论文摘要
轮状病毒（Rotavirus，RV）属于呼肠孤病毒科（Reoviridae）轮状病毒属，是引起婴幼儿急性胃肠炎最常见的病毒病原，每年全世界因RV感染从而导致约1.25亿婴幼儿腹泻和90万婴幼儿死亡，其中大多数发生在发展中国家。RV引起的腹泻至今尚无特效药物进行治疗，只能对症进行补液纠治，所以预防就显得特别重要。而疫苗预防又是最有效的方法，因此发展RV疫苗成为当今世界卫生组织疫苗发展计划的首要任务之一。RV的外壳结构蛋白VP4、VP7具有中和抗原活性，能刺激机体产生中和抗体，根据VP7、VP4蛋白的差异，RV可分为不同的G、P基因型。RV的基因型会随着区域的不同而不同，即使同一区域的RV，其基因型会随着时间的不同而不同。因此，为了研制合适的RV疫苗，必须开展对当地RV基因型的监测。本研究即对武汉地区2005～2006年的A组轮状病毒的G、P基因型进行分析，以期为轮状病毒的防治及研制适合武汉地区的疫苗提供实验依据。具体研究内容如下：第一节综述了轮状病毒的蛋白质功能，流行病学研究，临床表现，主要血清型及变化，发病机理，治疗和预防，实验室诊断以及RV疫苗研究的现状和展望。第二节利用PAGE检测了武汉地区收集的腹泻儿童粪便标本，初步分析了武汉地区腹泻儿童中RV的区域，时间和人群分布；发现男女宿主间的发病率无显著性差别，在不同年龄组的宿主中RV的阳性率存在明显差异，6月～1岁年龄组的阳性率最高。第三节利用多重RT-PCR对武汉地区2005～2006年A组轮状病毒G基因型构成进行研究，发现武汉地区A组轮状病毒性腹泻是以G3（66.2％）型为主，其次是G1（20.5％）型，G1／G3混合型占8％。第四节利用多重巢式RT-PCR对武汉地区2005～2006年A组轮状病毒P基因型构成进行研究，结果显示武汉市A组轮状病毒由P[4]、P[8]基因型构成，以P[8]基因型为主，占94.35％，而P[4]仅占1.32％，未能P基因分型的占1.51％。第五节分析武汉地区A组轮状病毒G、P基因型组合，武汉地区2005～2006年A组轮状病毒G型和P型的组合是以G3P[8]、G1P[8]为主。与2002～2003年相比，G3P[8]型比率下降，从原来的80.79％降到66.2％；G1P[8]型比率上升，从1.32％升到20.5％。第六节对部分未能G基因分型的GARV样品，通过RT-PCR扩增其vp7基因，对其序列进行分析，首次在武汉发现G9型GARV。第七节对部分未能P基因分型的GARV样品，通过RT-PCR扩增其vp4基因片段，对其序列进行分析，发现与其它A组轮状病毒P基因型有一定距离。G3P[8]型比率下，G1P[8]型比率上升，提示我们，武汉地区的RV基因组成结构有一定的改变；检测到的G9型RV提示我们，武汉已经开始有G9型的RV；而与其它A组轮状病毒P基因型有一定距离的病毒株说明此病毒株的基因变异；这些结果提示我们，A组轮状病毒VP7、VP4基因在自然状态下已经发生变异，随着变异的加大，人群原来建立的抗体保护屏障对A组轮状病毒的抵御作用将削弱，存在A组轮状病毒在人群中爆发流行的可能，我们要加大监测的力度，为轮状病毒的防治及研制适合武汉地区的疫苗提供实验依据。
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