论文摘要
目的:观察甘草次酸（Glycyrrhetinic acid , GA）对白血病细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其机制。方法:选择人髓性白血病细胞K562、HL-60细胞为研究对象。MTT法检测不同浓度GA作用于K562和HL-60细胞不同时间后细胞的增殖抑制率;采用Transwell小室基质胶侵袭实验及趋化实验观察GA对K562、HL-60细胞株侵袭及迁移能力的影响;半定量RT-PCR法检测GA对K562、HL-60细胞基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9mRNA表达的影响;用免疫组织化学染色法检测不同浓度GA对K562、HL-60细胞MMP-2和MMP-9蛋白表达的水平的影响;明胶酶谱法检测GA对两种细胞株MMP-2和MMP-9活性的影响。结果:1.GA可明显抑制K562、HL-60细胞增殖,其作用呈时间剂量依赖性。2.不同浓度GA（30、60、120μmol·L-1）作用K562、HL-60细胞24小时后,可明显抑制K562、HL-60细胞的侵袭能力和迁移能力,并呈剂量依赖关系。3.GA作用K562、HL-60细胞48小时后,可抑制K562、HL-60细胞中MMP-2、MMP-9mRNA的表达。K562细胞中,与对照组相比,30μmol·L-1 GA组对MMP-2mRNA表达无显著性差异（P>0.05）,60、120μmol·L-1组有显著性差异（P<0.05）,MMP-9各组与对照组比差异有统计学意义（P<0.05）。HL-60细胞中,与对照组比,MMP-2mRNA表达量30、60、120μmol·L-1组有统计学意义（P<0.05）。MMP-9表达量各组均有显著性差异（30μmol·L-1组,P<0.05;60、120μmol·L-1组P<0.01）。4. GA作用K562、HL-60细胞48小时后,可抑制K562、HL-60细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达。K562细胞中,与对照组相比,30μmol·L-1 GA组对MMP-2、MMP-9蛋白表达无显著性差异（P>0.05）,60、120μmol·L-1组有显著性差异（P<0.05）;HL-60细胞中,MMP-2的表达,60、120μmol·L-1与对照组比较有显著性差异（P<0.05）;MMP-9的表达,GA处理组各浓度与对照组比较均有显著性差异（P<0.05）。5.GA可抑制K562、HL-60细胞株明胶酶活性,呈剂量依赖性。K562细胞仅出现MMP-2条带,HL-60细胞检测到MMP-2和MMP-9的条带。K562和HL-60细胞,GA处理组与对照组比较,60、120μmol·L-1组有显著性差异（P<0.05）;30μmol·L-1组,与对照组比较无统计学意义（P>0.05）。结论GA可抑制K562和HL-60细胞的侵袭及迁移能力,可能通过下调MMP-2和MMP-9mRNA和蛋白表达,并降低其活性而发挥作用。