小鼠囊胚活检用于植入前遗传学诊断及玻璃化冷冻囊胚的初步实验研究

论文摘要

目的 通过动物实验:(1)探讨补肾中药养精种玉汤对增强昆明小鼠超数排卵效果、提高获卵率的应用价值以及对改善小鼠体外受精胚胎发育潜能的影响;(2)探讨囊胚腔穿刺获取滋养细胞的可行性;探讨穿刺抽吸囊胚腔液对囊胚的发育潜能以及着床能力的影响;尝试对囊胚滋养细胞作单细胞染色体分析及全基因组扩增,为植入前遗传学诊断建立技术基础;(3)观察穿刺后囊胚玻璃化冷冻保存的效果;探讨使用冷冻平皿为载体,冷冻液中添加血清替代物的方法提高玻璃化冷冻效果的价值;从而为临床辅助生育治疗中改善卵巢的超数排卵效果和改善胚胎质量探索新方法;为胚胎植入前遗传学诊断建立新的囊胚活检方法;改进囊胚玻璃化冷冻的相关技术。 方法 使用成年健康昆明小白鼠,雌性200只、雄性40只为实验对象,中药养精种玉汤煎剂灌胃,观察记录小鼠发情周期的改变以及超数排卵者获卵数的变化;取成熟卵母细胞作体外受精,并记录受精和胚胎的发育情况;获取小鼠的晚期囊胚,在显微操作系统下穿刺抽吸囊胚滋养细胞,并作滋养细胞的染色体核型分析、全基因组扩增以及ZFX基因的检测;对穿刺后的囊胚作胚胎移植,观察产仔情况;使用经液氮冷冻的平皿为载体并在冷冻液中添加高浓度的血清替代物对穿刺后囊胚作冷冻保存。 结果 1.服用中药2周后小鼠的发情周期缩短而集中,平均发情周期4.84天,对照组平均7.68天;超排小鼠的获卵率明显增加,平均(28.6枚/只～37.2枚/只),对照组平均(9.7枚/只～28.6枚/只),体外受精胚胎的卵裂率(79.87%～89.52%)均高于对照组(46.31%～54.54%);2.共穿刺囊胚54枚,术后囊胚的再次扩张率

论文目录

• 一 英文缩略词表
• 二 中文摘要
• 三 英文摘要
• 四 正文
• 1 引言
• 2 第一部分 养精种玉汤对昆明小鼠超数排卵及胚胎发育潜能影响的初步实验观察
• 1 实验材料
• 2 实验内容与方法
• 3 统计分析
• 4 结果
• 5 讨论
• 6 结论
• 参考文献
• 3.第二部分 小鼠囊胚活检与滋养细胞的遗传学分析
• 1 材料与方法
• 2 实验内容与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 4.第三部分 小鼠囊胚的玻璃化冷冻保存
• 1 实验材料
• 2 方法
• 3 统计分析
• 4 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 5.附图
• 五 附录
• 六 致谢
• 七 综述1
• 八 综述2