Gankyrin在肝癌细胞增殖过程中的功能研究

Gankyrin在肝癌细胞增殖过程中的功能研究

论文题目: Gankyrin在肝癌细胞增殖过程中的功能研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学

作者: 杨诏旭

导师: 窦科峰,赵忠良

关键词: 肝细胞癌,原核表达,多克隆抗体,干涉,小发卡状

文献来源: 第四军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: Gankyrin是近年来在肝细胞癌中发现的一个新的致癌基因编码的蛋白,因其几乎在所有的肝癌患者的癌组织中均存在过表达而受到重视。Gankyrin蛋白可以与p16INK4A竞争结合Cdk4,从而对抗p16INK4A对Cdk4的抑制作用,进而对抗了p16INK4A对肿瘤细胞增殖的抑制作用。Gankyrin的表达升高可以引起Rb磷酸化水平上升,导致转录因子E2F1的活性释放,引起细胞增殖的一系列相关基因的转录激活。此外由于gankyrin蛋白存在于26s蛋白酶体的19s调节复合体中,且可与Mdm2发生相互作用,而Mdm2属于泛肽连接酶,介导泛素/26s蛋白酶体对P53的降解,因此认为gankyrin可能参与了P53的降解过程。p16INK4A、Rb、P53等的失活目前被认为是肝癌发生过程中最为关键的几个因素,而gankyrin则同时参与在三个过程之中。近来有实验在Fischer 344鼠体内诱发肝癌,结果发现在肿瘤发生的最初阶段,即出现了gankyrin的表达升高,这些均提示我们gankyrin可能是肝癌发生发展过程中的一个关键基因,同时也为肝癌的治疗提供了一个潜在的靶

论文目录:

缩略语表

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英文摘要

前言和文献回顾

正文

1 Gankyrin在肝癌细胞系中的表达及其克隆、原核表达和抗体制备

1.1 材料和方法

1.2 结果

1.3 讨论

2 通过RNAi抑制gankyrin基因在肝癌细胞中的表达

2.1 Gankyrin的RNAi靶点设计及ShRNA载体构建

2.1.1 材料和方法

2.1.2 结果

2.1.3 讨论

2.2 ShRNA在肝癌细胞系HepG2中对gankyrin基因的干涉效果

2.2.1 材料和方法

2.2.2 结果

2.2.3 讨论

3 在肝癌细胞中沉默gankyrin的表达对细胞生物学特性的影响

3.1 沉默gankyrin的表达对HepG2细胞生物学特性影响的体外实验

3.1.1 材料和方法

3.1.2 结果

3.1.3 讨论

3.2 裸鼠体内成瘤实验

3.2.1 材料和方法

3.2.2 结果

3.2.3 讨论

小结

参考文献

附录

个人简历和研究成果

致谢

发布时间: 2005-07-19

参考文献

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