论文摘要
目的：乳腺癌的发病率逐年上升,目前已经成为女性最常见的恶性肿瘤之一。随着生活方式的改变,糖尿病的发病率也呈上升趋势。2型糖尿病和乳腺癌有一些共同的危险因素,例如肥胖和年龄等。有研究发现糖尿病人患乳腺癌的风险比正常人群增加。2型糖尿病能促进乳腺癌的进展,导致致死率上升。流行病学研究表明2型糖尿病与乳腺癌密切相关。2型糖尿病人的血糖升高,高糖环境下肿瘤细胞可能通过提高糖的利用率来促进细胞增殖、迁移和侵袭。肿瘤细胞的高代谢状态会导致大量错误折叠或者未折叠蛋白,这些蛋白的降解可能会通过泛素蛋白酶体系统。我们推测可能高糖状态下通过激活泛素蛋白酶体系统加速蛋白降解,从而保证肿瘤细胞的旺盛繁殖。本文将探讨高糖状态下泛素蛋白酶体系统对于乳腺癌细胞MCF-7的增殖、迁移和侵袭的影响以及泛素蛋白酶体系统的激活是否由PKCδ介导。方法：（1）高糖对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移和侵袭的影响：我们分别采用MTT和TUNEL法检测乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡,并用划痕实验检测细胞迁移能力的改变,transwell法检测细胞的侵袭能力的改变。（2）我们进一步探讨高糖状态下MCF-7细胞的UPS是否被激活,以及这种效应是否由高糖所导致：我们用Peptidase assay检测不同糖浓度下MCF-7细胞的UPS活性。感染腺病毒GFPu/RFP后,Western blot检测不同糖浓度下GFPu/RPF。在高糖环境下加入UPS的抑制剂硼替佐米（bortezomib）后,分别采用MTT和TUNEL法检测乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡,并用划痕实验检测细胞迁移能力的改变,transwell法检测细胞的侵袭能力的改变。（3）我们进一步探讨高糖状态下MCF-7细胞的UPS的激活是否由PKCδ所介导：我们用Western blot检测不同糖浓度下p-PKCδ/PKCδ, Peptidase assay检测高糖状态下加入PKC8的抑制剂Rottlerin后MCF-7细胞的UPS活性。为了进一步明确PKC8和UPS的关系,在感染腺病毒GFPu/RFP后,我们用Western blot检测不同条件下GFPu和RFP的表达。转染PKCδ/shRNA后,Western blot检测GFPu、 RFP、PKC8的表达。在高糖环境下加入Rottlerin后,分别采用MTT和TUNEL法检测乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡,并用划痕实验检测细胞迁移能力的改变,transwell法检测细胞的侵袭能力的改变。结果：（1）高糖能够通过激活UPS来促进MCF-7细胞的增殖,抑制其凋亡,增强其迁移和侵袭能力。（2）蛋白酶体抑制剂硼替佐米（BZM）能够抑制高糖所引起的MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力的改变。（3）高糖使PKCδ磷酸化增加。（4） PKCδ的特异性抑制剂rottlerin能够显著抑制高糖导致的MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力的改变。（5） rottlerin和转染PKCδ/shRNAd都能够显著抑制UPS的活性。结论：我们的结论首次证实,在高糖环境下,由PKCδ介导的UPS的激活能够促进MCF-7细胞的生长和侵袭。PKCδ介导UPS上调的机制和其病理生理后果为我们提供了乳腺癌的诊断和治疗的重要信息。
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标签：高糖论文; 乳腺癌论文; 泛素蛋白酶体系统论文; 蛋白激酶论文;