:A组为（3.345±1.400,%）,B组为（3.940±0.945,%）,C组为（7.207±2.245,%）,D组为（5.856±1.920,%）。MSCs移植后,在脑内存活、迁徙、分泌血管内皮细胞生长因子（VEGF）,与其他组相比,C组VEGF含量明显增高,与各组相比均有统计学差异（P<0.05）。结论:1、移植MSCs治疗缺血性脑损伤具有较好的疗效,能够明显改善神经功能缺损。2、移植MSCs治疗缺血性脑损伤能够明显缩小梗死体积,减轻神经细胞水肿,改善神经细胞代谢。3、同样条件下颈内动脉移植MSCs治疗缺血性脑损伤时,治疗作用优于尾静脉移植MSCs。4、移植MSCs治疗缺血性脑损伤的可能机制是通过上调细胞凋亡相关基因Bcl-2/Bax的比值,减少神经细胞的凋亡;增加了VEGF的表达,促进新生血管形成,使缺血边缘区的血流改善,从而影响神经功能的恢复。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢