本文主要研究内容
作者许力士（2019）在《伪狂犬病毒GXLB-2015、GXGG-2016株gI/gE双基因缺失并表达EGFP株的构建及其生物学特性分析》一文中研究指出：伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的包括肉食动物、反刍动物、啮齿动物等多种动物发病的急性传染病,自2011年以来,由变异伪狂犬毒株导致的伪狂犬病的爆发给我国的生猪养殖业造成了巨大的经济损失。gl/gE基因为伪狂犬病病毒的主要毒力基因,可以通过缺失其功能降低病毒的毒力。调查发现广西部分规模猪场普遍存在伪狂犬病病毒感染,本实验室前期从广西采集的样品中分离得到了国内变异株和疫苗株的重组毒株GXLB-2015和TK缺失毒株GXGG-2016。本实验以伪狂犬病病毒GXLB-2015株和GXGG-2016株为模板分别构建了重组质粒pMD18T-LR,通过限制性内切酶酶切和T4DNA连接酶连接的方法插入了EGFP的表达序列作为荧光标记,构建了和GXLB-2015株和GXGG-2016株相对应的含EGFP表达序列的重组质粒pMD18T-L-EGFP-R;通过同源重组的方法成功构建了能够表达EGFP的GXLB-2015株和GXGG-2016株gI/gE双基因缺失重组毒株r GXLB-2015-Δ gl/gE-EGFP和rGXGG-2016-Δ gI/gE-EGFP。为了解GXLB-2015株和GXGG-2016株gI/gE双基因缺失并表达EGFP的重组毒株在体外的生长特性和gl/gE双基因缺失对GXLB-2015株和GXGG-2016株对小鼠致病性的影响,对GXLB-2015株和GXGG-2016株以及它们gI/gE双基因缺失并表达EGFP的重组毒株进行了空斑试验,测定其多步生长曲线;对小鼠进行了攻毒试验,并测定其脑内和肺脏内病毒含量。结果表明:gI/gE双基因缺失并表达EGFP重组毒株产生的空斑与原毒株产生的空斑稍小;r GXLB-2015-△gI/gE-EGFP 比原毒株GXLB-2015的复制繁殖能力稍低,rGXGG-2016-ΔgI/gE-EGFP则显示出明显更低的生长特性,gI/gE双基因缺失并且表达EGFP后,rGXGG-2016-Δ gI/gE-EGFP 比GXGG-2016更迟才出现滴度的快速增加,而r GXLB-2015-△gI/gE-EGFP则比GXLB-2015更早地快速增加病毒的滴度;rGXGG-2016-Δ gI/gE-EGFP与GXGG-2016 一样对小鼠没有致病性,而r GXLB-2015-Δ gI/gE-EGFP则具有比GXLB-2015更低的半数致死量,但开始发病的时间较长,病症更轻,病程更长。本试验初步了解了gI/gE双基因缺失并表达EGFP对GXLB-2015和GXGG-2016的生长特性的影响,为后期gI/gE双基因缺失毒株的构建提供一定的参考,并为以其为载体表达其他病毒的蛋白打下基础。
Abstract
wei kuang quan bing (PR)shi you wei kuang quan bing bing du (PRV)yin qi de bao gua rou shi dong wu 、fan chu dong wu 、nie chi dong wu deng duo chong dong wu fa bing de ji xing chuan ran bing ,zi 2011nian yi lai ,you bian yi wei kuang quan du zhu dao zhi de wei kuang quan bing de bao fa gei wo guo de sheng zhu yang shi ye zao cheng le ju da de jing ji sun shi 。gl/gEji yin wei wei kuang quan bing bing du de zhu yao du li ji yin ,ke yi tong guo que shi ji gong neng jiang di bing du de du li 。diao cha fa xian an xi bu fen gui mo zhu chang pu bian cun zai wei kuang quan bing bing du gan ran ,ben shi yan shi qian ji cong an xi cai ji de yang pin zhong fen li de dao le guo nei bian yi zhu he yi miao zhu de chong zu du zhu GXLB-2015he TKque shi du zhu GXGG-2016。ben shi yan yi wei kuang quan bing bing du GXLB-2015zhu he GXGG-2016zhu wei mo ban fen bie gou jian le chong zu zhi li pMD18T-LR,tong guo xian zhi xing nei qie mei mei qie he T4DNAlian jie mei lian jie de fang fa cha ru le EGFPde biao da xu lie zuo wei ying guang biao ji ,gou jian le he GXLB-2015zhu he GXGG-2016zhu xiang dui ying de han EGFPbiao da xu lie de chong zu zhi li pMD18T-L-EGFP-R;tong guo tong yuan chong zu de fang fa cheng gong gou jian le neng gou biao da EGFPde GXLB-2015zhu he GXGG-2016zhu gI/gEshuang ji yin que shi chong zu du zhu r GXLB-2015-Δ gl/gE-EGFPhe rGXGG-2016-Δ gI/gE-EGFP。wei le jie GXLB-2015zhu he GXGG-2016zhu gI/gEshuang ji yin que shi bing biao da EGFPde chong zu du zhu zai ti wai de sheng chang te xing he gl/gEshuang ji yin que shi dui GXLB-2015zhu he GXGG-2016zhu dui xiao shu zhi bing xing de ying xiang ,dui GXLB-2015zhu he GXGG-2016zhu yi ji ta men gI/gEshuang ji yin que shi bing biao da EGFPde chong zu du zhu jin hang le kong ban shi yan ,ce ding ji duo bu sheng chang qu xian ;dui xiao shu jin hang le gong du shi yan ,bing ce ding ji nao nei he fei zang nei bing du han liang 。jie guo biao ming :gI/gEshuang ji yin que shi bing biao da EGFPchong zu du zhu chan sheng de kong ban yu yuan du zhu chan sheng de kong ban shao xiao ;r GXLB-2015-△gI/gE-EGFP bi yuan du zhu GXLB-2015de fu zhi fan shi neng li shao di ,rGXGG-2016-ΔgI/gE-EGFPze xian shi chu ming xian geng di de sheng chang te xing ,gI/gEshuang ji yin que shi bing ju biao da EGFPhou ,rGXGG-2016-Δ gI/gE-EGFP bi GXGG-2016geng chi cai chu xian di du de kuai su zeng jia ,er r GXLB-2015-△gI/gE-EGFPze bi GXLB-2015geng zao de kuai su zeng jia bing du de di du ;rGXGG-2016-Δ gI/gE-EGFPyu GXGG-2016 yi yang dui xiao shu mei you zhi bing xing ,er r GXLB-2015-Δ gI/gE-EGFPze ju you bi GXLB-2015geng di de ban shu zhi si liang ,dan kai shi fa bing de shi jian jiao chang ,bing zheng geng qing ,bing cheng geng chang 。ben shi yan chu bu le jie le gI/gEshuang ji yin que shi bing biao da EGFPdui GXLB-2015he GXGG-2016de sheng chang te xing de ying xiang ,wei hou ji gI/gEshuang ji yin que shi du zhu de gou jian di gong yi ding de can kao ,bing wei yi ji wei zai ti biao da ji ta bing du de dan bai da xia ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自广西大学的许力士，发表于刊物广西大学2019-10-14论文，是一篇关于伪狂犬病病毒论文,同源重组论文,基因论文,基因缺失论文,广西大学2019-10-14论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自广西大学2019-10-14论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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