论文题目: 朱鹮消化道正常菌群的分离鉴定及微生态制剂的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 预防兽医学
作者: 史怀平
导师: 杨增岐
关键词: 朱鹮,正常菌群,分离鉴定,微生态制剂,海藻酸钠
文献来源: 西北农林科技大学
发表年度: 2005
论文摘要: 无菌采集健康朱鹮的新鲜粪便,分别接种于普通肉汤和厌氧肉肝汤内,37 ℃培养24~48 h。将液体培养物稀释到同一梯度,定量接种于固体培养基上(绵羊血琼脂平板和特殊培养基),分别进行需氧和厌氧培养24~48 h。根据培养基上的不同类细菌进行划线分离挑纯,直到分离出纯培养物,并且进行显微镜观察,初步确定了G~+ 芽胞杆菌、G~+ 无芽胞杆菌、G+ 球菌及G- 杆菌。然后分别对纯培养物进行生化试验,包括需氧性鉴定、淀粉液化能力、MR 与VP、O/F 测定、接触酶试验、明胶试验、硝酸盐还原试验、吲哚试验、糖醇发酵试验、丙二酸盐和柠檬酸盐利用试验、苯丙氨酸试验、运动性监测、嗜盐性试验、耐酸性试验等,结果从朱鹮粪便中分离鉴定了22 种细菌,依次为两歧双歧杆菌、最小双歧杆菌、口乳杆菌、短乳杆菌、面包乳杆菌、马里乳杆菌、瑞士乳杆菌、嗜酸乳杆菌、丙酸丙酸杆菌、蜡状芽胞杆菌、环状芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌、泛酸芽胞杆菌、粪肠球菌、类肠膜明串球菌、少酸链球菌、肠膜链球菌、乳链球菌、克雷伯菌属、柠檬酸菌属、变形菌属和粪拟杆菌。对其中的9 种乳酸菌进行抑制大肠杆菌试验,发现两歧双歧杆菌、最小双歧杆菌、马里乳杆菌、瑞士乳杆菌及乳酸链球菌对大肠杆菌有明显的抑制作用,其中最小双歧杆菌抑菌效果最好,可适合选做微生态制剂的菌种。在定性试验中,48 h后最小双歧杆菌对大肠杆菌出现明显的抑制现象;在定量试验中,最小双歧杆菌代谢物对大肠杆菌抑制趋势一直递增,大肠杆菌原初浓度为2.25×10~8 cfu/ ml,在36 h后大肠杆菌浓度低于5×10~5 cfu/ ml。通过对所有分离菌株进行动物致病性试验,结果表明环状芽胞杆菌、泛酸芽胞杆菌和一株未定球菌对动物有致病性,其他分离菌对动物无明显的致病性。选择增殖培养基培养最小双歧杆菌和两歧双歧杆菌,确定改良肉汤是朱鹮双歧杆菌良好的培养基。药敏试验中两歧双歧杆菌和最小双歧杆菌均对头胞唑啉、红霉素、链霉素、四环素、丁胺卡那霉素和卡那霉素敏感,对青霉素和氨苄青霉素等具有耐药性。另外,对两歧双歧杆菌和最小双歧杆菌进行了耐温驯化,结果表明两株朱鹮双歧杆菌在牛乳培养基中增殖很快,凝乳时间随温度上升明显缩短,在42 ℃时凝乳时间缩短至3~ 5 h。 在制作微生态制剂时,本试验选用最小双歧杆菌作为菌种,改良肉汤为增殖培养基,海藻酸钠作为胶囊化载体,玉米淀粉作为保护剂。通过增殖培养最小双歧杆菌,菌液离心,浓度测定,在超净工作台上制备出了微胶囊。微胶囊棕褐色,颗粒状,直径在0.5~1.0mm。通过质量检测结果表明,该微胶囊包埋效率为64.05%,包埋产率为50.6%,活菌数达到8.6×1011 cfu/ g;能抵抗胃酸;在人工肠液中肠溶性很好,45 min 基本全部溶解,释放细菌几率为94.5%;贮存稳定性良好,在4 ℃冰箱中保存90 d 后测定,
论文目录:
中文摘要
英文摘要
第一章 文献综述
1. 朱鹮的保护与研究
1.1 朱鹮的历史与现状
1.2 朱鹮的保护
1.3 朱鹮的研究概况
2. 动物微生态制剂研究进展
2.1 研究简况
2.2 动物微生态制剂的作用机理及作用
2.3 动物微生态制剂的菌种
2.4 动物微生态制剂的分类
2.5 动物微生态制剂的生产工艺
2.6 微生态制剂的临床使用
2.7 我国微生态制剂的研究开发现状
3. 微胶囊制剂的研究
3.1 制备微胶囊的材料
3.2 微胶囊化的方法
3.3 微胶囊化产品的评价
3.4 前景
4. 本实验的研究目的
第二章 健康朱鹮消化道正常菌群的分离与鉴定
1. 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2. 结果
2.1 根据菌落形态和染色镜检初步确定的细菌种类
2.2 细菌鉴定结果
2.3 优势菌株及特殊培养基上分离出的菌株生长表现
2.4 乳酸菌抑制大肠杆菌试验结果
2.5 动物致病性试验结果
3. 讨论
第三章 双歧杆菌的培养特性研究
1. 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2. 结果
2.1 细菌生长表现
2.2 药敏试验结果
2.3 驯化结果
3. 讨论
第四章 微生态制剂研究及应用
1. 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2. 结果
2.1 菌液浓度测定的结果
2.2 微胶囊的粒度
2.3 包埋率的测定结果
2.4 包埋产率结果
2.5 耐胃酸性试验结果
2.6 肠溶性试验结果
2.7 微胶囊崩解性的测试结果
2.8 贮藏稳定性观察结果
2.9 朱鹮大肠杆菌感染用量选择结果
2.10 动物安全性试验结果
2.11 朱鹮试验结果
3. 讨论
结论
致谢
参考文献
附录
作者简介
发布时间: 2005-12-22
参考文献
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