导读:本文包含了肺支原体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:SPF级小鼠,肺支原体,实时荧光定量PCR(qPCR),检测
肺支原体论文文献综述
张越华,郑秀青[1]（2018）在《SPF级小鼠肺支原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用》一文中研究指出为了建立及应用SPF级小鼠肺支原体实时荧光定量PCR检测方法,试验根据GenBank中肺支原体16S rRNA基因序列的高度保守区域设计引物,建立了可快速、准确检测肺支原体的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性、重复性以及疑似支原体感染样本检测,并评论其可行性。结果表明:所建立的qPCR方法具有良好的线性关系,标准曲线的相关系数R~2=0.999;5种相关的细菌检测结果均为阴性,特异性好;其检测灵敏度为10 copies/μL;组间样本的变异系数均小于3%,重复性好;对60份疑似支原体感染的小鼠咽拭子样本检测结果比采用ELISA方法以及常规PCR更灵敏。说明SPF级小鼠肺支原体的qPCR方法较之于ELISA方法及常规PCR具有快速、灵敏性高、特异性强、稳定性好等特点,能更好地进行小鼠肺支原体的快速检测和诊断。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年20期）
祝岩波,王俊霞[2]（2017）在《实验动物泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒检测方法的评价》一文中研究指出泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒是实验动物重要的致病病原体,可引起呼吸系统、消化系统疾病,对动物的生产和动物实验可产生不良影响。本文对上述国家检测标准规定必须检测且有检测难度的叁种病原体进行方法学总结,以获得更好特异性和敏感性的诊断方法,提出传统方法初检、PCR方法复检的方法以提高检测结果的准确性和可靠性。(本文来源于《2017年第十五届中国北方实验动物科技年会论文集》期刊2017-09-12）
祝岩波,王俊霞[3]（2017）在《实验动物泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒检测方法的评价》一文中研究指出泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒是实验动物重要的致病病原体,可引起呼吸系统、消化系统疾病,对动物的生产和动物实验可产生不良影响。本文对上述国家检测标准规定必须检测且有检测难度的叁种病原体进行方法学总结,以获得更好特异性和敏感性的诊断方法;提出传统方法初检、PCR方法复检的方法以提高检测结果的准确性和可靠性。(本文来源于《实验动物科学》期刊2017年02期）
李娜,胡爱萍[4]（2017）在《对比分析注射用阿奇霉素与红霉素治疗小儿肺支原体肺炎的临床疗效》一文中研究指出目的探讨阿奇霉素与红霉素治疗小儿肺支原体肺炎的临床疗效。方法选取肺炎支原体感染患儿共78例,随机分为观察组和对照组。两组患儿均接受常规治疗,在此基础上,对照组采用红霉素治疗,观察组采用阿奇霉素治疗。观察治疗效果。结果观察组总有效率为97.4%,不良反应总发生率为7.7%,均优于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组临床症状及体征的消退时间,均优于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论阿奇霉素用于治疗小儿肺炎支原体肺炎,能够提高临床治疗效果,加快患儿的康复进程,降低不良反应的发生率,具有较高的安全性。(本文来源于《当代医学》期刊2017年09期）
王鹏飞[5]（2016）在《实验动物金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺支原体多重PCR检测方法的建立与初步应用》一文中研究指出目的:实验动物是生命科学研究的基础和条件,实验动物的质量直接影响众多领域科学实验的准确性,也关系到实验动物从业人员和动物实验操作者的健康。因此,实验动物的微生物质量控制已纳入国家标准。肺支原体(Mycoplasma pulmonis)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是实验动物微生物检测需要排除的病原体,也是实验动物常见的易感病原体,在大小鼠、豚鼠、地鼠和兔中感染率可达到百分之几,甚至百分之几十,相对其它病原体感染率较高。目前对实验动物携带的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺支原体的鉴定主要以分离纯化培养、生化试验等方法进行,存在费时费力、需要有经验的技术人员以客观指标加主观判断鉴定的缺点,如金黄色葡萄球菌从分离细菌到发出检测报告往往需要48h,绿脓杆菌需要长达72h,而肺支原体培养完成检测则需21天。而PCR(Polymerase Chain Reaction)技术以其简便、快速、准确等优点已在临床医学疾病诊断等领域得到广泛应用,理论上同样也可应用于实验动物的病原微生物检测,但普通PCR方法单管每次只能检测一种病原体,不能满足单管检测多种病原体的实际需要,更满足不了大样本、快速、准确的检测。多重PCR(multiplex PCR)可以在同一管反应体系中扩增出大小不同的核酸片段,具有快捷方便、高通量等优点。多重PCR如果应用在实验动物微生物检测中,可以同时检测多种病原体,适合大量实验动物微生物检测与鉴定,具有高灵敏性、高效性、高特异性和低成本性等优点。本研究目的是针对叁种实验动物病原体金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺支原体,建立多重PCR检测方法,并与传统的微生物检测方法比较,检验多重PCR检测方法的可操作性和准确性。方法:1、将金黄色葡萄球菌标准株转接到SP琼脂培养基,培养24h后转接到血液琼脂培养基上进行分离与纯化培养,显微镜镜下观察,进行血浆凝固酶试验和甘露醇发酵试验;将绿脓杆菌标准株转接到NAC液体培养基,后转接到nac固体培养基上进行分离与纯化培养,显微镜镜下观察,生化鉴定,氧化酶试验,42℃生长试验;将肺支原体接到液体培养基中,一周后进行观察。2、通过文献查找肺支原体、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌特异性引物,使用blast分析各病原体引物特异性;进行pcr扩增,对扩增产物进行测序,通过生物信息学分析验证扩增产物正确性;3、优化pcr反应体系,检测pcr方法的特异性和敏感性。将模板dna按照10倍的比例进行梯度稀释,分别以稀释后的模板dna进行扩增;用接种针挑取菌落加入到装有普通营养肉汤的试管中,放入37℃恒温摇床中进行扩菌,将摇好的菌液按着10倍比例进行梯度稀释,转接到固体培养基上培养,提取菌液核酸进行pcr扩增;pcr扩增其他非目的菌进行特异性实验。4、将肺支原体、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的基因组dna在同一反应体系同时扩增,并且在反应体系中加入细菌通用引物做为内质控,调整和优化反应体系成分和反应条件,建立叁种病原体多重pcr检测方法。选择具有实验动物生产资质的单位供应的动物:大小鼠共45只,采集实验动物回盲部内容物或粪便以及动物气管分泌物,提取核酸进行叁种病原体多重pcr的检测,同时进行传统培养检测方法,将两种检测结果比较,检验多重pcr检测方法的可操作性和准确性。结果:1、金黄色葡萄球菌在sp固体培养基上形成黄色的菌落,转接血琼脂平皿形成灰白色、周围有β溶血环的菌落;菌体形态为革兰阳性球菌,排列成葡萄状;甘露醇发酵试验为阳性;血浆凝固酶试验为阳性。绿脓杆菌在nac琼脂平皿上形成扁平菌落,边缘不齐呈锯齿状,大部分菌落可产生绿色色素而致使培养基呈绿色;菌体特征为革兰阴性杆菌,菌体长短不一;各生化鉴定管阴阳性结果正确;氧化酶试验和42℃生长试验为阳性。肺支原体液体培养颜色由红色变为黄色。2、获得叁种病原体的特异性引物,并通过blast比对验证引物的特异性,金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺支原体扩增产物大小分别为153bp、375bp和266bp,其测序结果分别与genebank对应序列(sequenceid分别为:gb|dq507378.1、dbj|ab926025.1、gb|kp836312.1)相似度分别为97.00%、98.90%和99.59%。3、PCR特异性实验:金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺支原体特异性实验结果,除标准菌株扩增出阳性条带外,其它菌种均扩增阴性;敏感性实验:金黄色葡萄球菌PCR扩增最小检出DNA核酸量为1pg、最小检出菌落数为2CFU;绿脓杆菌PCR扩增最小检出DNA核酸量为10pg,最小检出菌落数为14CFU;肺支原体PCR扩增最小检出DNA核酸量为1pg。4、建立了金黄色葡萄球菌、肺支原体、绿脓杆菌和细菌通用基因的多重PCR扩增体系,其产物经琼脂糖电泳出四个条带,片段大小从小到大分别为153bp、266bp、375bp和520bp。PCR检测实验动物24h培养物中的菌落,其结果与实验动物微生物检测结果一致;检测实验动物粪便,检测结果与传统培养鉴定方法相比有差异。结论:成功建立金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺支原体多重PCR检测体系,有较好的敏感性、特异性和重复性。用于实验动物微生物检测,检测结果与传统培养检测方法一致,并且多重PCR方法快速、简便、准确,初步验证了本检测方法具有良好的可操作性和准确性,为今后应用于实验动物微生物的检测奠定了基础。(本文来源于《河北医科大学》期刊2016-03-01）
李瑾尧[6]（2015）在《对比分析注射用阿奇霉素与红霉素治疗小儿肺支原体肺炎的临床疗效》一文中研究指出目的:对比分析注射用阿奇霉素与红霉素治疗小儿肺炎支原体肺炎的临床疗效。方法:选取2012年4月~2014年4月我院收治的120例小儿肺炎支原体感染患者,随机分为阿奇霉素组(应用阿奇霉素治疗)60例与红霉素组(应用红霉素治疗)60例,分析比较两组患儿临床治疗效果。结果:阿奇霉素组临床总有效率96.67%明显高于红霉素组76.67%,差异对比有统计学意义(P<0.05);阿奇霉素组临床症状消退时间明显短于红霉素组,差异有统计学意义(P<0.05);阿奇霉素组不良反应发生率明显低于红霉素组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阿奇霉素对于小儿肺炎支原体患者治疗效果明显优于红霉素,临床应用价值更高。(本文来源于《实用中西医结合临床》期刊2015年08期）
陈斌华,黄勇帆,项嘉亮[7]（2013）在《肺支原体肺炎患儿血清中辅助性T细胞亚群表达细胞因子的变化及其临床意义》一文中研究指出目的分析肺炎支原体(MP)肺炎(MPP)患儿血清中辅助性T细胞亚群表达细胞因子的变化及临床意义。方法选择江门市人民医院2012年1月～2013年1月收治的小儿MPP病例38例(MPP组),另选择非MP患儿28例为非MP组,健康体检儿童30例为对照组。采用ELISA法检测患儿血清中不同辅助性T细胞亚群相关的细胞因子(INF-γ、IL-4及IL-17)水平,并与对照组进行对比分析。结果经ELISA法检测MPP组患儿血清INF-γ为(60.93±17.88)ng/L,IL-4为(67.67±14.69)ng/L、IL-17为(72.64±33.80)ng/L,与对照组和非MP组比较,差异有高度统计学意义(P<0.01);MPP组IL-4/IFN-γ比值为1.21±0.55,与对照组比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论 MP肺炎患儿血清中辅助性T细胞亚群以及细胞因子均存在一定程度的异常,临床上检查该类患者辅助性T细胞亚群以及细胞因子的表达情况有助于检测患儿病情进展以及治的效果,有效改善患儿预后,具有十分重要的临床应用价值。(本文来源于《中国医药导报》期刊2013年21期）
刘长靖[8]（2013）在《以消化系统症状为首发的肺支原体感染的60例患儿的治疗分析》一文中研究指出目的:探讨以消化系统为首发症状的肺支原体感染患儿临床治疗情况。方法:对我院收治的60例以消化系统为首发症状的肺支原体感染患儿临床资料进行回顾分析。结果:对60例以消化系统为首发的肺支原体感染患儿实施治疗干预后均治愈,有效率为100%。结论:儿科门诊中具有较高的肺炎支原体感染率,且伴有消化系统症状,临床表现并不典型,所以要注意监测患儿的MP-IgM辅助诊断、治疗,尽可能减少漏诊、误诊率。(本文来源于《中国医药导刊》期刊2013年04期）
傅军,吴亦栋,余钟声[9]（2011）在《支原体和肺支原体双通道荧光定量PCR法检测鼠支原体感染试验》一文中研究指出采用TaqMan探针法支原体通用型和肺支原体特异型双通道荧光定量PCR法,对清洁级SD大鼠150只I、CR小鼠120只,C57小鼠100只,普通级SD大鼠104只I、CR小鼠97只,C57小鼠76只,检测支原体和肺支原体感染情况。清洁级SD大鼠中检测到1只支原体阳性;清洁级ICR小鼠和C57小鼠中支原体和肺支原体未见阳性;普通级SD大鼠中检测到2只支原体阳性,1只肺支原体阳性;普通级ICR小鼠中检测到1只支原体阳性,2只肺支原体阳性;普通级C57小鼠检测到1只支原体阳性。表明清洁级实验动物大鼠中仍然存在支原体感染;普通级实验动物大鼠和小鼠支原体感染明显高于清洁级动物。(本文来源于《浙江畜牧兽医》期刊2011年02期）
傅军,吴宜栋,余钟声[10]（2010）在《支原体和肺支原体双通道荧光定量PCR法的建立及其在小鼠检测中的应用》一文中研究指出目的建立能同时检测支原体通用型和肺支原体特异型的双通道荧光定量PCR方法。并在小鼠检测中进行应用。方法:采用TaqMan探针法进行支原体通用型和肺支原体特异型的双通道荧光定量PCR。取大肠杆菌、表皮葡萄球菌、人巨细胞病毒、肺炎支原体、乙型肝炎病毒、大鼠、小鼠和人基因组等作特异性试验。对5个浓度分别为3个/μL、3×10个/μL、3×10~2个/μL、3×10~3个/μL、3×10~4个/μL的标本进行荧光定量PCR的敏感性试验。对197份小鼠气管标本、22份经支原体培养后的标本,进行支原体和肺支原体的双通道荧光定量PCR法检测。荧光定量PCR阳性产物纯化后,通过测序来验证结果。结果:确认支原体和肺支原体双通道荧光定量PCR引物和探针序列为,引物:5'-19bp-3'、5'-19bp-3';探针:支原体通用型为5'FAM--21bp-3'-BHQ-1,肺支原体为5'-HEX--22bp-3'-BHQ-1。与大肠杆菌、表皮葡萄球菌、人巨细胞病毒、肺炎支原体、乙型肝炎病毒、大鼠、小鼠和人基因组等均尤交叉反应。最低可检测到10个肺支原体。在气管标本中检测到肺支原体阳性3份;培养标本中检测到肺支原体阳性3份(其中2份同气管标本);219份标本中5份通用型支原体阳性(肺支原体阴性),提示标本中含有其它种类的支原体。6份肺支原体PCR阳性标本,经测序对比,与肺支原体序列一致。结论:建立了能同时检测支原体通用型和肺支原体特异型的双通道荧光定量PCR方法,检测快速(3小时以内获得结果),敏感性高。为实验动物小鼠的高效管理提供了有力的保障。国家科委、卫生部在有关实验动物管理法规中都要求,清洁级以上实验动物大、小鼠应排除鼠肺支原体。目前国内多采用体外培养法和血清学法,培养法要求条件苛刻、费时、操作极为繁杂,灵敏度却较低,需要进行麻烦的分离培养鉴定才能得到结果;血清鉴定方法则存在种属之间的交叉反应问题,并且支原体感染的前面数天甚至几个星期尤法从血清中检测到,大大影响实验动物管理效率。故建立特异、灵敏、快速的PCR法检测技术,检测鼠肺支原体感染是十分必要的。本文通过建立能同时检测支原体通用型和肺支原体特异型的双通道荧光定量PCR方法,以期建立一种敏感和特异的检测方法。通过一次实验,确认是否有支原体感染,并且能同时确认是否有肺支原体感染,真正达到快速、敏感和特异,为实验动物的高效管理提供有力保障。(本文来源于《第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）论文集》期刊2010-09-19）
肺支原体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒是实验动物重要的致病病原体,可引起呼吸系统、消化系统疾病,对动物的生产和动物实验可产生不良影响。本文对上述国家检测标准规定必须检测且有检测难度的叁种病原体进行方法学总结,以获得更好特异性和敏感性的诊断方法,提出传统方法初检、PCR方法复检的方法以提高检测结果的准确性和可靠性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肺支原体论文参考文献
[1].张越华,郑秀青.SPF级小鼠肺支原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J].黑龙江畜牧兽医.2018
[2].祝岩波,王俊霞.实验动物泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒检测方法的评价[C].2017年第十五届中国北方实验动物科技年会论文集.2017
[3].祝岩波,王俊霞.实验动物泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒检测方法的评价[J].实验动物科学.2017
[4].李娜,胡爱萍.对比分析注射用阿奇霉素与红霉素治疗小儿肺支原体肺炎的临床疗效[J].当代医学.2017
[5].王鹏飞.实验动物金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺支原体多重PCR检测方法的建立与初步应用[D].河北医科大学.2016
[6].李瑾尧.对比分析注射用阿奇霉素与红霉素治疗小儿肺支原体肺炎的临床疗效[J].实用中西医结合临床.2015
[7].陈斌华,黄勇帆,项嘉亮.肺支原体肺炎患儿血清中辅助性T细胞亚群表达细胞因子的变化及其临床意义[J].中国医药导报.2013
[8].刘长靖.以消化系统症状为首发的肺支原体感染的60例患儿的治疗分析[J].中国医药导刊.2013
[9].傅军,吴亦栋,余钟声.支原体和肺支原体双通道荧光定量PCR法检测鼠支原体感染试验[J].浙江畜牧兽医.2011
[10].傅军,吴宜栋,余钟声.支原体和肺支原体双通道荧光定量PCR法的建立及其在小鼠检测中的应用[C].第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）论文集.2010
标签：SPF级小鼠; 肺支原体; 实时荧光定量PCR(qPCR); 检测;