CD133阳性胶质瘤细胞亚群与胶质瘤血管生成关系的研究

论文摘要

目的:脑胶质瘤发病率约占颅内肿瘤的45%,治疗以手术切除为主,辅以放疗、化疗和免疫治疗等其他方法。如何提高术后治疗效果,对延长脑胶质瘤患者的生存期,提高生存质量,以期达到根治目的有十分重要的意义。血管发生对于肿瘤形成和维持是非常重要的,血管发生的调节是一个复杂的过程,在这个过程中,肿瘤细胞和新血管系统通过自分泌和旁分泌的生长因子相互作用,依赖于血管发生的恶性胶质瘤是高度致死性的癌症,治疗有效性的提高要求我们进一步了解促进恶性胶质瘤血管发生的分子机制。对恶性胶质瘤和其它脑癌的最新研究发现了与普通神经干细胞有共同特性的肿瘤亚群,神经胶质瘤的关键亚群CD133+细胞与神经干细胞有相同的特性,其表达神经干细胞标志物（包括细胞表面抗原prominin-1/CD133）,能够自我更新,形成神经球样的球体和分化成复杂的神经系统家族。由于血管生成在肿瘤形成中是关键一步（血管生成开关）,我们从人的胶质瘤标本中分离出CD133+胶质瘤细胞（以下简称CD133+GC）,研究了CD133+GC是否是通过促进血管发生进而促使肿瘤形成,证实了CD133+GC与肿瘤增殖和血管生成的关系。材料和方法:病人标本的收集:病人的活检标本被,这些病人包括初次就诊的和恶性胶质瘤复发的,病理结果来自于山东省立医院病理科。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定CD133 mRNA在胶质瘤组织中心及边缘区域的表达和分布情况,并利用免疫磁珠分选术对肿瘤细胞进行分类,通过细胞分选,我们把CD133+和CD133-的肿瘤细胞群分离开,短时间培养后,我们把细胞植入无胸腺小鼠的右额叶中,然后,我们收集有变化小鼠的大脑,用福尔马林固定,石蜡包埋,做成切片,进行病理检查,用CD31标记肿瘤细胞,用Weidner法测量肿瘤的血管密度。结果和讨论:1.分离、提纯和培养:中枢神经系统肿瘤干细胞与神经干细胞表型相似,这已经得到确认,我们对来自患者手术标本的恶性胶质瘤组织进行短期培养,标本通过皮下或者颅内移植到免疫缺陷的小鼠上。人类的肿瘤标本正好证实了人类癌症的生物学过程,而人的胶质瘤标本大量提纯有活力的肿瘤细胞,我们可以利用干细胞表面标记物CD133来选取富含CD133+细胞群。我们先分解肿瘤,用CD133抗体标记,利用MACS进行分类,然后,我们分别对CD133+和CD133-肿瘤细胞进行短期培养。2.由CD133+GC分化产生的肿瘤有丰富的血管供应,更易坏死和出血对干细胞样癌细胞的最新研究表明肿瘤的来源可以分成两类,分别是CD133+和CD133-细胞。为了研究胶质瘤亚群的致瘤能力,我们将CD133-或CD133+的胶质瘤细胞植入无胸腺裸鼠的右额叶,这些瘤细胞来自恶性胶质瘤病人标本。植入CD133+瘤细胞的大脑产生的肿瘤血管明显增多和更易出血,这和植入CD133-瘤细胞的大脑形成鲜明对比。对植入CD133+GC的大脑进行病理分析,我们发现肿瘤巨大,高度增殖,血液供应丰富,多发的坏死和出血。植入CD133-肿瘤细胞的小鼠全都没产生肿瘤。把移植CD133+和CD133-细胞的大脑进行CD31染色并对比,Weidner法测量血管密度,我们发现CD133+细胞产生的肿瘤比CD133-细胞产生的肿瘤血管明显增多。因此,血管生成能力是体内胶质瘤CD133+和CD133-细胞在表型上的关键区别。因此,为了提高脑瘤患者的生存率,下一步的治疗应该集中在肿瘤中这一少部分CD133+的肿瘤干细胞。3.逆转录-聚合酶链反应显示,CD133+GC在胶质瘤边缘区域的分布及表达高于胶质瘤中心区域

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 资料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表的论文
• 攻读学位期间科研学术情况
• 学位论文评阅及答辩情况表