论文摘要
杜仲是雌雄异株植物,是我国特有的药用植物,传统的药用部分为树皮。近年来人们逐渐认识到树叶和花同样含有多种保健成分,并开发出了一些产品。目前,对于杜仲雄花的研究仅停留在杜仲雄花茶的加工工艺上,而杜仲雄花茶加工过程中活性成分的含量变化基本没有涉及。本文在分析总结了杜仲雄花茶的化学成分及其保健功能的基础上,采用高效液相色谱法和分光度法分别对其活性成分绿原酸和总黄酮的含量及加工过程中的含量变化进行了系统研究。取得如下主要结果:(1)高效液相色谱法测定杜仲茶中绿原酸含量的色谱条件是:Kromasil-C18色谱柱(4.6mm×250mm, 5.0μm);流动相乙腈-0.4%磷酸(8:92);检测波长327nm;流速1.0ml·min-1;柱温25℃。在此条件下,能够使绿原酸与非被测成分基线分离,并且绿原酸在0.05μg0.55μg范围内有良好线性关系,样品溶液在16h之内稳定性良好,平均回收率达98.80%。该方法准确、简捷、快速可用于实际生产中绿原酸含量的测定与控制。(2)通过正交实验,结合绿原酸的稳定性,得出了从杜仲雄花茶中提取绿原酸的最佳工艺:用30倍量50%甲醇在60℃条件下加热回流提取两次,每次30min,提取率最高。(3)用分光光度法测定杜仲雄花茶中总黄酮的含量,结果表明:芦丁在0.02mg~0.1mg/mL范围内浓度与吸光度有良好的线性关系,样品溶液在3h之内并且显色后30min内黄酮类化合物与铝盐形成的红色络合物稳定性良好,平均回收率达102.2%。用分光光度法测定杜仲雄花茶中总黄酮的含量,操作简便,分析快捷,结果重现性好,可作为杜仲雄花茶在加工过程中总黄酮含量的测定与控制。(4)通过单因素实验和正交实验对杜仲雄花茶中黄酮类化合物的提取工艺进行了研究。结果表明:杜仲雄花茶中黄酮类化合物提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度60%、提取温度90℃,提取时间2h,料液比1:60,提取次数2次。影响黄酮提取率各因素的主次顺序是:乙醇浓度>提取温度>料液比>提取时间,并且乙醇浓度、提取温度对杜仲雄花中黄酮类化合物的提取有极显著影响,提取时间和料液比有显著影响。(5)杜仲雄花茶加工过程中四个主要阶段即鲜花、杀青、初炒、精炒绿原酸含量分别是0.501%、0.391%、0.363%、0.34%。总黄酮的含量分别是杜仲鲜花1.77%、杀青后1.61%、初炒后1.97%、精炒后即杜仲雄花茶成品2.07%。加工过程中绿原酸含量呈明显下降趋势。杀青后绿原酸含量损失较严重,损失率达22%,在初炒和精炒过程中绿原酸含量也有损失,但含量变化不大。总黄酮含量在杀青后明显降低,经过初炒和精炒后,总黄酮含量又逐渐升高,精炒后的总黄酮含量比鲜花提高了16.78%。
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