人Era结合蛋白及人era基因启动子的研究

论文摘要

era基因是1986年测定大肠杆菌基因组序列时发现的1个开放读框。后来研究表明,其广泛分布于生物界。Era蛋白的N端是一个鸟苷酸结合蛋白结构域,属于G蛋白家族,其C端含有1个RNA结合功能结构域—KH结构域,这种独特的C端使Era蛋白有别于其他所有G蛋白而独立成为一个新的G蛋白亚家族。大肠杆菌的era属于rnc操纵元的1个细菌生存必需的基因,Era可特异地与16S的rRNA结合并参与细胞周期的调控。 本研究工作分为两部分,1.对人Era候选结合蛋白A19进行了生物信息学分析和相互作用验证。2.对人era基因上游启动子进行了分析和验证。 吴元明博士利用酵母双杂交技术筛选出可以和hEra结合的15种候选阳性的蛋白,其中以A19的阳性程度显著,为了探索era基因功能,对Era候选结合蛋白A19的理化性质和全长进行了生物信息学分析。a19的核酸序列定位于基因组19号染色体短臂13区3带。推测A19蛋白可能是一个可溶性的细胞外分泌蛋白,具有核输出信号,PFAM分析序列中

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 第一部分 hEra结合蛋白A19的验证
• 引言
• 实验一 A19的生物信息学分析
• 1.1 材料和方法
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 方法
• 1.2 结果
• 1.3 小结
• 实验二 A19与hEra截短体的GSTpulldown验证
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果
• 2.3 小结
• 实验三 抗A19蛋白抗体的制备
• 3.1 材料和方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果
• 3.3 小结
• 实验四 A19蛋白与hEra截短体的免疫共沉淀
• 4.1 材料和方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果
• 4.3 小结
• 第一部分 讨论
• 第二部分 era上游启动子序列的研究
• 引言
• 实验一 era上游序列的生物信息学分析
• 1.1 材料和方法
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 方法
• 1.2 结果
• 1.3 小结
• 实验二 era基因上游序列的扩增
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果
• 2.3 小结
• 实验三 era启动子报告基因载体的构建及表达
• 3.1 材料和方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果
• 3.3 小结
• 第二部分 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 附录
• A19基因及对应氨基酸序列
• era上游序列
• 转录因子结合预测结果
• 个人简历
• 致谢