新型佐剂对FMDV核酸疫苗免疫效果的影响

新型佐剂对FMDV核酸疫苗免疫效果的影响

论文摘要

口蹄疫(foot and mouth disease, FMD) 是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物多发的一种急性、热性和传播极为迅速的接触性传染病。目前,针对预防口蹄疫疾病的爆发和流行,多数发展中国家主要采用注射灭活疫苗的方法,但灭活疫苗存在灭活不彻底和保护期短等缺点。因此,新型口蹄疫疫苗及策略的研究已成为亟待解决的焦点。DNA 疫苗由于能同时诱导机体产生特异性的体液和细胞免疫反应等优点,已经成为研究者关注的焦点之一,但单独使用DNA 疫苗在大动物体或人体诱导的免疫反应效果不理想,必须利用佐剂等方法增强其免疫原性。本研究以表达口蹄疫VP1 蛋白的重组质粒pcD-VP1 作为抗原质粒辅以不同的佐剂免疫小鼠,研究佐剂对于FMDV 核酸疫苗免疫效果的影响。以pcD-VP1 重组质粒与1%左旋咪唑LMS 混合免疫不同遗传背景的昆明白小鼠、Balb/C 小鼠和C57 小鼠,对照组只注射pcD-VP1。比较在不同遗传背景的小鼠上,LMS 对FMDV 核酸疫苗免疫效果的影响。结果发现LMS 既能增强体液免疫反应,又能增强细胞免疫反应,可以作为FMDV 核酸疫苗有效的化学佐剂。基于以上实验结果,我们期望得到一种更为经济、免疫效果更好、拥有独立知识产权的佐剂,即这种佐剂能刺激机体产生较强的体液免疫和细胞免疫反应,使机体产生有效的免疫记忆或长期的免疫力,以上免疫结果最好是在无需加强免疫的情况下产生。本研究以FMDV抗原重组质粒pcD-VP1为核酸疫苗混以不同组合的佐剂免疫小鼠,免疫用佐剂为LMS 组的小鼠作为对照组。以不同的免疫程序来检测佐剂对FMDV 核酸疫苗免疫效果的影响。结果显示以角鲨烯为主要成分的佐剂具有理想的免疫佐剂效果,能够同时提高小鼠针对FMDV 的特异性体液免疫和细胞免疫,且可在较短时间内产生较高水平的抗体,是一种较为理想的佐剂。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 缩略语
  • 第一部分 文献综述
  • 第一章 免疫佐剂的研究进展
  • 第二章 DNA 疫苗及其免疫效果的影响因素
  • 第二部分 实验材料、技术与方法
  • 第一章 质粒的鉴定及制备
  • 第一节 质粒pcD-VP1 的鉴定及转化
  • 第二节 抗原质粒pcD-VP1 的大量制备
  • 第二章 新型佐剂对FMDV DNA 疫苗免疫效果的研究
  • 第一节 动物免疫
  • 第二节 FMDV 抗体的ELISA 检测
  • 第三节 鼠脾脏T 细胞扩增检测
  • 第四节 鼠脾脏细胞表达各种细胞因子水平的检测
  • 第五节 迟法型超敏反应(DTH)检测
  • 第三部分 实验及结果
  • 第一章 左旋咪唑在不同品系小鼠上增强FMDV 核酸疫苗免疫效果的研究
  • 第二章 新型佐剂对FMDV 核酸疫苗免疫效果的影响
  • 第三章 透明质酸酶和油酸增强外源基因在机体内的表达
  • 致谢及个人简历
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