论文摘要
病毒性心肌炎（VM）是由病毒引起的心肌局限性或弥漫性炎症,严重者可致扩张型心肌病甚至猝死。其主要发病机制为心肌炎性、免疫反应和自身免疫反应。在与人类心肌炎相关的多种病毒中,柯萨奇病毒B3（CVB3）是公认的主要病因。对于CVB3导致病毒性心肌炎的致病机制已有很多研究。总的来说,是病毒感染与不同疾病阶段的宿主免疫反应之间共同作用的结果。固有免疫和适应性免疫都在心肌损伤发生发展过程中起了重要的决定性要素,但具体病毒的那些因子是引起病毒性心肌炎的关键因子,其具体细胞生物学和免疫学机制如何,尚有许多不清楚的地方。本实验首先根据CVB3保守序列设计引物,通过PCR扩增并克隆了一株心肌炎相关的CVB3基因组的蛋白编码区域,经序列分析确认,该序列长6555nt,编码一个2185a.a.的多聚蛋白。与已知的CVB3比较,核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均高于99%。随后,利用扩增出的基因片段,分别构建了表达病毒5个成熟蛋白的表达质粒,并用于转染大鼠心肌细胞H9C2,分析了转染细胞中相关细胞炎症因子的表达情况。结果表明,在转染细胞中绝大部分验证因子的表达水平并未发生明显上升,但在病毒感染和表达VP4、2B、3C等蛋白的转染细胞中,TGF-β的表达有明显上升。本研究发现若干病毒蛋白的表达可以导致TGF-β表达的改变。近期的研究表明,TGF-β可能在心肌纤维化和炎症反应中起重要作用,本研究的结果可以为进一步阐明了柯萨奇病毒B3型引发病毒性心肌炎的病理机制,为病毒性心肌炎治疗以及创新药物研究开发提供依据。
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