论文摘要
研究背景调节T细胞在周围免疫耐受中发挥重要的作用。Treg的数量变化或功能缺陷可能会增加Th细胞的活性或直接上调B细胞的活性,引起T、B细胞异常活化,在SLE发病中可能起重要作用。调节性T细胞在外周的平衡和稳定涉及多种细胞表面和内部的分子,主要包括Foxp3、GITR、CTLA-4、CCR4、CD127。但目前关于调节T细胞的表型报道不一,结果也存在很多分歧。近期研究发现,活动SLE中天然调节T细胞的数量下降和/或者功能缺陷。我们的前期研究表明,SLE患者外周血中CD4+CD25-Foxp3+T细胞显著增高。研究目的验证SLE外周血中调节T细胞的数量变化;进一步明确SLE中升高的CD4+CD25-Foxp3+T细胞的性质;研究Foxp3与其它调节T细胞相关分子（GITR、CTLA-4、CCR4、CD127）之间的关系,找出表面分子标记替选胞内的Foxp3;深入研究上述各分子在SLE中的变化,以期寻找它们在SLE发病中的可能意义。研究方法以FITC等标记的荧光抗体对SLE患者外周血单个核细胞进行细胞表面分子和胞内分子标染、应用流式细胞仪检测调节T细胞、CD4+CD25-Foxp3+T细胞及CD127、CCR4、GITR、CTLA-4等分子的表达情况研究结果1.SLE患者外周血CD4+T细胞中,CD4+CD25high调节T细胞的百分率显著降低（P＜0.01）,且降低程度与SLEDAI呈负相关（p=0.019,r=-0.578）,激素和免疫抑制剂治疗后显著增高（P＜0.01）。2.SLE患者外周血CD4+T细胞中,Foxp3的表达率显著升高,升高的主要原因是CD4+CD25-T细胞亚群中Foxp3的表达率增加（P＜0.01）,而CD4+CD25high和CD4+CD25-中Foxp3的表达率无明显变化（P＞0.05）。3.SLE患者PBMC中,GITR、CTLA-4和CCR4在CD4+CD25-Foxp3+中的表达率与CD4+CD25+Foxp3-（活化的效应T细胞）中相近,而显著低于在CD4+CD25+Foxp3+（调节T细胞）中的表达率。4.SLE患者外周血CD4+T细胞中,CD4+CD25+CD127low/-T细胞和CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞数量相近,CD4+CD25+CD127low/-T细胞中的Foxp3（gate）和CD4+CD25+Foxp3+中的127low（backgate）均为高表达。5.SLE患者外周血CD4+T细胞中,当Foxp3+时,不管CD25表达与否,CD127low均为高表达;而当CD127low时,Foxp3的表达率在CD25的不同荧光强度中有显著差异,在CD25high中表达率高,在CD25-中表达率低;在CD4+CD25high细胞中,CD127low对Foxp3+的敏感性和特异性均达90%以上,可以用CD127low替选Foxp3+。6.SLE狼疮肾病的患者外周血CD4+T细胞中,CD4+CCR4+CD25highT细胞（表达CCR4的调节T细胞）显著降低（P＜0.01）,而CD4+CCR4+CD25low/-T细胞（表达CCR4的Th2细胞）显著升高（P＜0.01）。结论1.调节T细胞在SLE外周血中数量降低:SLE患者PBMC中CD4+CD25high调节T细胞数量显著降低,且降低程度和疾病活动指数明确负相关;SLE肾病的患者PBMC中CCR4+Treghigh数量显著降低,提示外周血中有趋化活性的调节T细胞的降低可能参与狼疮肾病的发病机制;2.SLE中升高的CD4+CD25-Foxp3+T细胞的表型更接近活化的效应T细胞;3. CD4+CD25-T细胞中Foxp3的表达率显著升高,可能提示了SLE外周血T细胞的活化,而非调节功能;4.SLE外周血PBMC中,可以用CD4+CD25+CD127low/-T细胞替选CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞5.SLE外周血CD4+T细胞中,CD127low/-对Foxp3+敏感,但不特异。但在CD4+CD25high细胞中,CD127low/-对Foxp3+的敏感性和特异性均达90%以上,可以用CD127low替选Foxp3+。