论文摘要
目的:研究维药老鼠瓜的化学成分并筛选抗S180肿瘤的活性。方法:用80%的乙醇对老鼠瓜种子进行回流提取,提取浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得各部分浸膏。再采用硅胶柱层析、制备薄层层析法和重结晶等方法进行分离纯化。利用现代波谱技术(1H-NMR,13C-NMR)并结合化学方法对化合物结构进行解析。采用S180移植肿瘤动物模型,设立生理盐水组、模型组、环磷酰胺(CTX)组、老鼠瓜种子水提物和醇提物组。测定老鼠瓜种子提取物对S180小鼠肉瘤的抑制率、胸腺指数和脾指数;应用常规HE染色法观察肿瘤细胞形态学变化;利用流式细胞仪测定CD3、CD4、CD8、CD4/CD8的变化;MTT比色法测定T淋巴细胞增殖反应。结果:分离得到3个化合物并确定了它们的结构,鉴定的3个化合物分别为:棕榈酸(palmitic acid,Ⅰ)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoicacid,Ⅱ)和芦丁(rutin,Ⅲ)。老鼠瓜种子提取物能显著抑制S180小鼠肉瘤生长(P<0.01),与模型组相比胸腺指数和脾指数均提高(P<0.05),抑瘤率分别为44%和32%;肿瘤组织HE染色观察,给药组部分肿瘤细胞凋亡、体积较小,细胞核浓染;与肿瘤对照组比较,老鼠瓜种子提取物外周血T细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8均有明显改善且趋于正常。MTT显示老鼠瓜种子提取物对T淋巴细胞有增值作用:与生理盐水组比较,水提组虽无显著性差异(P>0.05)但从数值观察仍有增长,醇提组有显著性差异(P<0.01);与模型组比较水提组和醇提组均促进细胞增值(P<0.05),CTX组与生理盐水组和模型组比较12 h时均有显著性差异。结论:老鼠瓜种子提取物具有一定的抑瘤效果,其作用机理可能与改善荷瘤小鼠机体的细胞免疫功能有关。
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