稻壳黄酮类化合物的提取、精制及抗氧化活性研究

论文摘要

本文首先以稻壳为原料详细研究了提取分离黄酮类化合物的方法与条件,建立了最佳提取与纯化工艺,然后初步鉴定了黄酮类化合物的结构类型,最后对稻壳黄酮提取物的抗氧化活性进行了研究,这些都为稻壳黄酮在保健食品和中药开发与应用中奠定了良好的基础。首先采用醇提取法,研究稻壳中黄酮类化合物的提取工艺。在提取过程中,通过单因素试验考察了浸提溶剂浓度、浸提温度、浸提时间、料液比和浸提次数等5个主要因素对稻壳中黄酮类化合物提取效率的影响。在单因素的基础上,通过正交试验L9（34）,得到最佳提取条件为乙醇浓度50%,浸提温度70℃,浸提时间6h,料液比1:30,浸提次数3次。此前,先通过不同显色方法以及它们的紫外光谱特征,发现利用紫外吸收光谱测定稻壳中黄酮含量宜采用AlCl3法(λmax=275nm)。然后对稻壳乙醇提取液中黄酮的纯化进行了研究,通过五种大孔吸附树脂对稻壳黄酮的吸附和解吸性能的比较,筛选出最适合精制稻壳黄酮的大孔吸附树脂为AB-8树脂,并通过单因素与正交试验确定了其吸附与解吸的最佳条件。此外,还考察了动态吸附泄漏曲线和动态解吸曲线,确定了合适的上样液与洗脱液体积。按最佳吸附和解吸条件,经AB-8树脂富集后,稻壳提取液黄酮纯度提高了3.09倍,达到了富集、分离的目的。通过黄酮类化合物与特殊试剂的颜色反应和稻壳黄酮类化合物的PPC、TLC、UV、IR、HPLC等谱图特征判断其基本结构,结果表明稻壳黄酮提取物的主要成分是一种具有5,7和4’-OH的C-糖苷黄酮类化合物。最后在抗氧化性实验中,通过不同浓度的Vc、BHT（2,6-二叔丁基对-甲酚）和稻壳黄酮乙醇溶液的还原能力比较、对二苯代苦味酰自由基（DPPH·）、超氧阴离子自由基（O2-）、羟自由基（·OH）的清除能力比较、以及在卵黄脂蛋白、猪油等不同体系中抗脂质过氧化的能力比较。实验表明:稻壳黄酮对DPPH·、O2-、·OH都具有较强的清除能力,其清除能力随着溶液浓度的增大而增大;稻壳黄酮对多不饱和脂肪酸（PUFA）过氧化体系有很强的抑制作用,这种抑制作用也随着反应体系中溶液浓度的增大而增强;从抑制猪油氧化实验可以看出,稻壳中黄酮提取物具有较强的抗脂质过氧化的能力。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 中文文摘
• 目录
• 第1章 绪论
• 1.1 稻壳的研究概况
• 1.1.1 稻壳简介
• 1.1.2 稻壳的开发与利用现状
• 1.2 黄酮类化合物
• 1.2.1 黄酮类化合物基本结构和分类
• 1.2.2 黄酮苷的构成方式
• 1.2.3 黄酮类化合物的理化性质及显色反应
• 1.2.4 黄酮类化合物的提取和分离
• 1.2.5 黄酮类化合物含量的测定
• 1.2.6 黄酮类化合物的检识与结构鉴定
• 1.2.7 黄酮类化合物的生物活性及应用
• 1.3 立题背景与研究内容
• 1.3.1 立题背景
• 1.3.2 研究内容
• 1.3.3 本研究的创新之处
• 第2章 稻壳中总黄酮提取工艺的研究
• 2.1 前言
• 2.2 材料与仪器
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 稻壳中总黄酮提取液的制备
• 2.3.2 稻壳黄酮提取液的紫外-可见吸收光谱分析
• 2.3.3 芦丁标准液的配制及标准曲线的绘制
• 2.3.4 稻壳中总黄酮含量的测定
• 2.3.5 单因素试验
• 2.3.6 正交试验
• 2.4 结果与分析
• 2.4.1 利用紫外-可见吸收光谱分析确定最佳含量测定方法
• 2.4.2 芦丁标准曲线的绘制
• 2.4.3 单因素试验
• 2.4.4 稻壳中总黄酮提取条件的确定
• 2.5 小结
• 第3章 稻壳中黄酮提取物的精制富集
• 3.1 前言
• 3.2 材料与仪器
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 稻壳中黄酮类化合物提取液的制备
• 3.3.2 稻壳中黄酮类化合物的精制富集
• 3.3.3 AB-8树脂富集能力
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 稻壳中黄酮类化合物提取液的含量测定
• 3.4.2 大孔吸附树脂的筛选
• 3.4.3 AB-8型树脂吸附-解吸工艺条件的研究
• 3.4.4 AB-8树脂富集能力
• 3.5 小结
• 第4章 稻壳中黄酮提取物结构的初步鉴定
• 4.1 前言
• 4.2 材料与仪器
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 稻壳中黄酮类化合物结构的初步鉴定工艺流程
• 4.3.2 熔点的测定
• 4.3.3 通过颜色反应初步鉴定样品中黄酮类化合物的结构
• 4.3.4 层析法
• 4.3.5 紫外光谱（UV）分析
• 4.3.6 高效液相色谱（HPLC）分析
• 4.3.7 红外光谱（IR）分析
• 4.4 结果与分析
• 4.4.1 产品的理化性质解析
• 4.4.2 产品的层析结果分析
• 4.4.3 产品的UV谱图解析
• 4.4.4 产品的HPLC分析
• 4.4.5 产品的IR分析
• 4.5 小结
• 第5章 稻壳中黄酮提取物的抗氧化性质研究
• 5.1 前言
• 5.2 材料与仪器
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 还原能力的测试
• 5.3.2 稻壳黄酮提取物对DPPH·自由基的清除作用
• 2^·-自由基的清除作用'>5.3.3 稻壳黄酮提取物对O₂^·-自由基的清除作用
• 5.3.4 稻壳黄酮提取物清除·OH自由基的能力分析测定
• 2+诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系的抑制作用'>5.3.5 稻壳黄酮提取物对Fe²⁺诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系的抑制作用
• 5.3.6 稻壳黄酮提取物抗猪油氧化性试验
• 5.4 结果与分析
• 5.4.1 还原能力的测定
• 5.4.2 稻壳黄酮提取物对DPPH·自由基的清除作用
• 2^·-自由基的清除作用'>5.4.3 稻壳黄酮提取物对O₂^·-自由基的清除作用
• 5.4.4 稻壳黄酮提取物对·OH自由基的清除作用
• 2+诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系的抑制作用'>5.4.5 稻壳黄酮提取物对Fe²⁺诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系的抑制作用
• 5.4.6 稻壳黄酮提取物抗猪油氧化性作用
• 5.5 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
• 致谢