促肾上腺皮质激素释放激素在针刺镇痛与免疫调节中的作用及机制研究

论文摘要

应激反应的主要特征是以下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴（HPAA）的激活为核心的生理和心理反应。HPA轴激活的中枢控制是十分复杂的，在这一系列神经内分泌调节过程中，下丘脑合成和释放的促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）起着关键的作用，它控制着HPA轴的兴奋水平。CRH及其受体广泛分布于中枢神经系统，并参与痛觉调制、内分泌、免疫等多种生理活动。在炎症痛大鼠模型上，以往研究显示，鞘内注射CRH能抑制痛敏。最近还发现CRH能直接影响免疫功能。 炎性痛是临床上常见病症，长期实践证明针刺是一种有效的镇痛方法，在临床上被广泛应用。对电针镇痛的机理研究揭示，电针是通过激活机体内源性痛觉调制系统如内源性阿片肽和5-HT下行抑制系统而起镇痛作用。传统医学认为，针灸可以扶助正气，祛除邪气；现代医学则认为，针灸可以提高机体的免疫功能。那么CRH在针刺镇痛和免疫过程中扮演怎样的角色、发挥什么作用呢? 因此，本研究通过行为学痛阈观察、足容积测定、流氏细胞检测、ELISA检测、高效液相电化学法、免疫组化、RT-PCR和免疫荧光双标结合激光共聚焦技术探讨CRH对弗氏完全佐剂诱发的的炎症痛敏反应和针刺镇痛与免疫调节的影响及可能的作用机制。 实验结果如下： 1．电针能提高AA大鼠痛阈、降低其足肿胀及致炎因子TNF-α水平，上调

论文目录

• 英文缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 电针夹脊穴对炎症痛大鼠的镇痛、抗炎和免疫作用
• 1 材料与方法
• 1.1 动物选择：
• 1.2 动物分组及处理：
• 1.3 主要试剂与仪器
• 1.4 标本采集及处理
• 2 观察项目、检测指标及检测方法
• 2.1 痛阈测定
• 2.2 大鼠足跖和关节的容积测定
• 2.3 流式细胞仪检测T细胞亚群：
• 2.4 双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清的IL-4、TNF-α水平
• 2.5 高效液相色谱电化学检测5-HT的含量
• 2.6 统计处理方法
• 3 结果
• 3.1 大鼠炎症痛的形成
• 3.2 各组大鼠一般情况的观察
• 3.3 电针对大鼠佐剂性关节炎原发性足跖肿胀率的影响
• 3.4 电针对大鼠佐剂性关节炎热刺激缩足反应潜伏期的影响
• 3.5 电针对AA大鼠T细胞亚群的影响
• 3.6 电针对AA大鼠大鼠血清的IL-4和TNF-α水平的影响
• 3.7 高效液相色谱电化学检测下丘脑及NRM内5-HT含量
• 4 讨论
• 4.1 动物模型选择及评价
• 4.2 夹脊穴镇痛理论基础
• 4.3 电针对AA大鼠的镇痛、抗炎及免疫机制
• 4.4 EA对AA大鼠中枢5-HT含量的影响
• 第二部分 CRH对炎症痛大鼠痛阈和免疫功能及电针作用的影响
• 实验一 CRH对炎症痛模型大鼠痛阈及对针刺镇痛的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 脑室注射CRH对炎症痛大鼠痛阈的影响
• 2.2 CRH受体拮抗剂（CRH-RA）对CRH抗炎症痛作用的影响
• 2.3 鞘内注射CRH对炎症痛大鼠痛阈的影响
• 2.4 鞘内注射CRH-RA对炎症痛大鼠痛阈的影响
• 2.5 纳络酮和Mianserin对鞘内注射CRH抗炎症痛敏作用的影响
• 2.6 在炎症痛大鼠模型上,脑室注射CRH对电针镇痛的影响
• 3 讨论
• 附图：
• 实验二 CRH对炎症痛大鼠免疫功能及电针作用的影响
• 1 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验动物分组及处理
• 1.3 药品与试剂
• 1.4 仪器
• 2 方法
• 2.1 弗氏完全佐剂致炎症痛模型
• 2.2 侧脑室埋管及注射
• 2.3 鞘内埋管及注射
• 2.4 电针方法
• 2.5 免疫学检测方法
• 2.6 免疫组织化学技术检测
• 2.7 统计学处理
• 3 结果
• 3.1 侧脑室微量注射CRH对AA大鼠血清TNF-α、IL-4及电针作用的影响
• 3.2 CRH对AA大鼠NRM中5-HT阳性神经元光密度值的影响
• 4 讨论
• 附图
• 第三部分 炎症痛时CRH在中枢痛觉调制有关部位的表达及电针的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 主要试剂
• 1.2 主要实验器材
• 1.3 主要技术方法
• 1.4 观测指标
• 1.5 统计学处理
• 2 结果
• 2.1 炎症痛大鼠PVN中CRH免疫阳性神经元光密度值的改变
• 2.2 炎症痛大鼠PAG中CRH免疫阳性神经元光密度值的改变
• 2.3 炎症痛大鼠NRM中CRH免疫阳性神经元光密度值的改变
• 2.4 炎症痛大鼠脊髓中CRH免疫阳性神经元光密度值的改变
• 3.讨论
• 附图
• 第四部分 电针对AA大鼠CRH-R1在下丘脑室旁核和中缝大核表达的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 主要试剂
• 1.2 主要实验器材
• 1.3 主要技术方法
• 1.4 统计学处理
• 2.结果
• 3.讨论
• 附图
• 第五部分 CRH在脊髓与脑啡肽及在NRM与5-HT能神经元的共存
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 动物选择与分组
• 1.1.2 药品和试剂
• 1.1.3 实验仪器
• 1.1.4 有关溶液的配制
• 1.2 方法
• 2结果
• 2.1 CRH与脑啡肽免疫阳性神经元的共存
• 2.2 CRH与5-HT免疫阳性神经元的共存
• 3 讨论
• 附图
• 结语
• 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 附件一：文献综述：CRH及其受体与镇痛和免疫的研究进展
• 附件二：公开发表的学术论文、专著及科研成果
• 附件三：声明