淡水水产品中微囊藻毒素的分析

论文摘要

近年来随着淡水湖泊污染的加剧和全球气温变暖的影响,蓝藻水华发生的规模和频率日趋严重。水华过程中释放的有毒微囊藻毒素（Microcystin,MCs）,具有强烈的促癌作用,不仅威胁到饮用水安全,还会在水产品内富集,威胁人类健康。建立一种有效实用的监测Microcystin LR（MC-LR）的方法用于评价其对人类健康潜在危害非常重要。本论文主要研究大孔吸附树脂分离纯化MCs的过程以及建立固相萃取-反相高效液相色谱法分析水产品中MC-LR的方法。具体内容如下:1.以5%醋酸为提取剂从滇池有毒蓝藻中提取了MCs,经磁力搅拌、离心、过滤后得到MCs粗提液。此粗提液先后2次通过筛选后的大孔吸附树脂D101,用不同浓度的乙醇-水溶液洗脱后,分别获得纯度为82.6%、82.1%、62.5%的MC-RR、MC-YR和MC-LR。另外,条件实验结果表明:烘干为最佳干燥方法;pH值=3时D101对MCs的吸附性能最佳。实验建立了一种安全、高效、低成本的分离纯化MCs的方法。2.实验建立固相萃取-反相高效液相色谱法分析水产品中MC-LR的方法。以含MC-LR的水产品为对象,对水产品前处理条件进行优化,确定了85%甲醇为最佳提取试剂,25℃恒温振荡1h为最佳提取方式和时间。使用C18小柱固相萃取,C18反相柱（4.6mm×250mm,5μm）,30%乙腈（含0.1%甲酸）、50%乙腈（含0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,紫外检测器（238nm）检测,测定水产品中微囊藻毒素LR。加标回收实验表明,回收率随着添加量（0.17μg/g～3.33μg/g）的增加而增大（70%～80%）,方法的RSDs<5%,具有高稳定性。回收率研究同时表明,将洗脱液吹干后定容的回收率在35%～60%之间,远低于氮吹至溶液体积略小于1mL后直接定容的回收率（70%～80%）。进样量在0.25～10μg/mL范围内呈良好的线性,相关系数为0.9999,方法检出限6.7ng/g。该分析方法的建立为分析水产品中MC-LR提供了一个快速、简单的检测方法,易于应用和推广。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 研究背景
• 1.2 国内外研究进展
• 1.3 课题主要研究内容
• 第二章 大孔吸附树脂分离纯化微囊藻毒素的研究
• 2.1 前言
• 2.2 材料和方法
• 2.2.1 实验仪器与材料
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 干燥方式的选择
• 2.3.2 提取
• 2.3.3 树脂的筛选
• 2.3.4 pH 值对吸附效果的影响
• 2.3.5 洗脱液浓度的选择
• 2.3.6 分步收集
• 2.4 小结
• 第三章 固相萃取-高效液相色谱法分析水产品中微囊藻毒素-LR
• 3.1 前言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 主要试剂和仪器
• 3.2.2 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 样品
• 3.3.2 前处理
• 3.3.3 回收率实验
• 3.3.4 系统适应性
• 3.3.5 线形范围
• 3.4 应用
• 3.5 MC 风险评价
• 总结
• 致谢
• 参考文献
• 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文