氡及其子体对大鼠靶器官的损伤效应及氡防护剂防护效果的研究

论文摘要

目的：研究高氡暴露对大鼠肺、外周血细胞的影响并探讨其机制，在此基础上筛选氡对机体危害的早期分子标志物，并观察自主研制的中药复方制剂—氡防护剂对染氡大鼠损伤的防护效果。方法：（1）染氡大鼠模型的建立：将30只雄性SD大鼠，随机分为5组，分别为：对照组、60工作水平月（working level month，WLM）组、90WLM组、120WLM组、氡防护剂组，每组6只。除对照组外，其各组整体暴露于多功能生态氡室；其中，氡防护剂组于每次染氡前灌服氡防护剂3ml/只，累积氡暴露剂量为120WLM，对照组大鼠置于动物房正常环境中饲养，除环境本底氡浓度小于80Bq/m3外，其它条件与氡暴露组大鼠相同。（2）肺组织病理学观察：达到氡暴露剂量后，麻醉大鼠，快速取出气管及肺组织，观察大体结构，用福尔马林中性液固定，病理学常规取材、脱水、浸蜡、包埋、切片、HE染色，封片后显微镜下观察肺组织病理学形态。（3）以黄嘌呤氧化酶—羟胺法测定各组大鼠肺组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，硫代巴比妥酸法（thiobarbituric acid，TBA）测定丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量变化。（4）采用五分类血液分析仪检测外周血白细胞计数及分类变化。（5）采用酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）技术定量测定大鼠血清肿瘤标志物癌胚抗原（carcino-embryonic antigen，CEA）、神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、细胞角蛋白片段21-1（cytokeratin19Fragment，CYFRA21-1）及p53抗体（p53antibody）水平变化。（6）采用SAS V8进行统计分析，数据以均数±标准差（x±s）表示，组间差异进行方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。结果：（1）肺组织形态学观察：各种剂量氡暴露大鼠肺组织主要病理变化为：肺间质充血、水肿、有急性或慢性炎症细胞浸润、肺泡间隔断裂、融合、数个肺泡融合成肺大泡，上述病理变化程度随氡累积暴露剂量的增加而加重，120WLM组大鼠肺泡毛细血管血栓的发生率显著高于其它组；而120WLM-氡防护剂组较120WLM组大鼠肺病理学损伤明显减轻，肺部结构尚完整；各组大鼠均未见细胞异型性变、癌前病变及肿瘤发生。（2）氧化损伤效应：随着染氡剂量的增加，大鼠肺组织中MDA含量显著升高（P<0.05），SOD活性显著降低（P<0.05）；且各剂量组间均有显著性差异（P<0.05）。氡防护剂组与同剂量染氡组相比，MDA含量显著降低（P<0.05），SOD活性显著上升（P<0.05）。（3）外周血中白细胞计数及分类变化：与对照组相比，随着大鼠染氡剂量的增加，白细胞总数有增加趋势，但无统计学意义（P>0.05），粒细胞比例显著增加（P<0.05），淋巴细胞比例显著降低（P<0.05）；氡防护剂组较同剂量染氡组白细胞总数和粒细胞数均显著降低（P<0.05），淋巴细胞数有增加趋势，但无显著差异（P>0.05）。（4）肿瘤标志物及p53抗体水平变化：与对照组相比，随着染氡剂量的增加，大鼠血清CEA、NSE、CYFRA21-1及p53抗体浓度均显著增加（P<0.05），氡防护剂组较同剂量染氡组CEA、NSE、CYFRA21-1及p53抗体浓度均显著降低（P<0.05）。结论：（1）氡暴露大鼠可出现肺间质充血、水肿、炎性细胞浸润、肺泡间隔断裂、肺大泡形成、肺泡毛细血管血栓形成等病理学改变，且病变程度随染氡剂量的增加而加重，其发生机制之一可能与肺组织中MDA含量升高、SOD活性降低引起的肺组织氧化损伤有关。（2）氡暴露大鼠外周血粒细胞比例增加，淋巴细胞比例降低，且与氡暴露剂量相关，粒细胞/淋巴细胞比值可作为氡累积暴露剂量初步估算的一个参考指标。（3）氡暴露大鼠血清CEA、NSE、CYFRA21-1及p53抗体水平显著升高，且与氡暴露剂量相关，可用于高氡暴露人员健康体检及肺癌早期筛查的参考指标。（4）氡防护剂能有效减轻高氡暴露所致肺组织损伤程度及降低血清肿瘤标志物水平，具有较好的氡损伤防护效果，值得进一步深入研究。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 高氡暴露大鼠肺组织病理学变化及其氧化损伤机制研究
• 1.1 材料、试剂、方法
• 1.2 统计学分析
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 第二部分 高氡暴露大鼠血液白细胞、肿瘤标志物及 p53 抗体水平变化研究
• 2.1 材料、试剂、方法
• 2.2 统计学分析
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 第三部分 氡防护剂对氡暴露大鼠损伤的防护作用研究
• 3.1 材料、试剂、方法
• 3.2 统计学分析
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 中英文对照缩略词表
• 攻读学位期间发表论文
• 致谢