非特异性免疫调节对自发性高血压大鼠左心室重构作用的实验研究

论文摘要

背景高血压病是遗传和环境等多种因素所致的全球性常见病,是充血性心力衰竭（congestive heart failure, CHF）的主要病因之一。心室重构作为高血压向心力衰竭方向发展的重要病理过程,其组织病理学特点是心肌细胞肥大、丢失、心肌间质纤维化,其中心肌细胞外基质成分的重构包括胶原蛋白数量、种类及质量的改变,目前倍受广大学者关注。以往的研究显示,在高血压发展过程中,心肌纤维化主要受血流动力学和神经体液激素的影响,并且发现血管紧张素转换酶抑制剂（angiotensin convertion enzyme inhibitor, ACEI）、血管紧张素II受体拮抗剂（angiotonin II type-1 receptor antagonists, ARB）和醛固酮拮抗剂等药物的应用不仅可以有效降低血压,还能减轻心肌纤维化。有趣的是,近年来研究提示,ACEI、ARB和醛固酮拮抗剂等药物减轻心肌纤维化的作用可能部分归因于它们的免疫调节作用。有报道,在高血压的发生发展过程中,免疫系统被激活,分泌各种炎症介质,包括各种细胞因子、趋化因子和黏附分子,由此加速心室重构的发展,同时激活的纤维母细胞也参与分泌和合成胶原。这些资料促使人们探讨通过非特异性免疫调节的方法来延缓心室重构的可能性。雷公藤甲素（triptolide, TP）作为一种非特异性免疫调节药,临床上广泛用于风湿等自身免疫性疾病的治疗已有多年,但其对高血压心室重构的影响,国内外尚无研究。目的探讨雷公藤甲素非特异性免疫调节对自发性高血压大鼠左心室重构和心功能的影响,对外周血炎症介质表达的影响,并对其作用机理进行初步探讨。方法20只12月龄的自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats, SHR）随机分为雷公藤甲素治疗组（SHR-T组）和生理盐水对照组（SHR-C组）,每组各10只,并以10只同龄的SD大鼠作为正常对照组（SD组）。分别用TP（10μg·kg-1·d-1, i.p, SHR-T组）、生理盐水（1.0 mL·kg-1·d-1, i.p, SHR-C组）和生理盐水（1.0 mL·kg-1·d-1, i.p, SD组）干预8周。治疗前及治疗过程中每2周以容积法测量尾动脉收缩压,采用超声心动图评价心脏结构和功能,测定左室质量指数（left ventricular mass index,LVMI）,HE染色观察光镜下心肌细胞形态和结构的变化,Masson特殊染色法和分光光度法测定心肌胶原蛋白含量,免疫组织化学染色法检测左心室I型胶原和III型胶原蛋白表达,放射免疫分析法检测外周血中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、白介素-6（interleukin-6, IL-6）、白介素-10（interleukin-10,IL-10）的表达水平。结果1、雷公藤甲素治疗对SHR血压的影响:与同龄SD大鼠相比12月龄SHR收缩压明显升高（P<0.01）,雷公藤甲素治疗并不影响尾动脉收缩压（P>0.05）。2、雷公藤甲素治疗对SHR左心室重构和心功能的影响:①SHR的LVMI明显高于同龄的SD大鼠（P<0.01）,雷公藤甲素治疗后LVMI无明显改变（P>0.05）。此外,HE染色显示:SHR组心肌细胞较同龄SD大鼠相比明显肥大、并可见心肌纤维排列紊乱,血管壁增厚;雷公藤甲素治疗后上述表现均无明显改变。②Masson特殊染色法和胶原蛋白含量测定显示:与同龄SD大鼠相比,SHR组心肌胶原蛋白含量、心肌胶原容积分数（collagen volume fraction, CVF）、血管周围胶原面积（perivascular collagen area, PCVA）明显增加（P均<0.01）,雷公藤甲素治疗后与SHR-C相比心肌胶原蛋白含量、心肌CVF明显下降（P均<0.01）,但仍高于SD组（P<0.01）, PCVF有所减少,但未达统计学差异（P>0.05）。此外,免疫组织化学染色显示:与同龄SD大鼠相比,SHR组I型胶原和III型胶原蛋白含量明显增加（P均<0.01）,I/III胶原比例增加（P<0.01）;雷公藤甲素治疗后与SHR-C相比,I型胶原蛋白含量明显减少（P<0.01）但仍高于SD组（P<0.01）,III型胶原蛋白含量轻度增加（P>0.05）,I/III胶原比例显著减少（P<0.01）,但仍高于SD组（P<0.01）。③超声心动图显示:SHR组左室射血分数（left ventricular ejection fraction, LVEF）和缩短分数（fractional shortening, FS）明显低于同龄SD大鼠（P均<0.05）,雷公藤甲素治疗后LVEF和FS略有增加,但无明显差异（P>0.05）。3、和雷公藤甲素治疗对SHR血清中炎症因子表达水平的影响:①与同龄SD大鼠相比,SHR血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均明显增加（P<0.01）,雷公藤甲素治疗后可明显降低SHR外周血中上述促炎细胞因子的表达水平（P<0.01）。②与同龄SD大鼠相比SHR血清IL-10含量略有增加,但无明显差异（P>0.05）,雷公藤甲素治疗后有所增加（P>0.05）,与SD组比较（P<0.05）。结论雷公藤甲素治疗对SHR血压和心肌肥厚并无明显作用,但对SHR外周血中细胞因子具有调节作用,同时可以减轻心肌纤维化,轻度改善心功能。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语表
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 讨论
• 参考文献
• 结论
• 综述
• 心肌纤维化——一个慢性炎症反应过程
• 正文
• 综述参考文献
• 致谢
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