论文摘要
目的:对于缺血性脑卒中急性期的治疗,溶栓治疗是目前公认最有前景的治疗方法,但同时带来的再灌注损伤限制了其在临床上的应用。再灌注损伤是一个多环节、多级联的病理生理过程,因为中药复方存在化学成分多样性及生物活性广泛性的特性,从而为阻断脑缺血再灌注损伤发生、发展的多途径、多水平损害提供了理论上的可能性。丹星通络汤是我科治疗缺血性中风的经验方,方由丹参、胆南星力主,活血通络,清热化痰,有效清除瘀阻于脑络的痰浊和瘀血;另槐花、三七、川芎、红花、大黄活血化瘀,另外配伍黄芩、黄芪、元参等清热燥湿化痰、益气固表、滋阴清热药物。诸药合用,标本兼治,故可以收到治疗中风病良效。有大量临床研究表明,以丹星通络汤化裁治疗缺血性脑卒中有确切疗效,故本研究通过观察丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞Caspase-3蛋白及HSP70蛋白表达的影响,探讨其神经保护作用机制。本实验可为开发有效的神经保护剂提供科学依据,从而扩大溶栓治疗的临床应用。方法: 40只健康雄性Wistar大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶脑缺血再灌注大鼠模型,并随机将大鼠分为假手术组（A组）、缺血再灌注组（ B组）、尼莫地平组（C组）丹星通络汤小剂量（D组）,丹星通络汤大剂量组（E组）,每组8只。丹星通络汤组分别按15g/kg（大剂量）, 7.5g/kg（小剂量）,尼莫地平组10g/kg,术前连续灌胃给药7d,每天一次。假手术组和缺血再灌组分别灌以7.5g/kg的生理盐水。大鼠局灶性脑缺血2 h ,然后进行再灌注。在再灌注24 h断头取脑组织,采用免疫组织化学法检测脑组织中Caspase-3蛋白及HSP70蛋白的表达,并与病理组织学改变进行对照。结果: 1.利用HE快速常规染色技术对大鼠脑缺血再灌注后脑组织超薄切片进行组织形态学观察:A组细胞结构正常;B组脑组织中均见神经细胞结构模糊,胞体肿胀,尼氏小体减少或消失,出现不同程度的核深染、核固缩、核溶解,核体不规则,有明显软化灶形成,周边可见中性粒细胞浸润;C组D组及E组神经细胞排列略紊乱,仍可见细胞皱缩和胞核固缩浓染现象,但程度较模型明显减轻;其中以C、E两组尤为显著。2.脑组织超薄切片免疫组化法观察HSP70、Caspase-3蛋白的表达水平:采用成组设计多个样本比较的检验方法,五组大鼠在药物或替代药物作用下,发生脑缺血再灌注后的HSP70、Caspase-3蛋白的表达均有明显差异（P<0.01）。即:丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注后脑组织HSP70蛋白的表达有上调作用,对Caspase-3蛋白表达均有下调作用。结论:丹星通络汤能减轻脑组织的缺血再灌注损伤,改善神经功能缺失,其作用机制可能与抑制Caspase-3蛋白合成,增加HSP70蛋白合成有关,其具体作用机制尚需进一步研究。
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标签：丹星通络汤论文; 脑缺血再灌注损伤论文;