论文摘要
目的:观察JAK激酶抑制剂AG490对人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法:（1）培养人宫颈癌细胞系Hela细胞并在光学显微镜下观察活细胞生长情况并摄片。（2）Hela细胞在含有10μmol/l、20μmol/l、40μmol/l、80μmol/l的AG490中培养24h、48h、72h,应用光学显微镜动态观察细胞形态学变化;（3）通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察AG490对细胞增殖活力的影响,计算细胞生长抑制率和IC50。（4）采用流式细胞仪（FCM）定量检测终浓度为20μmol/l、40μmol/l、80μmol/l的AG490作用Hela细胞48h后不同浓度组细胞的凋亡率,并分析AG490对细胞周期分布的影响。（5）采用终浓度为20μmol/l、40μmol/l、80μmol/l的AG490处理Hela48h,之后应用免疫细胞化学染色技术观察Hela细胞的凋亡相关基因Bcl-2表达的变化。各实验对照组均加入同等浓度的DMSO,未加入其他干预因素。结果:（1）AG490以时间—剂量依赖性方式显著地抑制人宫颈癌细胞系Hela细胞体外的增殖活性（p＜0.05）。（2）经终浓度分别为10μmol/l、20μmol/l、40μmol/lAG490处理Hela细胞36h后,细胞被阻滞于G1期,S期细胞比例（SFP）明显降低（p＜0.05）。AG490作用24小时后,细胞bcl-2蛋白的表达降低,并出现典型的细胞凋亡的形态学表现,作用时间到48小时,Hela细胞凋亡达高峰。结论:1.JAK激酶抑制剂AG490能有效抑制人宫颈癌Hela细胞的体外增殖,其作用呈时间—量效关系。2.AG490下调Bcl-2蛋白表达,促进Hela细胞凋亡,凋亡率呈浓度依赖性。
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