低剂量米非司酮对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞数量及其亚型的影响

论文摘要

研究背景：随着近代生命科学的发展，药物避孕技术不断推陈出新。米非司酮（mifepristone，RU486）是第一个用于临床的孕激素受体拮抗剂，目前已广泛应用于抗早孕。20世纪90年代，国内外均有报道米非司酮广泛用于临床紧急避孕，且用药剂量在逐步减少。近年来，研究发现每日给予低剂量米非司酮，能阻止内膜发育而起避孕作用，即所谓的“内膜避孕”，对月经周期影响少，无明显副作用。在妊娠生理中，子宫内膜对胚胎的容受性是妊娠建立的关键因素之一。在每个有排卵的月经周期中子宫内膜仅在极短的时期内（即正常月经周期的20—24天）才允许胚泡植入，称为“着床窗”和“植入窗”（implantation window），此时子宫内膜表现为特定细胞和分子事件的顺序发生，且受许多因素调控。子宫自然杀伤细胞（uNK细胞）是妊娠子宫最主要的免疫职能细胞，在胚胎植入和胎盘形成中起重要作用，参与了植入相关因子的分泌、控制滋养细胞侵入、螺旋动脉改造以及母胎界面免疫平衡的维持。大量研究表明植入窗期子宫内膜NK细胞数量及活性的异常可能是成功实行IVF-ET后植入失败和习惯性流产的原因之一。本文利用体外培养系统，运用免疫组化和流式细胞技术，研究低剂量米非司酮对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞数量及其亚型的影响，以探讨低剂量米非司酮作为抗着床避孕药的免疫学机制。材料与方法：收集14例因输卵管切除或丈夫不育，行IVF-ET妇女的子宫内膜。入选妇女月经史、生殖系统解剖、内分泌等指标均正常，近3个月内无激素类药物使用史，于月经周期第20至24天取内膜。每例内膜分成三等份，给予不同处理（分别为对照组、65 nmol／L组、200nmol／L组），组织培养24小时。采用免疫组化EnVision二步法染色，测定子宫内膜CD56+细胞在不同处理组中的表达。采用流式细胞仪检测不同处理组内膜淋巴细胞中CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分比和CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分比；NK细胞（CD3-CD56+细胞）百分比=CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分比+CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分比。结果：1．子宫内膜组织块体外培养前后形态学观察：培养前后子宫内膜均处于分泌中期，腺体、血管结构均完整，间质水肿无明显改变。2．子宫内膜CD56+细胞数量的变化：CD56阳性着色为棕黄色，定位于细胞膜，阳性细胞主要分布在腺体和血管周围的间质。三组内膜CD56阳性细胞平均数分别为：对照组112.67±7.75，65nmol／L组145.50±9.43，200nmol／L组149.33±4.47。三组CD56阳性细胞数有显著差异（P=0.01）；两处理组分别与对照组相比，显著增高（P＜0.05）；两处理组之间比较无明显差异（P＞0.05）。3．子宫内膜NK细胞亚型的变化：CD3-CD56+细胞亚型百分比分别为：对照组（37.79±6.32）％，65nmol／L（47.50±7.71）％和200nmol／L组（51.41±7.61）％。两处理组分别与对照组相比，显著增高（P＜0.05）；两处理组之间比较无明显差异（P＞0.05）。CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分比分别为：对照组（35.19±6.23）％，65nmol／L组（45.16±7.33）％和200nmol／L组（48.18±7.25）％。两处理组分别与对照组相比，显著增高（P＜0.05）；两处理组之间比较无明显差异（P＞0.05）。CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分比分别为：对照组（2.60±0.76）％，65nmol／L组（2.34±0.67）％和200nmol／L组（3.24±0.84）％。三组比较无明显差异（P=0.39）。结论：1．低剂量米非司酮能增加植入窗期子宫内膜CD56+NK细胞数量，提示低剂量米非司酮可能通过促进子宫内膜NK细胞的过度增殖，破坏植入窗期子宫内膜局部免疫微环境的平衡。2．低剂量米非司酮能增加植入窗期子宫内膜CD3-CD56+细胞及CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分含量，但对CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分含量无影响，提示低剂量米非司酮通过促进CD3-CD56+CD16-uNK细胞亚型的过度增殖，破坏植入窗期子宫内膜局部免疫微环境的平衡，从而可能导致胚胎植入的失败。

论文目录

• 一、中文摘要
• 二、英文摘要
• 三、正文
• 1、前言
• 2、材料与方法
• 3、结果
• 4、讨论
• 5、结论
• 6、参考文献
• 四、综述
• 五、致谢