论文摘要
针对安乃近有关物质分析方法在实际质量控制中存在的问题,对安乃近中间体进行合成制备,并进行化学结构归属；对其分析方法进行优化选择,找出最佳的色谱条件,并进行方法学验证；对安乃近原料药中存在的未知杂质进行化学结构确认,并抽取安乃近样品进行测定,以验证分析方法的适用性。首先对安乃近中间体进行合成制备,并通过质谱法、红外光谱法、紫外光谱法进行结构确认。其次建立安乃近中有关物质的测定方法,对安乃近进行了强酸、强碱、热、光照、氧化等破坏试验,针对各条件下产生的杂质,对测定条件进行优化选择,包括色谱柱、流动相、波长等,确定了色谱条件,同时进行专属性、准确度、精密度、线性及范围、耐用性、检测限及定量限等方法学验证。最后对安乃近原料药中的未知杂质进行鉴定,通过色谱数据和LC-MS联用技术,为未知杂质的结构确定提供了信息。随机抽取安乃近原料药样品,按照所建立的分析方法进行测定,计算安乃近原料药中各杂质的含量。通过对安乃近中间体的合成制备及结构确认,可以为下一步的研究分析提供所需要的对照品；破坏性试验,发现安乃近在日光照射、紫外光照射、高温、酸、碱、氧化物质情况下不稳定,产生的降解产物较多,针对所有杂质进行色谱条件优化选择,得出的最佳HPLC条件：检测波长254nm；色谱柱：ODS C18 （4.6x250mm,5μm）;流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液（6.0g/L磷酸二氢钠二水合物1000mL,加三乙胺1mL,以浓氢氧化钠调pH=7.0）（30：70）。通过对分析方法的验证,表明该方法的专属性,精密度、线性及范围、准确度均符合要求,灵敏度高,对安乃近中各杂质的存放时间及流动相有机相比例变化的耐用性试验均合格,并证明了安乃近样品易水解生成杂质,溶液应临用新制。然后针对安乃近原料药中存在的未知杂质,采用两种途径进行结构确认：其一采用色谱法,得知安乃近中两个未知杂质的保留时间分别与对照品甲酰氨基安替比林和氨基安替比林完全一致；其二采用LC-MS联用技术,得到两未知杂质的一级质谱和二级质谱进行综合分析,同时将杂质的质谱图谱和紫外吸收光谱与对照品的图谱分别进行对比,进一步确定了未知杂质的分子量和结构式,说明了安乃近原料药成品中的两个未知杂质就是生产工艺的中间体产物。最后由安乃近样品的测试结果表明,本方法适用于安乃近成品的质量控制。本课题建立的方法可以更好地控制安乃近中有关物质的含量,对安乃近中的所有杂质能准确测定,该分析方法快速、简便、准确,对安乃近成品的质量控制有重要意义。