本文主要研究内容
作者王超,刘洋,秦波音,任晓楠,谭丹,杨华,李顺,周晓辉（2019）在《甲型流感病毒H1N1 pdm09与PR8感染C57BL/6小鼠诱生特异性CD8~+T细胞免疫应答的比较研究》一文中研究指出：目的比较甲型流感病毒H1N1两亚型毒株A/Shanghai/37T/2009（H1N1）（pdm09）临床分离株和A/Puerto Rico/8/34（H1N1）（PR8）标准株感染C57BL/6小鼠后,其病理状态的改变及诱生特异性CD8+T细胞的免疫反应。方法①用9.85×106半数组织细胞感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID50)的PR8和pdm09病毒分别滴鼻感染野生型C57BL/6小鼠,每日（连续14 d）观察其状态并记录死亡情况。于感染后第1、3天处死小鼠,取其肺称重计算肺指数;左叶肺经4%多聚甲醛固定后进行H&E（hematoxylin-eosin staining）染色,观察感染后肺的病理变化;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测肺病毒载量。②用0.25倍半数致死量（lethal dose 50%,LD50）的PR8和pdm09分别滴鼻感染小鼠,每日称重连续观察。于感染后第8天解剖取肺和脾,通过H&E染色比较肺部病理改变;通过流式细胞术（FACS）检测脾病毒特异性CD8+T细胞数量比例,以及IFN-γ、TNF-α、IL-2、granzyme B等细胞因子和免疫抑制检查点分子PD-1、LAG-3、Tim-3、CTLA-4的表达情况。结果①以相同TCID50流感病毒感染后,两组小鼠均出现疾病状态。PR8组小鼠感染第5天全部死亡,死亡率显著高于pdm09组（P<0.01）;第1、3天肺指数和病毒载量的结果PR8组均显著高于pdm09组;H&E染色结果显示PR8组病理损伤严重,肺泡壁增厚,出现肺实质化,血细胞渗出增多,而pdm09组小鼠肺组织病理损伤较轻,炎症浸润少;②以相同LD50流感病毒感染后,PR8组小鼠的体重损失和肺组织病理损伤均比pdm09组严重;流式结果显示PR8组诱生的病毒特异性CD8+T细胞比例高于pdm09组,但是PR8组中活化的CD8+T细胞(CD8+CD44High)表达的IFN-γ、IL-2和TNF-α显著低于pdm09组;检测该群细胞免疫功能耗竭分子,发现其表达了更多的免疫抑制分子PD-1和LAG-3。结论 PR8相对于pdm09能够对小鼠造成更严重的损伤,可能是因为其活化的特异性的CD8+T细胞出现功能耗竭导致特异的免疫保护力受损,抵抗和清除病毒的能力下降,故而造成更严重的病理损伤。
Abstract
mu de bi jiao jia xing liu gan bing du H1N1liang ya xing du zhu A/Shanghai/37T/2009（H1N1）（pdm09）lin chuang fen li zhu he A/Puerto Rico/8/34（H1N1）（PR8）biao zhun zhu gan ran C57BL/6xiao shu hou ,ji bing li zhuang tai de gai bian ji you sheng te yi xing CD8+Txi bao de mian yi fan ying 。fang fa ①yong 9.85×106ban shu zu zhi xi bao gan ran ji liang (50%tissue culture infective dose,TCID50)de PR8he pdm09bing du fen bie di bi gan ran ye sheng xing C57BL/6xiao shu ,mei ri （lian xu 14 d）guan cha ji zhuang tai bing ji lu si wang qing kuang 。yu gan ran hou di 1、3tian chu si xiao shu ,qu ji fei chen chong ji suan fei zhi shu ;zuo xie fei jing 4%duo ju jia quan gu ding hou jin hang H&E（hematoxylin-eosin staining）ran se ,guan cha gan ran hou fei de bing li bian hua ;shi shi ying guang ding liang PCR（qRT-PCR）jian ce fei bing du zai liang 。②yong 0.25bei ban shu zhi si liang （lethal dose 50%,LD50）de PR8he pdm09fen bie di bi gan ran xiao shu ,mei ri chen chong lian xu guan cha 。yu gan ran hou di 8tian jie pou qu fei he pi ,tong guo H&Eran se bi jiao fei bu bing li gai bian ;tong guo liu shi xi bao shu （FACS）jian ce pi bing du te yi xing CD8+Txi bao shu liang bi li ,yi ji IFN-γ、TNF-α、IL-2、granzyme Bdeng xi bao yin zi he mian yi yi zhi jian cha dian fen zi PD-1、LAG-3、Tim-3、CTLA-4de biao da qing kuang 。jie guo ①yi xiang tong TCID50liu gan bing du gan ran hou ,liang zu xiao shu jun chu xian ji bing zhuang tai 。PR8zu xiao shu gan ran di 5tian quan bu si wang ,si wang lv xian zhe gao yu pdm09zu （P<0.01）;di 1、3tian fei zhi shu he bing du zai liang de jie guo PR8zu jun xian zhe gao yu pdm09zu ;H&Eran se jie guo xian shi PR8zu bing li sun shang yan chong ,fei pao bi zeng hou ,chu xian fei shi zhi hua ,xie xi bao shen chu zeng duo ,er pdm09zu xiao shu fei zu zhi bing li sun shang jiao qing ,yan zheng jin run shao ;②yi xiang tong LD50liu gan bing du gan ran hou ,PR8zu xiao shu de ti chong sun shi he fei zu zhi bing li sun shang jun bi pdm09zu yan chong ;liu shi jie guo xian shi PR8zu you sheng de bing du te yi xing CD8+Txi bao bi li gao yu pdm09zu ,dan shi PR8zu zhong huo hua de CD8+Txi bao (CD8+CD44High)biao da de IFN-γ、IL-2he TNF-αxian zhe di yu pdm09zu ;jian ce gai qun xi bao mian yi gong neng hao jie fen zi ,fa xian ji biao da le geng duo de mian yi yi zhi fen zi PD-1he LAG-3。jie lun PR8xiang dui yu pdm09neng gou dui xiao shu zao cheng geng yan chong de sun shang ,ke neng shi yin wei ji huo hua de te yi xing de CD8+Txi bao chu xian gong neng hao jie dao zhi te yi de mian yi bao hu li shou sun ,di kang he qing chu bing du de neng li xia jiang ,gu er zao cheng geng yan chong de bing li sun shang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国实验动物学报的王超,刘洋,秦波音,任晓楠,谭丹,杨华,李顺,周晓辉，发表于刊物中国实验动物学报2019年05期论文，是一篇关于甲型流感病毒论文,特异性细胞论文,免疫应答论文,功能耗竭论文,中国实验动物学报2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国实验动物学报2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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