论文摘要
本论文以褐环粘盖牛肝菌子实体为材料,经石油醚浸提得到褐环粘盖牛肝菌石油醚提取物（SLPE）;进一步以此提取物为材料,采用不同的洗脱条件,反复进行硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析,采用紫外灯照射、碘蒸气熏蒸、磷钼酸染色和高效液相色谱等检测方法鉴定洗脱得到的组分是否是单一组分,合并相同的单一组分,然后用核磁共振和质谱等方法确定得到的单一组分的化学结构。随后,用DPPH·法和MTT法分别测定了单一组分和初步分离后得到的部分组分的抗氧化和抗肿瘤活性。实验结果如下:1、褐环粘盖牛肝菌石油醚提取物（SLPE）用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析进行分离纯化,采用紫外灯照射、碘蒸气熏蒸、磷钼酸染色和高效液相色谱对分离组分进行检测,得到五种单一组分,分别命名为:ns41、ns101、ns221、ns5和ns7。2、对分离得到的五种单一组分采用核磁共振和质谱的方法确定单一组分的结构,结果为:ns41为油酸,ns101为亚油酸,ns5为麦角甾醇,ns7为3, 6-二羟基（-（2E,6E,10E）-3,7,11,15-六甲基十六碳-2,6,10,14-四烯）苯乙酯,为牛肝菌素的同分异构体。ns221最后经核磁共振检测不是纯品,可能为两种脂肪酸的混合物。3、以Vc为阳性对照,对具明确结构的四种单一组分和初步分离后得到的部分组分的抗氧化活性测定结果表明:四种单一组分均具有不同程度的清除DPPH·自由基的能力,且呈浓度依赖关系,其高低顺序为ns7>ns5>ns101>ns41。其中,单一组分ns7的DPPH·自由基清除能力显著高于其他组分,在最低浓度0.5mg/mL时清除能力就已达到93.68%,且ns7的IC50值为0.0044mg/mL,明显高于阳性对照Vc的IC50值0.016 mg/mL,说明ns7具有非常强的抗氧化活性。单一组分ns5的IC50值为1.0348 mg/mL,抗氧化活性也较高。初步分离后得到的部分组分及组分ns221也具有清除DPPH·自由基的能力,且呈浓度依赖关系,其高低顺序为ns0>ns6>ns1>>ns4-2>ns4>ns3>ns2>ns221。4、对四种单一组分和初步分离后的部分组分进行抗肿瘤活性的测定结果表明:单一组分ns7的抗肿瘤能力最强,IC50值为7.47μg/mL,其次为单一组分ns5,IC50值为108.54μg/mL,单一组分ns41和ns101的抗肿瘤能力较弱,表明单一组分ns7对人胃癌细胞株（BGC-823细胞）增殖具有很强的抑制作用。初步分离后的部分组分也具有不同程度的抗肿瘤能力,其中最强的是组分ns3,IC50值为95.77μg/mL,其次依次为组分ns42、ns4、ns6,IC50值分别为268.65μg/mL、296.62μg/mL、430.66μg/mL,其他组分抗肿瘤能力非常弱,IC50值均大于800μg/mL。综上所述,从褐环粘盖牛肝菌石油醚提取物（SLPE）中分离得到的单一组分都具有不同程度的抗氧化和抗肿瘤活性,其中,ns7抗氧化和抗肿瘤活性均很强。该物质属于聚异戊二烯苯酚类化合物,为牛肝菌素的同分异构体,是首次从褐环粘盖牛肝菌中分离得到的具新型结构的化合物,其抗氧化和抗肿瘤活性在国内外均未见报道。