烤瓷冠基底合金影响人牙龈成纤维细胞MMP-2、MMP-13表达的实验研究

论文摘要

目的金属烤瓷冠既具有金属冠的强度又具有全瓷冠的美观效果，在临床应用中受到了医生和患者的普遍欢迎。但是近年随着金属烤瓷冠修复体的广泛应用，也逐渐暴露出了一些问题，患者戴用修复体一段时间后会出现牙龈萎缩、牙龈出血、龈缘灰染等问题。本实验的目的在于探讨镍铬合金、钴铬合金，纯钛，金钯合金浸提液对体外培养的人牙龈成纤维细胞分泌MMP-2、MMP-13的影响。从而，探索基质金属蛋白酶对人牙龈成纤维细胞的作用机制，为临床烤瓷冠基底合金的选择提供实验依据。方法1.用改良组织块法培养人牙龈成纤维细胞，用第三代人牙龈成纤维细胞进行免疫荧光法鉴定细胞的来源。2.制备直径为5.5mm，高2.4mm的圆柱体合金，经过处理后浸泡于DMEM培养液中，十四天之后收集合金的浸提液。3.用第五代细胞制成3×104/ml的单细胞悬液，每孔300ul均匀接种于48孔板待细胞贴壁后弃原培养液，实验组加入合金浸提液，对照组加入含10%胎牛血清的DMEM培养液处理。分别在1h、6h、12h、24h收集细胞上清液，用ELISA试剂盒进行人牙龈成纤维细胞分泌MMP-2、MMP-13的检测。4.同样取第五代细胞制成3×104/ml的细胞悬液接种于24孔板内盖玻片上，待细胞贴壁后弃原培养液。实验组加入合金浸提液，对照组加入含10%胎牛血清的DMEM培养液。12小时后收集人牙龈成纤维细胞爬片，福尔马林固定，用免疫荧光法检测MMP-2、MMP-13在人牙龈成纤维细胞中的表达。结果1．采用改良组织块法体外成功培养了人牙龈成纤维细胞，免疫荧光法及绘制生长曲线证实了细胞符合来源于中胚层的成纤维细胞特点。2.经酶联免疫吸附试验检测结果显示：镍铬合金和钴铬合金组与对照组比较差异有统计学意义；纯钛和金钯合金组与对照组比较差异无统计学意义；镍铬合金、钴铬合金组分别与纯钛和金钯合金组比较差异有统计学意义；镍铬合金组与钴铬合金组比较差异无统计学意义。3．细胞免疫荧光法观察人牙龈成纤维细胞在金属浸提液的刺激下镍铬合金、钴铬合金组MMP-2、MMP-13表达染色深，与对照组比较染色明显加深；纯钛、金钯合金组与对照组比较染色程度没有明显的区别。结论1.体外成功的培养了人牙龈成纤维细胞，采用改良组织块法较单纯的组织块法更具有优势。2.镍铬合金、钴铬合金浸提液可以显著的提高人牙龈成纤维细胞MMP-2、MMP-13的表达水平。3.纯钛、金钯合金浸提液对人牙龈成纤维细胞MMP-2、MMP-13的表达影响不明显。4．金属浸提液影响人牙龈成纤维细胞基质金属蛋白酶表达作用机制的探索为临床烤瓷冠基底合金的选择提供了一定的实验依据。

论文目录

• 中文论著摘要
• 英文论著摘要
• 英文略缩语表
• 前言
• 实验材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 本研究的创新性自我评价
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 在校期间科研成绩
• 致谢
• 个人简历