甲基化抑制剂对白血病细胞中SHP-1、JAK3、TYK2基因表达的影响

论文摘要

目的:研究甲基化抑制剂对JAK-STAT信号转导通路中JAK家族成员JAK3、TYK2和造血细胞磷酸酶SHP-1在白血病细胞株中的表达情况的影响,并探讨它们在白血病发病中的作用。方法:本试验研究对象为慢性髓细胞白血病细胞株K562和白血病细胞株U937。将细胞悬浮培养于含10%热灭活（56℃,30min）的小牛血清RPMI1640培养基中。取对数生长期的细胞转入培养板,每孔1×106/ml细胞。5-aza-CdR浓度为0.5、1、2μmol/l（共3孔）,As2O3的浓度为1、2.5、5μmol/l（共3孔）,As2O3 1μmol/l + 5-aza-CdR 0.5μmol/l、As2O3 2.5μmol/l + 5-aza-CdR 1μmol/l、As2O3 5μmol/l + 5-aza-CdR 2μmol/l （各1孔）,不加药物1孔。10种不同处理的细胞均各设2个复孔。细胞和药物在37℃、5%CO2条件下孵育24h、48h、72h后收获并洗涤,Trizol提取细胞总RNA,荧光实时定量PCR（Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,RQ-PCR）检测JAK3、TYK2及SHP-1的表达。结果:1 SHP-1 mRNA在K562细胞中的表达:As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时,呈剂量及时间依赖性,其表达逐渐升高,有显著差异,均有统计学意义（p<0.05）。2 JAK3 mRNA在K562细胞中的表达:As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时,呈剂量及时间依赖性,其表达逐渐降低,有显著差异,均有统计学意义（p<0.05）。3 TYK2 mRNA在K562细胞中的表达:As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时,呈剂量及时间依赖性,其表达逐渐降低,有显著差异,均有统计学意义（p<0.05）。4 SHP-1 mRNA在U937细胞中的表达:As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时,呈剂量及时间依赖性,其表达逐渐升高,有显著差异,均有统计学意义（p<0.05）。5 JAK3 mRNA在U937细胞中的表达:As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时,呈剂量及时间依赖性,其表达逐渐降低,有显著差异,均有统计学意义（p<0.05）。6 TYK2 mRNA在U937细胞中的表达:As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时,呈剂量及时间依赖性,其表达逐渐降低,有显著差异,均有统计学意义（p<0.05）。7 SHP-1、JAK3、TYK2三者之间相关性: SHP-1与JAK3、TYK2负相关,JAK3所受影响较TYK2更为显著。结论:1对K562和U937细胞株应用甲基化抑制剂5-aza-CdR和As2O3,单独及合用时,随着浓度增高,作用时间延长,SHP-1表达升高,JAK3,TYK2表达降低,且两药有协同去甲基化作用。2 SHP-1基因可能通过抑制JAK/STAT通路发挥作用,JAK3所受影响较TYK2更为显著。在JAK/STAT通路中,JAK3可能发挥更重要的作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩写
• 研究论文 甲基化抑制剂对白血病细胞中 SHP-1、JAK3、TYK2 基因表达的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 甲基化与白病
• 致谢
• 个人简历