包埋—脱水法常温和低温保存条斑紫菜自由丝状体

论文摘要

植物种质资源多样性是维持生态平衡的重要前提,直接关系到农业发展的方向和人类生存。但是20世纪以来,植物种质资源多样性不断遭到破坏,而且数量巨大。因此,如何保存现有植物种质不再受破坏,已成为全球关注的课题。作为植物的一部分,藻类种质的保存同样有着重要的意义。在自然界中,已经被人们认识的藻类大约有三万七千种。它们在国民生产中具有重要的经济价值。藻类不但可以食用还可以作为海产养殖的饵料、农业生产的肥料、工业和医药原料。本文以条斑紫菜（Porphya yezoensis Ueda 03B）自由丝状体为试验材料,用包埋脱水法分别研究了常温和低温保存。将丝状体包埋在含有30‰氯化钠的3%的褐藻酸钙胶球中,经硅胶吸湿法脱水后,在常温和低温处进行保存。探讨了温度、光（暗）、含水量等因素对存活率的影响。结果表明:1.温度对存活率的影响胶球保存数月后,在4℃条件下保存后的丝状体存活率最高,保存18个月后仍可高达51.6%;20℃保存的丝状体6个月后存活率还可以达到42.8%,但是随着保存时间的延长急剧降低;而-30℃温度下的丝状体存活率最低,未经保护剂处理的保存12个月后存活率最高只有9.3%.2.甘油对存活率的影响在-30℃的条件下,经过甘油处理的胶球的存活率明显要高于未处理的胶球,经过甘油处理的胶球经过12个月后存活率最高可达53.4%。3.含水量对存活率的影响20℃以及4℃弱光的条件下丝状体的存活率都是随着含水量的降低而降低,而在20℃黑暗以及-30℃条件下,存活率都是随着含水量的降低而升高,并且随着含水量的不同,在相同的保存时间后,存活率差异明显。4.光照对存活率的影响丝状体在黑暗下丝状体的存活率要高于弱光下的存活率,其中以4℃条件下最为明显,并且弱光条件下的存活率随着时间的延长降低的更快。5.丝状体保存后的生长曲线和形态通过测定保存后丝状体的生长曲线,可以发现与保存前的生长曲线相比,区别不是很大。在显微镜下观察丝状体的形态,与保存前相比,也未发现差别。包埋-脱水法操作简单,无需贵重设备,并且保存后的存活率比较高,在4℃（暗）条件下保存的丝状体18个月后存活率仍达到51.6%,因此该法在藻类种质保存中有广阔的应用前景。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 植物和藻类种质保存技术的研究综述
• 1.1 低温生物学
• 1.1.1 低温生物学的定义和范畴
• 1.1.2 低温生物学的发展
• 1.1.3 低温技术在生物材料保存中的应用
• 1.2 植物种质保存技术
• 1.2.1 植物种质保存的目的和意义
• 1.2.2 种子保存技术
• 1.2.2.1 种子干燥低温保存技术
• 1.2.2.2 超低温保存技术
• 1.2.3 植物材料的离体培养保存技术
• 1.3 藻类种质保存技术
• 1.3.1 藻类种质保存的目的和意义
• 1.3.2 藻类种质保存的主要方法概述
• 1.3.3 继代培养法
• 1.3.4 干燥保存法
• 1.3.4.1干燥方法及应用
• 1.3.4.2 藻类抗氧化酶系统对干燥胁迫的影响
• 1.3.4.3 海藻糖与水分置换假说
• 1.3.4.4 胞外多糖（EPS）与玻璃体
• 1.3.5 超低温保存法
• 1.3.5.1 藻类超低温保存的的主要方法
• 1.3.5.1.1 快速冷冻法
• 1.3.5.1.2 控速降温法
• 1.3.5.1.3 玻璃化法
• 1.3.5.1.4 包埋脱水法
• 1.3.5.1.5 包埋-玻璃化法
• 1.3.6 固定化（包埋）法常温和低温保存技术
• 1.3.6.1 包埋法固定化细胞技术-海藻酸钠包埋法
• 1.3.6.1.1 包埋载体的性能比较
• 1.3.6.1.2 海藻酸钠包埋法中影响细胞活性的各主要因素分析
• 1.3.6.1.2.1 海藻酸钠对细胞活性的影响
• 2浓度对细胞活性的影响'>1.3.6.1.2.2 CaCl₂浓度对细胞活性的影响
• 1.3.6.1.2.3 交联时间对细胞活性的影响
• 1.3.6.1.2.4 凝胶小球的直径对细胞活性的影响
• 1.3.6.2 包埋法应用于藻类常温和低温保存的研究
• 1.3.7 包埋-脱水法常温和低温保存法
• 1.3.7.1 包埋法固定藻细胞
• 1.3.7.2 脱水处理
• 1.3.7.3 抗冻保护剂
• 1.3.7.4 存活率的鉴定
• 第二章 包埋脱水法常温和低温保存条斑紫菜自由丝状体的研究
• 前言
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料及其培养
• 2.1.2 主要试剂及配制
• 2.1.3 主要仪器设备
• 2.1.4 实验方法
• 2.1.4.1 包埋
• 2.1.4.2 脱水及含水量的测定
• 2.1.4.3 保护剂（甘油）处理
• 2.1.4.4 保存
• 2.1.4.5 保存后的恢复和培养
• 2.1.4.6 存活率的测定
• 2.1.4.7 生长曲线和生长速率测定
• 2.1.4.8 保存前后丝状体形态观察比较
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 温度对存活率的影响
• 2.2.2 光（暗）对存活率的影响
• 2.2.3 含水量对存活率的影响
• 2.2.4 保护剂（甘油）对存活率的影响
• 2.2.5 保存前后的生长曲线和生长速率
• 2.2.6 保存前后条斑紫菜自由丝状体形态的比较
• 2.3 讨论
• 2.4 结论
• 参考文献
• 致谢