论文摘要
细胞程序性死亡(Programmed Cell Death,PCD)对于维持生物体的正常生长发育有着非常重要的作用,目前已经成为生物学研究的又一新热点。高等植物PCD的研究虽然滞后于动物PCD,但也取得了很大的成绩。近年来,植物PCD在形态学、生物化学、基因调控、信号转导等方面取得了一定研究成果。拟南芥作为模式植物在植物学研究领域有着不可替代的重要地位。DAD1(Defender against Apoptotic Death1)是一个高度保守的凋亡抑制基因,最早发现于仓鼠中,在其他脊椎动物如人类、老鼠等,以及无脊椎动物,如非洲爪蟾、线虫都已发现DAD1的同源基因。目前已经在拟南芥、水稻、玉米、豌豆、大麦、柑橘、苹果、番茄等植物中分离到DAD1的同源基因,但对其功能的研究还未深入探讨。拟南芥中DAD1的同源基因AtDAD1(Arabidopsis thaliana Defender against Apoptotic Death1)具有345个核苷酸的开放阅读框(ORF,open reading frame),编码115个氨基酸。在氨基酸水平,它与脊椎动物有49%相同(63%类似),与线虫比较,有48%相同(68%类似)。我们构建了拟南芥AtDAD1的超量表达载体,以农杆菌介导的方法转化拟南芥,比较了转基因植株与野生型植株表现型的差异,以及它们对H2O2抗性的不同。主要结果如下: 比较拟南芥AtDAD1超量表达植株与野生型植株的表现型差异,发现转基因植株发育略早于野生型植株,在幼苗期强壮于野生型。具体表现在,幼苗期,转基因植株的叶片要比野生型植株的叶片稍大稍宽,植株整体轮廓也较野生型大一些,开花稍早一些。 H2O2抑制种子萌发实验显示,当培养基中不含H2O2时,AtDAD1转基因拟南芥和野生型拟南芥萌发时间和萌发率接近一致;当H2O2的浓度较低时,不论