论文摘要
毛细管电泳（Capillary electrophoresis,CE）是80年代初建立并迅速发展起来的一种新型分离技术,具有分离效率高、分析速度快、样品和试剂消耗少、操作简便等特点,已广泛用于化学、生命科学、药物和环境等领域,是当前分析化学中发展迅速的一个学科。本学位论文围绕毛细管电泳在分离测定中草药活性组分中的应用进行了深入研究,建立了三种模型测定中草药活性组分的新方法。本论文第二部分充分利用了毛细管电泳中反向电压的特点,研究了反向电压在不同毛细管电泳模式中的应用,取得了以下几方面的创新研究:1.建立了分离测定绿原酸和咖啡酸的非水毛细管电泳新方法,并对山楂果实中的相应成分进行了分析。2.利用反向电压及分析物的性质,建立了大体积进样-非水毛细管电泳测定绿原酸和咖啡酸的新方法,极大的改善了灵敏度。3.利用反向电压建立反向迁移毛细管胶束电动色谱（RF-MEKC）法同时分离测定了槲皮素、芦丁、绿原酸,并将此方法应用于测定鱼腥草和山楂果实中的相应成分。本论文分两大部分共四章内容。第一部分是有关毛细管电泳理论及应用的进展,第二部分是研究报告:第一部分:文献综述第一章:简单介绍了CE的原理和特点、CE在药物研究中的应用以及反向电压在毛细管电泳中的一些应用。第二部分:反向电压在毛细管电泳不同模式中的应用以及应用于草药中活性成分的分离测定第二章:建立了分离测定山楂果实中活性有机酸的非水毛细管电泳新方法。该方法简单快速,分离条件为:35 mM Tris-0.7%醋酸的甲醇溶液、分离电压-25kV。在此最佳条件下,两种分析物可在10 min内实现基线分离。绿原酸和咖啡酸的线性范围均为20-200μg/ml,连续运行5次的迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为:2.82%和2.29%（日内）;4.02%和3.14%（日间）。样品中加入25、50、100μg/mL绿原酸标准溶液的回收率分别为98.7%、98.2%和97.5%;加入25、50、100μg/mL咖啡酸标准溶液的回收率分别为95.6%、102.5%和99.4%。第三章:利用大体积样品堆积法（LVSS）提高了非水毛细管电泳分析山楂果实中的活性有机酸的灵敏度。分离缓冲液为35 mM Tris-0.35%醋酸的甲醇溶液,分离电压为-25 kV,重力进样50 s。对Tris浓度、醋酸浓度、分离电压和进样时间等因素对分离及富集的影响做了系统研究。绿原酸和咖啡酸的线性范围均为0.625-20μg/mL,检测限（S/N=3）分别为0.08μg/ml和0.05μg/mL。该方法已用于生山楂中绿原酸和咖啡酸的含量测定,样品中加标回收率良好。第四章:应用反向电压建立反向迁移毛细管胶束电动色谱（RF-MEKC）法同时分离测定了鱼腥草和山楂果实中的槲皮素、芦丁和绿原酸。分离条件为:70 mMSDS-30 mM NaH2PO4、pH 2.1,分离电压-15 kV,检测波长214 nm。在此最佳条件下,分析物可在15 min内实现基线分离。槲皮素、芦丁和绿原酸的线性范围及线性相关系数分别为25-400μg/mL（r=0.9992）、25-400μg/mL（r=0.9992）和12.5-200μg/mL（r=0.9999）,三种分析物的检测限（S/N=3）分别为2.52μg/mL、3.10μg/mL和3.64μg/mL。槲皮素的回收率为98.5%～103.7%,芦丁的回收率为95.8%～97.6%、绿原酸的回收率为99.1%～103.8%。