论文摘要
目的对肌腱缺损的修复一直是手外科中的一大难题。过去对于肌腱缺损的治疗，主要采用自体肌腱移植、肌腱转移或同种异体肌腱移植的方法进行修复，均能取得一定的疗效，但切取肌腱会增加创伤，而且对于肌腱的取材相当有限，故临床应用受到很大的限制。80年代中期，学者们开始利用组织工程技术形成的组织工程化肌腱来为肌腱缺损进行修复。随着对肌腱细胞研究的深入，针对肌腱细胞具有增殖、传代能力的特性，将肌腱细胞与支架材料在体外联合培养后植入体内，形成新的肌腱，而支架材料被逐渐降解吸收，从而可以获得良好的疗效。本研究以成年罗曼鸡为研究对象，人工干预形成肌腱缺损的模型，并以胚胎罗曼鸡的肌腱细胞为种子细胞，与蚕丝材料在体外复合后，植入成年罗曼鸡的肌腱缺损部位，然后在不同的时间点通过形态学、病理学、生物力学等实验方法进行观察和检测，旨在探讨用蚕丝与同种异体肌腱细胞联合培养植入体内，构建组织工程化肌腱的可行性。方法提取19天罗曼鸡蛋的雏鸡胚胎肌腱细胞，培养后与蚕丝材料在体外相复合，以单纯蚕丝材料作对照，植入到成年罗曼鸡的肌腱缺损部位。实验共分两大组，一组是植入附着了肌腱细胞的蚕丝材料组，另一组是单纯植入蚕丝材料组。分别在术后的第2、4、6、8周进行随机取材，在每次取材时每组分别取4只。对材料进行形态学观察、病理学检查、生物力学测定和拉伸度的测定。所得数据均采用SPSS 13.0统计软件进行处理和分析。结果在倒置相差显微镜下对各代肌腱细胞进行观察，发现第二代肌腱细胞生长相当旺盛，活性极强，未见到细胞衰老的迹象，因此本实验采用此代肌腱细胞作为肌腱组织工程的种子细胞。在第2、4、6、8周进行取材，取出的材料在体式显微镜下进行形态学的观察，发现在细胞组中，蚕丝材料的表面附着有淡黄色的胶状物质，严密地将蚕丝包裹在其中，而且随着时间的延长，这种淡黄色的胶状物质会逐渐增厚。在非细胞组中，蚕丝材料的表面也附着有胶状物质，但颜色稍浅，而且不如细胞组丰富，蚕丝材料会有部分外露，随着时间的延长，胶状物质的分泌会越来越多，逐渐将蚕丝材料包裹完全，但最终的量明显不如细胞组。对各材料的病理学检查发现细胞组在第二周就有胶原的合成，初期的炎症反应明显，可见血管化反应，胶原的量随着时间的延长而增加。非细胞组在第2、4周以炎症反应为主，第6周时也可见到胶原的形成，这也验证了体式显微镜的观察结果。力学的测定结果显示在同时间点内，细胞组的结果明显优于非细胞组(P＜0.05)，细胞组自身在不同时间点的比较中，发现除第8周以外(P＞0.05)，时间越长，力学的结果越优秀(P＜0.05)。而在非细胞组则只有第8周的结果与前三次测定结果的差异有统计学意义(P＜0.05)。对于蚕丝材料拉伸度的测定显示，无论在细胞组还是非细胞组，材料长度的变化均没有统计学意义(P＞0.05)。结论本实验的结果说明蚕丝材料对肌腱细胞的吸附明显，而且材料本身降解缓慢，抗拉性能优越，附着肌腱细胞后构成组织工程化肌腱，在实验动物体内可以逐渐地形成肌腱组织。经过更加深入的实验和研究后，蚕丝材料可能会在肌腱缺损的治疗方面发挥出巨大潜能。