凉粉草提取工艺及其特征指纹图谱质量评价研究

论文摘要

凉粉草(Mesona chinemis Benth.),又名仙人草、仙人冻、仙草、薪草等,为唇形科一年生草本植物,是一种重要的药食两用的东方植物资源。相关文献研究显示,目前对凉粉草的研究主要集中在多糖,部分研究内容涉及到黄酮类或酚酸类；现代药理研究表明,凉粉草具有诸多药用价值,如抗缺氧,抗氧化,清楚自由基,降低血糖,抗菌等,目前主要应用于食品或保健食品领域。然而,凉粉草的市场来源繁多,而且没有一个统一的质量规范,给收购、开发及其产品质量控制带来不便。本文研究的凉粉草为唇形科植物凉粉草(Mesona chinemis Benth.)的地上部分,旨在通过本课题研究,为凉粉草药材质量控制提供科学依据,为后续的开发应用奠定基础。本课题主要对凉粉草的相关文献,系统预实验,总黄酮的提取工艺及其含量测定,药材的特征指纹图谱及其质量评价进行研究。文献研究：通过从种质资源与分布、形态特征与生物学特征、鉴别、化学成分、药理作用、应用和研究前景等方面对凉粉草进行综述。同时对中药指纹图谱的研究概况包括概念、分类、应用及其要求、阶段性和化学模式识别在中药指纹图谱中的应用等方面进行了总结,为进一步设计和实施实验方案提供理论依据。系统预实验：通过系统预试验及不同极性溶剂(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、乙醇、水)提取液进行化学鉴别,结果发现凉粉草中含有多糖、黄酮类、酚类、三萜类等成分。除了多糖外,主要为黄酮类成分,其中以水溶性黄酮为主。结合本课题对凉粉草的药理药效研究结果分析,本文中提取工艺的研究内容主要依据总黄酮含量为考察指标进行。总黄酮提取工艺及总黄酮含量测定：分别对乙醇浓度、提取温度、提取时间、溶媒用量、提取次数进行单因素考察,确定单因素水平。选择因素和水平采用L9(3)正交设计,考察提取时间、溶媒倍量、提取次数三个因素对提取的影响,确定凉粉草最佳的提取条件：加入1OBV 50%乙醇,提取温度为100℃水浴,提取2次,每次45min。其中,为规范凉粉草药材质量,暂定药材中总黄酮浸出率不低于4.0%。凉粉草的特征指纹图谱建立：分别考察了供试品溶液制备条件、色谱条件的筛选和方法学考察。其中色谱条件的筛选中分别对流动相的选择及梯度、检测波长、检测时间、不同液相色谱柱、不同酸及不同浓度、流速和柱温等因素进行考察。通过对34批次的凉粉草样品测定,以咖啡酸为参照峰,对其他色谱峰的相对保留时间和相对峰面积进行计算,作为技术参照评价指纹图谱,确定了10个共有峰,作为凉粉草药材特征指纹图谱的特征峰,用以鉴别凉粉草药材的质量提供依据。同时运用SPSS17.0软件中系统聚类分析方法,对不同产地品种的凉粉草药材特征指纹图谱进行分析,可将不同产地的样品划分成三类。凉粉草的生产质量评价：通过药材的总黄酮含量和特征指纹图谱来评价不同采收月份及采收时间点和初加工方法,为凉粉草GAP基地的建设提供科学依据。研究结果显示盛夏的九、十月份为最佳采收月份,适宜采收时间段为下午,即12：00至17：00时间段,其最佳采收时间为午后16：00左右,而初加工的方法还有待于进一步的药理药效的验证。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 文献研究
• 一、凉粉草的研究概述
• （一） 种质资源与分布
• （二） 形态特征与生物学特征
• （三） 鉴别
• （四） 化学成分
• （五） 药理作用
• （六） 应用
• （七） 研究前景
• 二、中药指纹图谱的研究
• （一） 中药指纹图谱的概念
• （二） 中药指纹图谱的分类
• （三） 中药指纹图谱的应用及其要求
• （四） 中药指纹图谱研究的阶段性
• 三、化学模式识别研究
• 第二部分 实验研究
• 一、凉粉草提取工艺优化研究
• （一） 材料、试剂与仪器
• （二） 凉粉草总黄酮含量测定方法的建立
• （三） 凉粉草提取工艺研究
• （四） 实验小结
• 二、凉粉草的特征指纹图谱研究
• （一） 材料、试剂与仪器
• （二） 凉粉草特征指纹图谱方法研究
• （三） 凉粉草特征指纹图谱的建立及评价
• （四） 实验小结
• 三、凉粉草药材生产质量评价研究
• （一） 不同采收期的考察
• （二） 不同加工方法的考察
• （三） 实验小结
• 第三部分 结语
• 一、结论
• 二、创新性
• 三、展望
• 参考文献
• 发表论文情况
• 致谢