苯酚对多刺裸腹溞消化机能的影响

论文摘要

苯酚是重要的有机化工原料,下游产品涉及众多领域,在工业上用途很广但对环境造成的污染极其严重。本研究以多刺裸腹溞(Moina macrocopa)为实验材料,在对其外部形态结构和营养成分进行观察分析的基础上,研究了苯酚胁迫下裸腹溞肠道微绒毛形态、消化酶活力、脂肪代谢以及氨基酸组成的变化,旨在探讨裸腹溞中毒后消化机能的变化及适应机制,为苯酚的致毒机制提供科学依据。实验在扫描电镜下对多刺裸腹溞外部形态结构进行了详细观察,并运用生化方法测定了其营养成分,包括一般生化组成和氨基酸组成。采用急性毒性实验方法,设空白对照组和5个苯酚染毒组(0.25、0.75、1.25、1.75和2.25mg/L)。采用组织学方法和电镜技术,对苯酚(0.25、1.25和2.25 mg/L)处理48h的肠道显微和亚显微结构进行了观察。并且分别在苯酚处理24h和48h用分光光度法测定了消化酶活力、脂肪代谢相关指标,其中消化酶活力包括淀粉酶(Amylase)、脂肪酶(Lypase)、胰蛋白酶(Trypsinase)和蛋白酶(Protease)活力；脂肪代谢指标包括游离脂肪酸(FFA)含量、甘油三酯(TG)含量和脂蛋白脂酶(LPL)活力。运用液相色谱法测定了0.25、1.25和2.25 mg/L苯酚处理48h氨基酸组成。结果显示：(1)多刺裸腹溞雌体呈卵形,通体透明。100g多刺裸腹溞湿样中水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量分别是90.92、6.38、1.11g和0.67g。多刺裸腹溞17种氨基酸占蛋白含量的54.44%,实验未检测出色氨酸。(2)光镜下,经苯酚处理的多刺裸腹溞,纹状缘由光滑变为粗糙,甚至脱落。电镜下可以清晰地观察到,低浓度苯酚处理的裸腹溞,肠道上皮细胞排列出现轻微不整齐。中浓度苯酚处理后,微绒毛出现部分脱落和断裂,排列稀疏。而经高浓度苯酚处理的裸腹溞,肠道微绒毛排列零乱、间隙加大、形状不规则。随着苯酚浓度的增加,裸腹溞肠道上皮细胞和微绒毛受损程度明显加剧。(3)随着苯酚浓度的增加和处理时间的延长,淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和蛋白酶四种消化酶活力表现出不同的变化趋势,其中苯酚胁迫对淀粉酶活力无显著影响；脂肪酶活力在苯酚0.25和0.75mg/L处理24h后较对照组显著(P<0.05)上升；胰蛋白酶活力在24h和48h均有浓度组出现显著变化,0.75mg/L浓度组处理48h时显著升高(P<0.05)；蛋白酶活力在苯酚胁迫下,随着浓度的增加,呈现先升后降的趋势,0.75mg/L浓度组处理48h时达到最大值(P<0.01)。(4)随着苯酚浓度的增加,游离脂肪酸和甘油三酯含量均呈现逐渐下降趋势(P<0.05)；脂蛋白脂酶活力分别在24h、0.75mg/L浓度组和48h、1.25mg/L浓度组达到最高值后逐渐降低。另外,还对低(0.25mg/L)、中(1.25mg/L)、高(2.25mg/L)浓度处理48h后体内氨基酸组成进行了测定,其中有个别氨基酸与对照有显著变化,但总含量与对照无显著差异。结论：(1)多刺裸腹溞作为太原地区常见种,蛋白含量较高,在对其进行营养强化后可完全满足鱼虾蟹类生长需要,是优良的生物活体饵料。(2)中肠是多刺裸腹溞消化吸收的主要部位,苯酚暴露对肠道微绒毛造成不可逆的损伤,进而影响了裸腹溞消化功能,对生长造成不利影响。(3)苯酚胁迫下,多刺裸腹溞同化作用受到抑制；裸腹溞通过加强消化体内残留食物的能力,以产出更多的能量维持正常代谢。消化酶活性可作为裸腹溞中毒的潜在的生化指标。(4)脂肪代谢紊乱势必影响裸腹溞能量代谢,使其生长繁殖受阻,对整个种群将造成不利影响。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 综述
• 1 水溞的生物学特性
• 1.1 水溞的形态特征及生活史
• 1.2 水溞的应用价值
• 1.2.1 水溞是水产养殖中的优质饵料
• 1.2.2 水溞在环境监测中的应用
• 1.3 水溞的科研价值
• 2 苯酚毒性研究进展
• 3 水生动物消化酶研究进展
• 3.1 影响消化酶活力的因素
• 3.2 污染物对消化酶的影响
• 4 水溞消化道组织学
• 5 污染物对代谢活动的影响
• 6 多刺裸腹溞概述
• 6.1 多刺裸腹溞分类学
• 6.2 多刺裸腹溞的实验室培养
• 7 本学位论文研究的目的及意义
• 第二章 苯酚对多刺裸腹溞肠道组织结构的影响
• 摘要
• 1 实验设计
• 1.1 实验材料
• 1.2 染毒处理
• 1.3 实验方法
• 1.3.1 多刺裸腹溞形态结构观察
• 1.3.2 多刺裸腹溞肠道显微结构观察
• 1.3.3 多刺裸腹溞肠道微绒毛超微结构观察
• 1.4 仪器与试剂
• 1.4.1 实验仪器
• 1.4.2 实验试剂
• 2 结果
• 2.1 多刺裸腹溞形态结构
• 2.2 苯酚对多刺裸腹溞肠道显微结构的影响
• 2.3 苯酚对多刺裸腹溞肠道微绒毛亚显微结构的影响
• 3 讨论
• 4 结论
• Abstract
• 第三章 苯酚对多刺裸腹溞消化酶活力的影响
• 摘要
• 1 实验设计
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 染毒处理
• 1.1.2 粗酶液制备
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 消化酶活力的测定
• 1.2.2 总蛋白含量测定
• 1.3 仪器与试剂
• 1.3.1 实验仪器
• 1.3.2 实验试剂
• 1.4 数据处理
• 2 结果
• 2.1 苯酚对多刺裸腹溞淀粉酶活力的影响
• 2.2 苯酚对多刺裸腹溞脂肪酶活力的影响
• 2.3 苯酚对多刺裸腹溞胰蛋白酶活力的影响
• 2.4 苯酚对多刺裸腹溞蛋白酶活力的影响
• 3 讨论
• 4 结论
• Abstract
• 第四章 苯酚对多刺裸腹溞脂肪代谢以及氨基酸组成的影响
• 摘要
• 1 实验设计
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 染毒处理
• 1.1.2 粗酶液制备
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 营养成分分析
• 1.2.2 脂肪代谢指标的测定
• 1.2.3 总蛋白含量的测定
• 1.2.4 氨基酸组成的测定
• 1.3 仪器与试剂
• 1.3.1 实验仪器
• 1.3.2 实验试剂
• 1.4 数据处理
• 2 结果
• 2.1 多刺裸腹溞营养成分分析
• 2.1.1 水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量
• 2.1.2 多刺裸腹溞氨基酸组成
• 2.2 苯酚对多刺裸腹溞脂肪代谢的影响
• 2.2.1 苯酚对多刺裸腹溞游离脂肪酸含量的影响
• 2.2.2 苯酚对多刺裸腹溞甘油三酯含量的影响
• 2.2.3 苯酚对多刺裸腹溞脂蛋白脂酶的影响
• 2.3 苯酚对多刺裸腹溞氨基酸组成的影响
• 3 讨论
• 3.1 多刺裸腹溞营养价值评价
• 3.2 苯酚对多刺裸腹溞脂肪代谢的影响
• 3.3 苯酚对多刺裸腹溞氨基酸组成的影响
• 4 结论
• Abstract
• 参考文献
• 攻读学位期间取得的研究成果
• 致谢
• 个人简况及联系方式