人骨髓基质干细胞永生化及相关研究

论文题目: 人骨髓基质干细胞永生化及相关研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学

作者: 滕勇

导师: 胡蕴玉

关键词: 组织工程,骨髓基质干细胞,端粒酶逆转录酶,衰老,基因转染,永生化,细胞系

文献来源: 第四军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 骨缺损的修复一直是矫形外科的难题。利用自体骨、异体骨、异种骨、带血管游离植骨进行修复都存在这样或那样的问题。上世纪80年代开始,骨缺损的修复逐步进入了组织工程修复研究的时代。支架材料、生长因子、种子细胞是组织工程的三要素,随着先进制造技术的进步,支架材料的研究已取得突飞猛进的发展,已有人工骨应用于临床。目前种子细胞是制约组织工程发展的瓶颈之一。骨髓基质干细胞因其成体干细胞特征和易获取性,近年来倍受关注。但是,骨髓基质干细胞的分离、纯化、鉴定以及多向分化条件和机理等目前都不十分清楚;另外,由于细胞体外长期培养面临细胞衰老问题,使其无法达到组织工程临床应用需要的细胞数量。随着组织工程研究的逐步深入,对基质干细胞的需求已极为广泛和迫切。不论是基础研究还是临床应用,人们都希望获得稳定的、纯化的、大量具有骨髓基质干细胞生物学表型和功能的种子细胞,以便为基础研究提供标准的细胞,为临床应用提供细胞库,真正实现体外构建组织器官的目的。为了达到以上目的,最佳途径就是建立骨髓基质干细胞的细胞系。然而,以往建立细胞系的方法大多是通过转染病毒基因或癌基因(如SV40大T抗原和HPV18 E6/E7等DNA肿瘤病毒)诱导细胞永生化,它们是肿瘤病毒诱导的永生化细胞系,有许多局限性:外源性基因的整合是随机的,其表达产物可干扰细胞内生理途径而发生非预期的改变;转染获得的是转化细胞而非正常细胞,其表型、核型等可发生改变。

论文目录:

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正文

第一部分人骨髓基质干细胞的培养

实验一人骨髓基质干细胞的培养

实验二人骨髓基质干细胞的单细胞克隆培养与鉴定

第二部分永生化人骨髓基质干细胞系的建立

实验一 hTERT激活人骨髓基质干细胞端粒酶活性

实验二永生化人骨髓基质干细胞系的建立

实验三永生化人骨髓基质干细胞的生物学行为

实验四永生化人骨髓基质干细胞的成体干细胞特征

第三部分永生化人骨髓基质干细胞复合异种骨的异位成骨

小结

致谢

参考文献

附录1 个人简历和研究成果

附录2 应用情况

发布时间: 2005-07-19

参考文献

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人骨髓基质干细胞永生化及相关研究

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