血清蛋白质谱及血清HER2在乳腺癌中的应用

论文摘要

目的:应用表面加强激光解析电离化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术分析健康女性人群、乳腺良性肿瘤病人及乳腺癌病人血清蛋白质谱,筛选差异蛋白质峰并建立乳腺癌血清蛋白质谱模型,并分析不同分期、不同淋巴结转移情况及手术前后血清蛋白质谱差异;分析乳腺癌病人中组织HER2与血清HER2之间以及组织HER2状态与血清蛋白质谱之间的关系,探讨乳腺癌病人的组织HER2状态与血清HER2以及血清蛋白质谱的相关性。方法:应用SELDI技术,以弱阳离子交换芯片（CM10）结合血清蛋白质,分析113例乳腺癌病人、103例乳腺良性肿瘤病人及92例健康对照女性的血清样本,得到其蛋白质谱,用Biomarker Pattern软件分析三者蛋白质谱图并初步建立分类树模型,再通过盲筛验证分类树模型。进一步分析乳腺癌不同分期、不同淋巴结转移情况及手术前后蛋白质谱差异。免疫组化检测组织HER2表达,ELISA法检测血清HER2水平,分析乳腺癌病人的组织HER2状态与血清HER2以及血清蛋白质谱的相关性。结果:乳腺癌病人与健康对照女性比较,筛选出12个有统计学意义的蛋白质峰,经Biomarker Pattern（BPS）软件分析选出其中3个蛋白质峰（4179、2740、2947 Da）组合构建为分类树模型（模型Ⅰ）。比较乳腺良性肿瘤病人与健康对照女性,筛选出11个有统计学意义的蛋白质峰,软件分析选出其中2个蛋白质峰（4179、6442 Da）构建为分类树模型（模型Ⅱ）。比较乳腺癌病人与乳腺良性肿瘤病人,筛选出2个有统计学意义的蛋白质峰,通过软件选出2个蛋白质峰（7985和15952 Da）构建为分类树模型（模型Ⅲ）。联合分析上述三组差异血清蛋白质谱,蛋白质峰15952 Da在乳腺癌与健康对照女性、乳腺癌与乳腺良性肿瘤比较中差异具有统计学意义（乳腺癌峰值12.00±5.42、乳腺良性肿瘤峰值6.13±3.31、健康对照女性峰值6.08±4.23）,蛋白质峰7985 Da在乳腺癌、乳腺良性肿瘤与健康对照女性三组比较中差异均有统计学意义（乳腺癌峰值10.01±3.75、乳腺良性肿瘤峰值6.09±2.35、健康对照女性峰值4.08±2.27）,其余10个蛋白质峰在乳腺癌和乳腺良性肿瘤比较中差异无统计学意义。I期乳腺癌与健康对照女性比较有10个具统计学意义的差异蛋白峰。Ⅳ期与Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌病人比较未发现具有统计学意义的差异蛋白峰。腋窝淋巴结阴性与腋窝淋巴结阳性乳腺癌之间比较未发现具有统计学意义的差异蛋白峰。2947、3272、7985、15952 Da四个蛋白质峰术后1个月的峰值有向正常峰值变化的趋势,蛋白质峰7783 Da在术后7天及术后1月均增高,蛋白质峰4179、5642、6442、6639、8705、13771 Da在术后7天及术后1月均低于正常对照峰值水平。ELISA法检测得出血清HER2阳性率与组织HER2状态相关,组织HER2阳性乳腺癌血清HER2阳性率高于组织HER2阴性乳腺癌,部分组织HER2阴性乳腺癌血清HER2增高。SELDI技术分析组织HER2阳性与阴性乳腺癌血清蛋白质谱,未发现两者间具有统计学意义的差异蛋白峰。结论:（1）利用SELDI-TOF-MS技术可筛选出乳腺癌、乳腺良性肿瘤和健康对照女性血清蛋白质谱存在的差异蛋白峰,蛋白质峰7985 Da峰值的变化可能可以鉴别健康女性、乳腺良性肿瘤和乳腺癌,蛋白质峰15952 Da可能是鉴别乳腺癌与非乳腺癌的血清标志物。（2）乳腺癌病人术前、术后7天以及术后1月血清蛋白质谱存在差异,蛋白质峰2947、3272、7985、15952 Da峰值的变化可能用于术后复发转移监测。（3）血清HER2阳性率与组织HER2表达状态相关,组织HER2阳性乳腺癌血清HER2阳性率高于组织HER2阴性乳腺癌,部分组织HER2阴性乳腺癌血清HER2增高。（4）尚未发现组织HER2阳性与阴性乳腺癌病人血清蛋白质谱表达差异。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分：乳腺癌血清蛋白质谱分析
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分：乳腺癌组织HER2 状态与血清HER2 及血清蛋白质谱的相关性
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述