论文摘要
目的：制备并评估新生儿坏死性小肠结肠炎（Necrotizing enterocolitis, NEC）新生大鼠肠道损伤后自我修复的模型。观察新生大鼠NEC模型中肠道损伤修复过程中第10染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN）、肠道干细胞标记物富含亮氨酸的G蛋白偶联受体（eucine-rich-repeat-containing G-protein-coupled receptor 5, Lgr5）和肠道损伤修复过程中的重要因子β-连环蛋白（cadherin associated protein beta, P-catenin）的变化,探讨PTEN、Lgr5和β-catenin在肠道缺血损伤与自我修复中的可能作用,为进一步研究NEC发病机制、可能的治疗方向提供思路。第一部分制备与评估NEC肠道损伤后自我修复的新生鼠模型方法：30只新生大鼠随机分为对照组15只（A组）和实验组15只（B组）。实验组在生后第1d起给予缺氧和冷刺激,连续3d,再分别于停止缺氧和冷刺激后24h、72h和120h脱臼处死,分为B1、B2和B3组,每组5只。对照组未予缺氧和冷刺激,同时间段处死,分为A1、A2和A3组,每组5只。于实验前和实验第4d分别测量两组新生鼠体重,观察体重变化情况。记录实验组制模过程中新生鼠对刺激的反应,有无腹胀、胃潴留、活动度下降等情况。处死后取新生鼠肠道组织标本,H.E.染色,Nadler评分标准评估模型中新生鼠肠道粘膜损伤与修复情况。结果：1.实验组新生鼠给予缺氧和冷刺激后相继出现不同程度的活动下降,进奶量减少,轻到中度的腹泻,可见明显的腹胀和胃潴留,且在给予刺激的3d内渐有加重,而在停止刺激后72h和120h症状又逐渐消失。2.实验组在缺氧和冷刺激后体重增加量明显低于对照组,P<0.05,有统计学意义。3.大体解剖时发现,对照组新生鼠肠壁色泽红润、弹性好；而实验组B1组部分肠段可见水肿、增厚及明显的出血点；而B2和B3组肠壁色泽又趋于基本正常。4.H.E.染色可见对照组回盲部绒毛结构完整、粘膜完好、上皮完整、连续、腺体排列规则、组织结构清楚、分泌功能活跃、固有层血管无扩张,肌层无异常,无炎性细胞浸润及溃疡。实验组B1组肠粘膜和粘膜下层充血、水肿,固有层较多炎症细胞浸润,Nadler病理组织评分均在2-3级之间。B2和B3两组肠粘膜损伤较B1组减轻,少量粘膜脱落,少量炎症细胞浸润,Nadler病理组织评分均在1-2级之间。第二部分PTEN、Lgr5和β-catenin在NEC肠道损伤修复中的变化观察方法：制备和评估NEC肠道损伤与自我修复的新生鼠模型后,在实验组停止缺氧和冷刺激后24h、72h和120h,分别获取不同组新生鼠末端回肠组织,利用Realtime PCR方法,测定组织匀浆中PTEN、Lgr5和β-catenin mRNA的表达水平。观察肠道损伤后自我修复过程中PTEN、Lgr5和β-catenin的变化,分析三者之间的关系,探讨三者可能的作用。结果：1.实验组与对照组相比,在停止缺氧和冷刺激后24h时,PTEN、Lgr5和β-catenin mRNA表达水平明显升高,有显著性差异（P=0.013；P=0.047；P=0.020）,具有统计学意义。2.停止缺氧和冷刺激后72h和120h时,实验组与对照组相比,PTEN.Lgr5和P-catenin mRNA表达水平不具显著性差异（P=0.630,P=0.864；P=0.481,P=0.353；P=0.472,P=0.259）,无统计学意义。3.实验组PTEN、Lgr5、β-catenin三者在24h时的表达水平无明显差异（P=0.053；P=0.105；P=0.681）,无统计学意义。4.实验组PTEN、Lgr5和β-catenin mRNA表达水平在24h时与72h和120h相比显著升高（P=0.002,P=0.001；P=0.011,P=0.001；P=0.030,P=0.006）,有统计学意义。5.实验组PTEN、Lgr5和β-catenin mRNA表达水平在72h与120h相比差异不大（P=0.941；P=0.525；P=0.746）,无统计学意义。结论：1、6%O2的N2,4℃冷刺激,成功制备新生大鼠NEC肠道损伤修复模型。2、NEC模型后24h,肠道损伤期,PTEN、Lgr5和β-catenin mRNA表达水平明显增加,显著高于对照组。3、NEC模型后72h与120h,肠道修复期,PTEN、Lgr5和β-catenin mRNA表达水平较24h明显下降,与对照组比较,无显著差异。4、肠道损伤期,β-catenin表达水平增加,可能与促进干细胞增殖有关。5、PTEN负性调节β-catenin活性,可能在平衡干细胞增殖速度和数量上起到一定作用。
论文目录
相关论文文献
- [1].胃癌组织中LGR5、HIF-1α的表达与临床意义[J]. 肿瘤药学 2020(04)
- [2].LGR5在子宫内膜癌中的表达及其意义[J]. 实用妇产科杂志 2017(02)
- [3].Lgr5与胃癌发生关系的研究进展[J]. 医药论坛杂志 2016(12)
- [4].子宫颈鳞状细胞癌中Lgr5的表达及其临床意义[J]. 临床与实验病理学杂志 2017(01)
- [5].Lgr5与胃癌关系的研究进展[J]. 胃肠病学和肝病学杂志 2015(02)
- [6].LGR5启动子甲基化在胃癌中的表达[J]. 安徽医科大学学报 2019(12)
- [7].应用组织芯片技术检测胃癌组织中Lgr5和CD44的表达[J]. 中国肿瘤外科杂志 2015(06)
- [8].LGR5在肝癌细胞及肝癌组织中的表达及意义[J]. 解剖学报 2011(06)
- [9].Lgr5与结肠癌关系的研究进展[J]. 世界华人消化杂志 2013(08)
- [10].Lgr5在慢性浅表性胃炎中的表达[J]. 中国病理生理杂志 2014(12)
- [11].Lgr5和Ki-67蛋白在胃癌组织中的表达研究[J]. 中国普外基础与临床杂志 2019(11)
- [12].结直肠癌Lgr5表达对患者预后的影响[J]. 现代消化及介入诊疗 2010(05)
- [13].Lgr5蛋白和E-钙黏蛋白在胃癌组织中表达的研究[J]. 中国普外基础与临床杂志 2020(03)
- [14].直肠癌新辅助放化疗前后LGR5基因表达的变化及其与疗效的关系[J]. 癌变·畸变·突变 2017(01)
- [15].Lgr5蛋白激活树突状细胞诱导抗原特异性细胞毒T淋巴细胞治疗结肠癌的实验[J]. 解剖学报 2017(04)
- [16].Lgr5在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与预后的相关性[J]. 临床与实验病理学杂志 2016(03)
- [17].胃腺癌中Lgr5与Ki67的表达及临床意义[J]. 江西医药 2020(07)
- [18].CD24和Lgr5在结直肠息肉及结直肠癌中的表达分析[J]. 临床和实验医学杂志 2016(11)
- [19].Lgr5蛋白和Her-2蛋白在结肠癌中的表达及其临床意义[J]. 现代医学 2017(01)
- [20].Lgr5表达及Kras突变与结直肠癌临床病理特征的相关性研究[J]. 实用癌症杂志 2017(06)
- [21].AGR2和Lgr5在结直肠癌中表达及其与临床病理特征的关系[J]. 社区医学杂志 2016(09)
- [22].口腔鳞状细胞癌组织中VASH-1、LGR5的表达及相关性分析[J]. 局解手术学杂志 2019(07)
- [23].姜黄素、氯丙胺对人结肠癌肿瘤样干细胞CD44、Lgr5表达的作用[J]. 世界华人消化杂志 2016(09)
- [24].雷帕霉素靶蛋白和p70S6激酶及Lgr5蛋白在胃癌组织中的表达及相关性[J]. 中华实用诊断与治疗杂志 2017(05)
- [25].β-Catenin和Lgr5基因在先天性巨结肠中的表达[J]. 江苏医药 2014(14)
- [26].LGR5在宫颈癌发生中的作用及机制初探[J]. 河北医学 2017(09)
- [27].Lgr5、β-catenin蛋白在结直肠癌中的表达及意义[J]. 科技视界 2016(08)
- [28].干细胞标记物Lgr5在胃癌组织中的表达及临床意义[J]. 中华普通外科学文献(电子版) 2016(06)
- [29].Lgr5、VEGF及VEGFR-2在结直肠癌中的表达及其临床意义[J]. 现代中西医结合杂志 2017(12)
- [30].Lgr5基因在新疆维、汉族Ⅱ-Ⅲ期直肠癌组织中的表达及意义[J]. 现代肿瘤医学 2017(21)
标签：新生儿坏死性小肠结肠炎论文; 新生大鼠模型论文; 肠道干细胞增殖论文;