广西莪术和蓬莪术离体快繁及莪术油抑菌效应的初步研究

论文摘要

莪术（Rhizoma Curcumae）是我国传统的中药材,为姜科（Zingiberaceae）姜黄属（Curcuma）植物的主根茎或根茎。本文以广西莪术（Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang）和蓬莪术（C. phaeocaulis Valetion）为材料,研究了莪术原植物的离体培养过程,并探讨了两种莪术原植物中莪术油抑制植物病原真菌的效果。分别以广西莪术和蓬莪术的幼芽、嫩叶、块茎和根为外植体,附加不同浓度激素组合的培养基进行叶、块茎和根的愈伤组织诱导及继代,莪术幼芽的萌动、增殖、生根、炼苗移栽的培养。结果表明:诱导莪术叶、块茎和根愈伤组织形成的最适培养基为MS +2,4-D 1.0mg·L-1 + 6-BA 0.51.0 mg·L-1(+ NAA 0.3 mg·L-1),其中莪术叶愈伤组织诱导率总体高于块茎和根的诱导率。培养基MS +NAA 0.01 mg·L-1对诱导莪术幼芽的萌动最佳;幼芽的最适增殖培养基为MS + 6-BA 3.0 mg·L-1 + NAA 0.1 mg·L-1+ KT 1.0 mg·L-1,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2MS + NAA 1.0 mg·L-1+ BA 0.5 mg·L-1为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。利用石蜡切片技术和光学显微技术研究不同颜色、不同质地愈伤组织的内部结构,发现不同颜色和不同质地的愈伤组织的细胞排列方式、大小等有所不同。采用抑菌实验和电镜技术等方法研究了莪术油对6种植物病原真菌的抑制作用,结果表明:最低抑制浓度（MIC）为6.25μL·mL-1时莪术油对植物病原真菌孢子萌发和菌丝生长均有显著的抑制作用。半抑制浓度IC50表明莪术油对松赤枯病菌、玉米纹枯病菌的抑制作用最强,最弱的是小麦赤霉病菌。电镜下观察菌丝的横切面表明,处理菌丝的细胞壁消失,原生质解体。表明莪术油具有较强的抗真菌活性,对植物病原真菌孢子萌发和菌丝生长均有显著的抑制作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 材料以及试剂
• 1.1 供试材料
• 1.2 试剂
• 1.3 仪器
• 2 方法
• 2.1 莪术的离体快繁研究
• 2.1.1 培养基的配制及培养条件
• 2.1.2 外植体的消毒和培养条件
• 2.1.3 叶、块茎和根等外植体的愈伤组织诱导及继代培养
• 2.1.4 芽外植体的萌动、增殖、生根培养及移栽
• 2.1.5 细胞学观察
• 2.2 莪术油抑菌效应的研究
• 2.2.1 真菌培养基
• 2.2.2 植物病原真菌的活化培养
• 2.2.3 莪术油的提取
• 2.2.4 莪术油的配制
• 2.2.5 病原真菌孢子萌发抑制率的测定
• 2.2.6 抑菌圈试验
• 2.2.7 最低抑制浓度（MIC）和菌丝生长量的测定
• 2.2.8 最低杀菌浓度（MBC）的测定
• 2.2.9 半抑制浓度（IC50）的测定
• 2.2.10 透射电镜观察
• 3 结果与分析
• 3.1 莪术的离体快繁研究
• 3.1.1 外植体的消毒和培养条件
• 3.1.2 不同激素组合对叶、块茎、根愈伤组织诱导及继代培养的影响
• 3.1.3 不同激素组合对莪术芽萌动、增殖、生根培养及移栽的影响
• 3.1.4 细胞学观察
• 3.2 莪术油抑菌效应的研究
• 3.2.1 广西莪术油的抑菌效应
• 3.2.2 蓬莪术油的抑菌效应
• 3.2.3 广西莪术油和蓬莪术油抑菌效应的比较
• 4 讨论
• 4.1 外植体污染现象
• 4.2 外植体褐化现象
• 4.3 不同激素对莪术离体快繁的影响
• 4.4 细胞学观察
• 4.5 莪术油抑菌的作用
• 文章综述
• 1 药用植物莪术的研究进展
• 1.1 化学成分及检测方法
• 1.1.1 化学成分
• 1.1.2 化学成分的检测
• 1.2 提取工艺
• 1.3 结构与组织学
• 1.4 炮制研究
• 1.5 药理作用与临床
• 1.6 存在的问题及研究展望
• 2 植物精油应用的研究进展
• 2.1 我国精油的种质资源
• 2.2 精油的理化性质
• 2.3 精油的应用
• 2.3.1 抗菌方面的应用
• 2.3.2 抗氧化方面的应用
• 2.3.3 杀虫方面的应用
• 2.3.4 医学领域中的应用
• 2.3.5 食品添加剂中的应用
• 2.4 精油应用存在的问题及前景
• 参考文献
• 致谢
• 研究生期间所发表的文章