A型肉毒毒素对大鼠化学性内脏损伤的止痛作用

论文摘要

【背景与目的】：A型肉毒毒素（BTX-A）目前已广泛应用于肌肉活动过度性疾病的治疗，近年来，BTX-A在疼痛治疗中有了突破性进展，除了用于缓解由于肌肉痉挛的各种疼痛，目前已成功用于治疗头痛，肌筋膜痛综合症，顽固性三叉神经痛，间质性膀胱炎，足底筋膜炎，慢性腰背痛，慢性前列腺痛等。而BTX-A阻断神经肌肉接头乙酰胆碱的释放，松弛肌肉的作用不能完全解释其止痛效应，因此认为BTX-A的抗伤害性感受作用尚存在更为复杂的机制。一些躯体痛和内脏痛的动物模型研究表明，BTX-A能抑制外周感觉神经末梢谷氨酸和神经肽类（如P物质，降钙素基因相关肽）等神经递质的释放，减少脊髓背角神经元c-fos的表达，减少伤害性刺激向中枢神经系统传导。本研究通过复制大鼠化学性内脏损伤的疼痛模型，观察BTX-A对疼痛行为学的影响和对外周神经递质，细胞因子等表达的影响，对其可能的止痛效应和作用机制进行初步探索，为BTX-A的深入研究及更广泛的临床应用提供新视角。【方法】：出生8周Wistar雄性大鼠96只，随机分为4组，A组腹腔注射生理盐水2mL。B、C、D组腹腔分别注射含2U、4U、6U BTX-A的生理盐水2mL。4周时各组随机取6只应用结直肠内气囊扩张的方法测定结直肠痛阈的改变。其余大鼠分别于注射BTX-A后1周、4周、8周各组随机取6只，腹腔内注射乙酸（2％，3 ml／kg），观察大鼠扭体反应45min，并进行行为学评分和比较。应用放射免疫法测定血清IL-6和TNF的含量，取大鼠小肠、大肠标本，行苏木素伊红染色及肠壁AChE、SP、CGRP免疫组织化学半定量分析，评价BTX-A对细胞因子和外周神经递质的影响。免疫组化结果用彩色病理图像分析系统image-pro plus 5.0进行半定量分析。计量资料采用SPSS11.5统计软件处理，P＜0.05为差异有统计学意义。【结果】给药后4周B组、C组、D组大鼠结直肠痛阈与A组结果无明显差异。1周时，大鼠扭体反应45分钟内总的疼痛积分B组与对照组无统计学差异，C组，D组均少于对照组（P＜0.05）；D组血清TNF较A组明显减少（P＜0.05），B，C组血清TNF及B、C、D组IL-6与A组相比无明显差异，；BTX-A预处理组肠壁肌层AChE表达均小于A组（P＜0.05），B组肠壁粘膜层SP表达较A组明显减少（P＜0.05），肠壁肌层SP阳性面积及肠壁CGRP表达与A组比较无显著差异，C、D组肠壁SP及CGRP表达均较A组明显减少（P＜0.05）。4周时，B，C，D组大鼠在各个时间段疼痛积分及总的疼痛积分与对照组相比均明显减少（P＜0.05）；C，D组血清TNF及D组IL-6较A组明显减少（P＜0.05）；B，C，D组肠壁AChE、SP、CGRP表达均明显小于A组（P＜0.05）。8周时，B，C，D组大鼠各个时间段疼痛积分与对照组无明显差别，总的疼痛积分C组与A组相比减少有统计学意义，B，D组与A组相比仍无差异；各BTX-A预处理组血清IL-6，TNF及肠壁SP、CGRP表达与A组相比均无差异，但肠壁AChE表达仍小于A组（P＜0.05）。【结论】腹腔注射A型肉毒毒素后1周和4周能减轻大鼠由乙酸所致化学性内脏损伤的疼痛行为学反应，减少血清细胞因子TNF的释放，减少肠壁AchE，SP和CGRP的表达。8周时，除能减少肠壁AChE的表达，其他上述作用均未观察到。因此，推测BTX-A通过减少肠道AChE，SP，CGRP等兴奋性神经递质的表达，减轻炎性反应，缓解大鼠乙酸所致的内脏痛。但BTX-A在其他内脏痛模型中的作用及机制尚需进一步研究，为BTX-A在疼痛中的治疗开拓新的思路。

论文目录

• 英中文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一部分
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 5. 小结
• 第二部分
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 5. 小结
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 学习期间发表的文章
• 致谢