拟南芥AtDAD1超量表达植株对H2O2抗性的研究

拟南芥AtDAD1超量表达植株对H2O2抗性的研究

论文摘要

细胞程序性死亡(Programmed Cell Death,PCD)对于维持生物体的正常生长发育有着非常重要的作用,目前已经成为生物学研究的又一新热点。高等植物PCD的研究虽然滞后于动物PCD,但也取得了很大的成绩。近年来,植物PCD在形态学、生物化学、基因调控、信号转导等方面取得了一定研究成果。拟南芥作为模式植物在植物学研究领域有着不可替代的重要地位。DAD1(Defender against Apoptotic Death1)是一个高度保守的凋亡抑制基因,最早发现于仓鼠中,在其他脊椎动物如人类、老鼠等,以及无脊椎动物,如非洲爪蟾、线虫都已发现DAD1的同源基因。目前已经在拟南芥、水稻、玉米、豌豆、大麦、柑橘、苹果、番茄等植物中分离到DAD1的同源基因,但对其功能的研究还未深入探讨。拟南芥中DAD1的同源基因AtDAD1(Arabidopsis thaliana Defender against Apoptotic Death1)具有345个核苷酸的开放阅读框(ORF,open reading frame),编码115个氨基酸。在氨基酸水平,它与脊椎动物有49%相同(63%类似),与线虫比较,有48%相同(68%类似)。我们构建了拟南芥AtDAD1的超量表达载体,以农杆菌介导的方法转化拟南芥,比较了转基因植株与野生型植株表现型的差异,以及它们对H2O2抗性的不同。主要结果如下: 比较拟南芥AtDAD1超量表达植株与野生型植株的表现型差异,发现转基因植株发育略早于野生型植株,在幼苗期强壮于野生型。具体表现在,幼苗期,转基因植株的叶片要比野生型植株的叶片稍大稍宽,植株整体轮廓也较野生型大一些,开花稍早一些。 H2O2抑制种子萌发实验显示,当培养基中不含H2O2时,AtDAD1转基因拟南芥和野生型拟南芥萌发时间和萌发率接近一致;当H2O2的浓度较低时,不论

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 本论文缩略词表
  • 第一章 前言
  • 一 程序性细胞死亡(Programmed Cell Death)概论
  • 1. 两种细胞死亡的方式
  • 2. 动物细胞凋亡的形态学特点
  • 3. 细胞凋亡的分子途径及细胞凋亡的调控
  • 二、植物细胞凋亡的研究动态
  • 1. 植物细胞凋亡概念的提出
  • 2. 植物细胞凋亡的形态学特征
  • 3. 植物细胞凋亡的生理生化特征
  • 4. 目前已知的植物细胞凋亡相关基因
  • 三、植物细胞凋亡的生物学意义
  • 2O2在植物信号转导方面的研究进展'>四、H2O2在植物信号转导方面的研究进展
  • 五、本研究的目的和意义
  • 第二章 AtDAD1超表达载体的购建及AtDAD1超表达植株与野生型植株表型的比较
  • 一 材料与方法
  • 1. 植物材料
  • 2. 质粒
  • 3. pBS/AtDAD1重组质粒的构建
  • 4. 冻融法转化农杆菌
  • 5. 通过农杆菌转化拟南芥
  • 6. 拟南芥转化植株的检测
  • 二、实验结果
  • 1. 载体的构建与鉴定
  • 2. 表型的比较
  • 三、讨论
  • 2O2抑制萌发实验及高浓度H2O2对拟南芥叶片伤害的比较'>第三章 H2O2抑制萌发实验及高浓度H2O2对拟南芥叶片伤害的比较
  • 一 材料与方法
  • 1. 植物材料
  • 2O2抑制种子萌发实验'>2. H2O2抑制种子萌发实验
  • 2O2处理后叶片细胞生活力比较'>3. H2O2处理后叶片细胞生活力比较
  • 二、实验结果
  • 1. 转基因植株与野生型植株种子萌发率的比较
  • 2O2对转基因植株与野生型植株幼苗的伤害'>2. 高浓度H2O2对转基因植株与野生型植株幼苗的伤害
  • 三、讨论
  • 第四章 AtDAD1转基因植株和野生型植株含糖量的比较
  • 一 材料与方法
  • 1. 植物材料
  • 2. 可溶性总糖的测定
  • 二、实验结果
  • 1. 转基因拟南芥叶片与野生型拟南芥叶片可溶性总糖含量的比较
  • 三、讨论
  • 第五章 总讨论
  • 参考文献
  • 在读期间发表文章
  • 致谢
  • 相关论文文献

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