环孢素A对大鼠急性脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响

论文摘要

目的:探讨急性脊髓损伤后应用环孢素A（CsA）对iNOS表达及细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠急性脊髓损伤实验动物模型。108只大鼠随机分成分成单纯椎板切除组（对照组）、脊髓损伤组（损伤组）,脊髓损伤后CsA治疗组（治疗组）。不同时间点麻醉处死、插管灌注、损伤节段脊髓取材、固定过夜、包埋、切片。用HE染色观察损伤脊髓病理变化;用免疫组织化学EnVision法检测iNOS表达变化,原位末端标记法（TUNEL法）标记细胞凋亡;利用HPIAS-2000高清晰度彩色病理图文报告管理系统对iNOS的表达进行定量分析,通过显微镜下凋亡指数检测细胞凋亡。结果:1、HE染色后光镜下观察:对照组大鼠脊髓可见白质、灰质和灰质中的前角与后角以及中央管。损伤组及治疗组伤后6h脊髓已出血,尚无坏死。随着时间延长,损伤组脊髓出现广泛灶性出血及出血后形成的囊腔,神经元变性坏死、溶解,有大量小胶质细胞增生和中性粒细胞浸润。随着时间延长,治疗组脊髓有灶性出血,神经元细胞肿胀,部分神经细胞变性坏死,但出血、小胶质细胞增生和炎细胞浸润均较损伤组轻。2、iNOS在对照组大鼠脊髓呈可疑阳性表达,损伤组大鼠脊髓呈强阳性表达,治疗组大鼠脊髓呈弱阳性表达。损伤后6h损伤组和治疗组即有iNOS表达;损伤后7d iNOS表达达高峰,10d表达明显减弱。治疗组iNOS表达较损伤组低,高峰发生在损伤后3d。三组各时间点的图像分析结果经单因素方差分析,差别有统计学意义（6h:F=89. 449,P<0.01;12h:F=24.640,P<0.01;24h:F=72.699,P<0.01;3d:F=190.527,P<0.01;7d:F=160.347,P<0.01;10d:F=328.885,P<0.01）。3、对照组大鼠脊髓可见散在、少量TUNEL标记阳性细胞,损伤组可见多量TUNEL标记阳性细胞,治疗组可见中等量TUNEL标记阳性细胞。损伤后6h损伤组和损伤后CsA治疗组即有TUNEL标记阳性细胞表达;损伤后7dTUNEL标记阳性细胞表达达高峰,损伤后10dTUNEL标记阳性细胞表达则明显减少。治疗组TUNEL标记阳性细胞较损伤组低,高峰发生在损伤后3d,以后逐渐降低。三组各时间点的凋亡指数结果经单因素方差分析,差别有统计学意义（6h:F=180.432,P<0.01;12h:F=491.523,P<0.01;24h:F=594.093,P<0.01;3d:F=1110.324,P<0.01;7d:F=837.660,P<0.01;10d:F=389.124, P<0.01）。结论:CsA能抑制大鼠急性脊髓损伤后iNOS的表达及细胞凋亡,减轻脊髓继发性损伤。

论文目录

• 英文缩略表
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述《环孢素 A 在急性脊髓损伤中的作用与研究进展》
• 致谢