阿托伐他汀对Aβ1-42诱导AD大鼠模型抗炎作用的研究

论文摘要

目的:探讨阿托伐他汀对β淀粉样蛋白1-42(β-amyloid 1-42,Aβ1-42)诱导阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）大鼠模型的抗炎作用。通过研究阿托伐他汀对AD大鼠模型的认知功能障碍,海马组织形态改变及海马区炎性因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）的产生等方面的保护作用,从抗炎方面阐明阿托伐他汀神经保护作用的机制。方法:选用健康雄性Wistar大鼠60只,体重250g-300g,将其完全随机分为四组:对照组15只,模型组15只,他汀对照组15只和治疗组15只。模型组和治疗组采用侧脑室注射Aβ的方法制备大鼠痴呆模型——用无菌生理盐水将Aβ1-42（sigma产品）溶解稀释至5ug/ul,37℃孵育72h,使其变为聚集态的Aβ1-42。通过立体定向仪向大鼠左侧脑室注入聚集态的Aβ1-422ul。对照组和他汀对照组大鼠侧脑室内注射无菌生理盐水2ul。他汀对照组和治疗组给与阿托伐他汀5mg/kg/d灌胃三周,对照组和模型组以生理盐水为对照。三周后行侧脑室注射制作动物模型,术后取6h、1周两个时间点,麻醉大鼠,生理盐水及4%多聚甲醛进行心内灌注,取脑,制作病理标本,免疫组织化学方法测定海马区炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达,HE染色观察海马区形态结构的变化,尼氏染色观察神经元凋亡。术后1周各组取一只大鼠,麻醉后取新鲜脑组织,制作电镜标本,透射电镜观察海马区神经元和小胶质细胞超微结构的变化。术后第21天,各组进行Morris水迷宫训练5天,记录成绩,观测大鼠的认知功能变化。结果:1.阿托伐他汀对大鼠认知能力的影响进行Morris水迷宫训练过程中,各组大鼠逃避潜伏期逐渐缩短,记录第5d的成绩,统计学处理后发现,模型组较对照组逃避潜伏期明显延长（41.3±3.4s）,撤离平台后在原平台象限内游泳的时间占整个游泳时间的百分比显著降低（21.20±1.28%）,穿过原平台位置的次数明显减少（3.6±1.517）,具有显著性差异（P＜0.01）;治疗组与模型组相比较,逃避潜伏期缩短（15.7±1.6s）,撤除平台后治疗组大鼠在原平台象限内游泳时间百分比升高（38.80±2.59）,穿过平台位置的次数增多（7.2±1.789）,且差异具有显著性（P＜0.01）;他汀对照组与对照组比较,差异无显著性。2.各组大鼠海马区组织病理及超微结构观察HE染色:术后1周对照组海马神经细胞呈椭圆形,排列整齐紧密,染色均一,细胞核圆且大,核仁清晰。模型组海马神经细胞层次明显减少,细胞排列稀疏,细胞核深染、固缩为三角形或多角形,大量胶质细胞增生。他汀治疗组海马神经细胞排列较模型组整齐,细胞呈圆形或椭圆形,核仁清晰,细胞脱失较少见,反应性胶质细胞减少明显减轻。超微电镜:对照组大部分神经元结构正常,胞核常染色质为主、核圆,细胞内可见丰富的细胞器。他汀对照组镜下亦大部分神经元均正常。模型组神经元大部分神经元衰退,细胞固缩,胞核椭圆形,细胞内高尔基体及内质网均肿胀,线粒体基质呈低电子密度,细胞质基质呈高电子密度,胞质中充满核糖体。胶质细胞比正常组多,胞质内可见髓样体。他汀治疗组与模型组相比,神经元损伤较轻,衰退神经元较少,胶质细胞较少。3.免疫组织化学染色法检测大鼠海马区炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达模型组与对照组比较,三种炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α阳性细胞较多,差别有统计学意义（P＜0.01）;他汀治疗组与模型组比较,上述种炎性因子阳性细胞减少,差别有统计学意义（P＜0.01）;对照组和他汀对照组海马区细胞IL-1β,IL-6,TNF-α阳性细胞均较少,两者差别无统计学意义。结论:1.他汀对照组与对照组结果均无显著差异,阿托伐他汀本身对正常脑组织无特殊作用。2.大鼠AD模型给予阿托伐他汀治疗后,光镜及电镜下海马区的神经细胞损伤均减轻,胶质细胞增生减少,学习及记忆能力明显改善。3.经阿托伐他汀治疗后,术后6小时时大鼠AD模型海马区炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α分泌明显减少,模型组与他汀治疗组1周时IL-1β、IL-6、TNF-α均较6小时时较少,但经阿托伐他汀治疗后他汀治疗组分泌较模型组仍明显减少。

论文目录

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• 英文摘要
• 符号说明
• 正文:阿托伐他汀对A β 1-42诱导AD大鼠模型抗炎作用的研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图表
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 学位论文评阅及答辩情况表