重症肌无力胸腺瘤天然调节T细胞变化及其影响因素研究

论文摘要

重症肌无力（myasthenia gravis,MG）是一种神经肌肉接头传递障碍为特征的自身免疫性疾病,由T细胞辅助、由针对神经肌肉接头处乙酰胆碱受体的抗体介导,免疫平衡的破坏在其发病机制中起重要作用。天然调节性T细胞（naturaloccurring regulartory T cell,nTreg）细胞是一群能抑制免疫功能的负调控细胞,可以抑制其它免疫细胞的功能。Treg细胞高表达CD25（白细胞介素2受体的α链）、细胞毒性T细胞相关抗原4（CTLA4）和转化生长因子β（transforming growth factorβ,TGF-β）。最近的研究证实双叉头转录因子（forkhead/winged helix transcriptionfactor,FoxP3）是Treg细胞重要的标记分子,对于Treg细胞的发育和功能有重要作用。啮齿类动物模型证实CD4+CD25+Treg可以抑制MG等自身免疫性疾病的发生。然而Treg细胞在人类MG发病中的作用机制仍不明确。胸腺间质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）是一种IL-7样细胞因子,可以通过激活树突状细胞（dendritic cells,DC）,诱导nTreg细胞的发育和增殖。目前认为胸腺异常是MG发病起始器官,MG多伴有胸腺增生或胸腺瘤。为了进一步研究Treg细胞在MG发病机制中的作用及影响Treg细胞生成的因素,我们着眼于胸腺瘤中nTreg细胞数量和功能的变化,通过免疫组化检测不同病理类型胸腺瘤中nTreg细胞的数量变化,通过实时定量反转录PCR（Realtime reversetrancription polymerase chain reaction,realtime RT-PCR）检测FoxP3mRNA表达,研究nTreg功能的变化,同时检测TSLPmRNA表达,分析其与nTreg细胞之间的关系。第一部分:重症肌无力胸腺瘤天然调节T细胞数量变化目的研究重症肌无力（myasthenia gravis,MG）合并胸腺瘤患者胸腺瘤中天然调节T细胞数目变化及其与胸腺瘤类型的关系。方法应用免疫组织化学FoxP3标记Treg细胞检测23例MG合并胸腺瘤患者与4例正常对照胸腺中CD4+CD25+FoxP3+T细胞数目。结果MG患者胸腺瘤中FoxP3+Treg细胞数目较正常胸腺明显减少,差异有统计学意义（P＜0.01）;在各种胸腺瘤中,B1型胸腺瘤中Treg数目较多,与其它各组之间差异有统计学意义（P＜0.01）;A型、B2、B3型胸腺瘤中Treg细胞数目少,3组间差异无统计学意义（P＞0.05）,2例B3型中未见阳性细胞。结论MG合并胸腺瘤FoxP3+Treg细胞减少提示胸腺瘤患者存在Treg发育异常所致免疫耐受失衡。第二部分:重症肌无力患者胸腺FoxP3 mRNA、TSLP mRNA表达目的重症肌无力（MG）合并胸腺瘤患者胸腺及正常胸腺中FoxP3及TSLP的mRNA水平以及二者表达之间的相关性。方法Realtime RT-PCR方法测定MG合并胸腺瘤患者胸腺瘤中FoxP3及TSLP的mRNA转录水平。结果MG患者胸腺瘤FoxP3mRNA标准值较正常胸腺明显降低,差异有统计学意义（P＜0.01）;胸腺瘤组中,B1型胸腺瘤FoxP3 mRNA标准值最高,与B2、B3型差异有统计学意义（P＜0.05）;MG患者胸腺瘤TSLP mRNA标准值较正常胸腺明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;胸腺瘤组中,B1型胸腺瘤TSLP mRNA标准值最高,与A型、B2、B3型差异有统计学意义（P＜0.01）;正常胸腺及胸腺瘤中FoxP3mRNA转录水平与TSLP mRNA转录水平呈正相关关系。结论MG患者FoxP3表达减少提示MG患者胸腺瘤内免疫耐受失衡,可能导致重症肌无力发病;FoxP3转录水平下降可能与TSLP减少有关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩略词（Abbreviation）
• 前言
• 参考文献
• 第一部分 重症肌无力患者胸腺天然调节T细胞数量变化
• 1.材料与方法
• 2.结果
• 3.讨论
• 参考文献
• 第二部分 重症肌无力患者胸腺瘤FoxP3mRNA、TSLP mRNA表达
• 1.材料与方法
• 2.结果
• 3.讨论
• 参考文献
• 总结
• 综述 调节T细胞与重症肌无力研究进展
• 附录
• 致谢