清湿化瘀合剂对衣原体感染抗精子免疫性不孕的作用及机理研究

论文摘要

目的：本研究旨在应用中医学与生殖免疫学的理论与方法,通过临床研究,观察清湿化瘀合剂对沙眼衣原体感染抗精子免疫性不孕的临床疗效,为中医药治疗沙眼衣原体感染抗精子免疫性不孕提供依据,同时模拟人抗精子免疫性不孕的发病途径,建立大鼠生殖道衣原体感染抗精子免疫复合模型,研究沙眼衣原体生殖道感染抗精子免疫性大鼠子宫组织Fas/Fas-L、Bcl-2的表达,探讨生殖系统CT感染抗精子免疫性不孕的细胞凋亡的作用机理。并通过观察子宫组织和输卵管的形态特征的变化,探讨衣原体感染抗精子免疫性大鼠的炎症改变,并通过给予中药清湿化瘀合剂的干预,探讨清湿化瘀合剂对本病的治疗效果及作用机制。方法：1.临床研究：将符合纳入标准的40例沙眼衣原体感染抗精子免疫性不孕患者随机分成对照组20例和治疗组20例,对照组给予单纯西医治疗,治疗组在常规抗生素治疗的基础上加予清湿化瘀合剂,1个月为一个疗程,3个疗程后观察两组患者的临床疗效,宫颈拭子检测观察沙眼衣原体转阴情况,以及观察血清AsAb下降情况,随访半年,比较两组的临床妊娠率2.动物实验：随机将SD大鼠分为5组,A组（单纯炎症模型+生理盐水组）,B组（单纯免疫模型+生理盐水组）,C组（炎症免疫模型+清湿化瘀合剂组）,D组（炎症免疫模型+生理盐水组）,E组（空白对照+生理盐水组）。采用阴道接种的方式,分别按不同模型注入沙眼衣原体或／和人精子膜抗原,模拟自然病理发生的过程,建立动物模型,并对C组予清湿化瘀合剂灌胃治疗。实验（造模）前后分别观察大鼠的体重、形态、饮食活动和阴道分泌物等情况,造模前眼眶静脉采血,测血清AsAb水平。实验后,眼眶静脉采血,测血清AsAb水平,并取材子宫组织以及输卵管,免疫组化法测定子宫组织Fas、Fas-L以及Bcl-2蛋白的表达,以及观察子宫组织和输卵管的形态特征的变化。结果：1.临床研究：临床总疗效,治疗组治愈率为15.00%,总有效率为70.00%,优于对照组的5.00%及40.00%（P<0.05）。治疗后血清中AsAb含量治疗组平均下降了98.14IU/mL,对照组平均下降了52.15IU/m,两组比较,治疗组下降较明显,与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组AsAb转阴率为40.00%,优于对照组的15.00%（P<0.05）。治疗组CT转阴率为65.00%,优于对照组的45.00%（P<0.05）。治疗组治疗前后证候积分有显著性差异,说明治疗后患者症状有明显好转。对照组治疗前后证候积分说明治疗前后无明显改善,治疗组在改善患者症状上明显优于对照组（P<0.05）。治疗组半年内妊娠2例,妊娠率为10.00%,对照组0例,未见妊娠者,两组比较,差异无统计学意义（P>0.05）,这可能与样本量不足,随访时间过短有关。2.动物实验上,发现单纯生殖道炎症,单纯生殖道主动免疫,生殖道炎症+生殖道主动免疫组均可以产生AsAb,而且与空白对照组相比具有显著性差异（P<0.05）,而且生殖道炎症+主动免疫组大鼠AsAb定量水平较单纯生殖道炎和单纯生殖道主动免疫模型组明显的升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。A组、C组、D组大鼠子宫组织Fas/Fas-L以及Bcl-2蛋白表达水平与E组（空白对照组）比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。A、C、D三组中,C组大鼠子宫组织Fas/Fas-L蛋白表达水平最高,Bcl-2蛋白表达最低,与D组、A组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。造模后,D组大鼠出现子宫组织与输卵管充血、水肿,甚至粘连,予清湿化瘀合剂治疗后（C组）组织充血、水肿、炎性渗出及粘连明显好转,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1.清湿化瘀合剂能有效改善沙眼衣原体抗精子免疫性不孕（湿热瘀阻型）患者的临床症状,降低其血清AsAb的定量,同时与抗生素合用,有协同的作用,提高了CT的转阴率,缩短了抗生素的使用疗程,减少慢性炎症的发生,从而增加患者受孕的机会。2.用沙眼衣原体血清型E型阴道接种是沙眼衣原体感染较为成功的造模方法,此模型对沙眼衣原体在生殖道感染疾病中的科学研究工作提供了实验平台。3.沙眼衣原体感染抗精子免疫模型大鼠存在炎症细胞的凋亡障碍,炎症细胞的持续活化,清湿化瘀合剂治疗沙眼衣原体感染抗精子免疫性不孕的作用机理可能是通过上调促凋亡因子Fas/Fas-L表达,下调抗凋亡因子Bcl-2,从而促进炎症细胞的凋亡,抑制炎症反应对子宫组织的损伤,起到了保护子宫输卵管组织的作用,从而增加受孕的可能。4.清湿化瘀合剂能明显减轻大鼠的炎症反应,子宫输卵管组织充血、水肿、炎性渗出及粘连明显减轻,促进了组织修复。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 上篇 文献研究
• 1 中医对沙眼衣原体感染抗精子免疫性不孕的认识
• 1.1 病名的认识
• 1.2 病因病机的认识
• 1.3 免疫性不孕的中医治疗方法
• 2. 现代医学对沙眼衣原体感染抗精子免疫性不孕的认识
• 2.1 女性抗精子免疫性不孕与沙眼衣原体感染
• 2.2 沙眼衣原体感染的免疫功能变化
• 2.3 沙眼衣原体感染与细胞凋亡
• 2.4 沙眼衣原体感染模型及抗精子免疫模型
• 2.5 抗精子抗体免疫性不孕及衣原体感染的治疗
• 中篇 临床研究
• 1. 临床资料
• 1.1 病例来源
• 1.2 诊断标准
• 1.3 纳入标准
• 1.4 排除标准
• 2 方法
• 2.1 分组方法
• 2.2 治疗方法
• 2.3 观察指标及方法
• 2.4 疗效判定标准
• 2.5 统计学处理
• 3. 结果
• 3.1 两组性别、年龄、病程分布情况
• 3.2 两组临床疗效比较
• 3.3 两组组治疗前后AsAb下降情况的比较
• 3.4 两组治疗后AsAb转阴率比较
• 3.5 两组治疗后CT转阴率比较
• 3.6 两组CT转阴的治疗疗程比较
• 3.7 两组治疗前后证候积分的比较
• 3.9 两组治疗后妊娠率比较
• 3.10 安全性观察及不良反应
• 4. 讨论与分析
• 4.1 研究背景
• 4.2 沙眼衣原体抗精子免疫性不孕的相关因素
• 4.3 清湿化瘀合剂组方依据及分析
• 4.4 疗效与结果分析
• 4.5 本研究的局限性
• 下篇 实验研究
• 1. 研究目的
• 2. 研究方法
• 2.1 动物与材料
• 2.2 主要实验设备及仪器
• 2.3 方法与步骤
• 2.4 正式实验
• 2.5 观察指标及方法
• 2.6 统计方法
• 3. 结果
• 3.1 一般情况
• 3.2 各组造模前后体重的变化
• 3.3 各种大鼠血清AsAb定量的变化
• 3.4 各种大鼠子宫组织Fas、Fas-L、Bcl-2蛋白的表达情况
• 3.5 形态学观察结果
• 4. 讨论
• 4.1 沙眼衣原体感染抗精子免疫动物模型的建立
• 4.2 清湿化瘀合剂对沙眼衣原体感染抗精子免疫大鼠的作用机制研究
• 4.3 不足与展望
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 附录一
• 附录二:附图
• 研究生在学期间发表论文情况
• 致谢