论文摘要
目的探讨丹皮酚及丹皮酚与顺铂联合应用对人食管癌细胞增殖的影响及其可能机制,为将丹皮酚应用于食管癌的治疗提供实验依据。方法①选用人食管鳞癌Eca-109和腺癌SEG-1细胞株作为研究对象,采用MTT法检测Pae体外对人食管癌细胞株增殖的影响;②选用三个浓度丹皮酚(7.81、15.63、31.25 mg·L-1)与系列浓度顺铂联合应用处理Eca-109和SEG-1细胞,采用CDI分析两药相互作用性质;③运用形态学、流式细胞仪检测以及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax免疫组化方法研究丹皮酚增强顺铂疗效的可能机制。结果①丹皮酚(7.81～250 mg·L-1)对上述两种细胞均有增殖抑制作用,药物浓度越高,抑制作用越强,呈现明显的剂量效应关系,以浓度的对数与抑制率进行直线相关分析:Eca-109:r=0.889,P<0.05;SEG-1:r=0.961,P<0.01,IC50值分别为Eca-109:124.77 mg·L-1,SEG-1:57.73 mg·L-1。②丹皮酚与系列浓度顺铂联合应用于Eca-109和SEG-1细胞,在一定的浓度范围内显示出不同程度的协同或相加作用,尤其当Pae与CDDP剂量较低时,协同作用更加明显,联合用药组与单独用药组之间的差异具有显著性。③形态学、流式细胞仪均可见典型的凋亡改变,显示丹皮酚在一定的浓度范围内能诱导人食管癌细胞凋亡,其诱导凋亡作用具有浓度依赖性。丹皮酚与化疗药物顺铂联合后有协同诱导人食管癌细胞凋亡的作用,进一步研究发现丹皮酚能引起人食管癌细胞阻滞于S期,这将有利于化疗药物顺铂发挥抗肿瘤作用,部分揭示了丹皮酚与顺铂协同作用机制。凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax免疫组化分析发现Pae及其联合CDDP可以下调Bcl-2,上调Bax表达,提示影响Bcl-2家族蛋白表达可能是Pae及其联合CDDP诱导凋亡的机制之一。结论本文研究结果表明,丹皮酚单独应用对人食管癌细胞株Eca-109和SEG-1有增殖抑制作用,且呈明显的剂量效应关系;丹皮酚与顺铂联合应用具有明显的协同抑制食管癌细胞增殖作用,其协同机制可能与诱导凋亡、改变细胞周期有关。进一步研究发现影响Bcl-2家族蛋白表达可能是Pae及其联合CDDP诱导凋亡的机制之一。