松茸中多糖提取和纯化技术的研究

论文摘要

本文对松茸子实体多糖进行了系统提取和纯化研究。采用超滤对松茸子实体多糖进行分离纯化,对多糖浓度、压力、温度、pH等影响因素进行深入细致研究,优化确定实验操作条件,有利于新产品的开发。通过单因素试验和正交试验,确定了较佳的提取工艺,料水比为1:30;浸提温度:120℃;浸提时间:3h。提取次数以两次较经济,两次累计提取率可达93.10%。提取液浓缩后醇沉工艺条件为3倍体积95%乙醇醇沉6h。建立了松茸多糖纯化和分离的技术路线,主要步骤包括:超滤纯化、阴阳离子交换树脂法脱蛋白、分级醇沉和凝胶过滤层析等。实验结果表明:松茸多糖脱蛋白可采用如下工艺:松茸粗多糖溶液→1万分子量截留率膜超滤→截留液→过阴阳离子树脂交换柱→冻干→松茸脱蛋白多糖精粉。采用阴阳离子树脂法来脱除松茸多糖中的蛋白质效果相当理想。用弱碱性阴和弱酸性阳离子交换树脂串联,去离子水洗脱,条件温和,起到部分脱色效果,用阴阳离子串联1次,蛋白脱除率可达89.7%,多糖回收率达到了82.1%。该法具有交换容量大、产业化放大容易、树脂可长期反复利用、工艺简单、生产成本低等诸多优点。通过分级醇沉可以将松茸多糖初步分为两个组分:命名为ABMF1和ABMF2,得率分别为48%和46%。通过Sepharose6凝胶过滤从ABMFⅠ中分离得到两个多糖均一组分:分别命名为ABMPⅠ和ABMPⅡ。通过Sephacry S-300凝胶过滤从ABMF2中分离得到一个多糖均一组分,命名为ABMPⅢ,ABMPⅢ的含量为ABMF2的28.6%。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 第一章 绪论
• 1 食用菌多糖的研究进展
• 1.1 多糖的定义与种类
• 1.2 糖的来源和分布
• 1.3 多糖的生物活性
• 2 多糖的构效关系
• 2.1 初级结构的构效关系
• 2.2 高级结构的构效关系
• 3 多糖的理化性质与其活性的关系
• 3.1 多糖的分子量分布
• 3.2 多糖的溶解度
• 3.3 多糖的黏度
• 4 多糖的提取以及分离纯化技术研究进展
• 4.1 多糖的分离纯化
• 5 真菌多糖类产品开发现状
• 5.1 香菇多糖（Lentinan）
• 5.2 云芝多糖（Kestin,PSK）
• 5.3 猪苓多糖
• 5.4 银耳抱糖（TSP）
• 5.5 多糖蛋白片
• 5.6 茯苓多糖（Pachymaran）
• 6 目前多糖研究中存在的问题
• 6.1 多糖结构和功能的关系至今尚不十分清楚
• 6.2 多糖的结构测定方法远未达到向蛋白质和核酸结构测定那样自动化、微量化14和标准化
• 6.3 多糖的合成远比多肤、核酸的合成复杂、困难
• 6.4 多糖在体内的作用机制还未十分明了
• 6.5 多糖样品的制取较为困难
• 7 现代分离重组技术在植物功能成分提取中的应用
• 7.1 超临界流体萃取技术（Supereritical Fluid EXtraction,SFE）
• 7.2 微波萃取技术（MierowaveAssistedExtrae—tion,MAE）
• 7.3 大孔树脂吸附分离技术
• 7.4 膜提取分离技术
• 7.5 层析技术
• 8 本研究创新情况
• 第二章 松茸多糖的提取研究
• 1 材料与方法
• 1.1 原料、试剂材料及仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 子实体粉碎目数的研究
• 2.2 热水浸提工艺的确定
• 2.3 滤渣复提次数的确定
• 2.4 醇沉工艺的确定
• 2.5 所定提取工艺的得率及所得粗粉的分析结果
• 3 本章小结
• 3.1 确定了松茸子实体多糖的水浸提工艺
• 3.2 松茸子实体多糖重复提取两次较为经济
• 第三章 松茸子实体多糖的分离纯化研究
• 1 材料与方法
• 1.1 原料、试剂材料及仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 超滤法纯化松茸粗多糖
• 2.2 Sevag法脱蛋白
• 2.3 Sevag法结合酶法脱蛋白
• 2.4 三氯乙酸脱蛋白
• 2.5 离子交换树脂脱蛋白
• 2O₂脱色'>2.6 H₂O₂脱色
• 2.7 分级醇沉分离纯化松茸多糖
• 2.8 凝胶自备柱层析分离
• 2.9 ABMF2采用预装柱分离
• 3 本章小结
• 3.1 建立了松茸多糖分离纯化的技术路线
• 3.2 采用分级醇沉和凝胶过滤等技术得到了几个未见报道的多糖单组分
• 第四章 总结
• 致谢
• 参考文献